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Hesperadin Inhibiteur d'Aurora B

Réf. Catalogue: S1529

Hesperadin inhibe puissamment Aurora B avec une IC50 de 250 nM dans un essai sans cellules. Il réduit nettement l'activité de l'AMPK, de la Lck, du MKK1, du MAPKAP-K1, du CHK1 et du PHK, tandis qu'il n'inhibe pas l'activité du MKK1 in vivo.
Hesperadin Aurora Kinase Inhibiteur Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 516.65

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Contrôle Qualité (Quality Control)

Lot : Pureté : 99.09%
99.09

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Lignées cellulaires Type d'essai Concentration Temps d'incubation Formulation Description de l'activité PMID
HepG2 cells Cytotoxicity assay 48 h Cytotoxicity against human HepG2 cells after 48 hrs by MTT assay, TC50=0.2 μM
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Informations chimiques, stockage et stabilité (Chemical Information, Storage & Stability)

Poids moléculaire 516.65 Formule

C29H32N4O3S

 Stockage (À compter de la date de réception)
N° CAS 422513-13-1 Télécharger le SDF Stockage des solutions mères

Synonymes N/A Smiles CCS(=O)(=O)NC1=CC2=C(C=C1)NC(=C2C(=NC3=CC=C(C=C3)CN4CCCCC4)C5=CC=CC=C5)O

Solubilité (Solubility)

In vitro
Lot:

DMSO : 100 mg/mL (193.55 mM)
(Le DMSO contaminé par l'humidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant l'expérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter d'abord s'il n'y a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter d'abord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant d'ajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous d'ajouter le(s) solvant(s) dans l'ordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de l'ajout précédent, est une solution claire avant de procéder à l'ajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme d'action (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
TbAUK1
(Cell-free assay)
40 nM
Aurora B (human)
(Cell-free assay)
250 nM
In vitro
Hesperadin inhibits the ability of immunoprecipitated Aurora B to phosphorylate histone H3 with IC50 of 250 nM and markedly reduces the activity of other kinases (AMPK, Lck, MKK1, MAPKAP-K1, CHK1, and PHK) at a concentration of 1 μM. In contrast, only 20-100 nM of this compound is sufficient to induce the loss of mitotic histone H3-Ser10 phosphorylation in HeLa cells. Its treatment causes defects in mitosis and cytokinesis, leading to stoppage of proliferation of HeLa cells and polyploidization, which can be specifically ascribed to the inhibition of Aurora B function during the process of chromosome attachment. This compound (100 nM) quickly overrides the mitotic arrest induced by taxol or monastrol but not by nocodazole. It and nocodazole treatment in HeLa cells abolishes kinetochore localization of BubR1 and diminishes the intensity of Bub1 at kinetochores, suggesting that Aurora B function is required for efficient kinetochore recruitment of BubR1 and Bub1, which in turn might be necessary for prolonged checkpoint signaling. It prevents the phosphorylation of recombinant trypanosome histone H3 by the T. brucei Aurora kinase-1 (TbAUK1) from pathogenic Trypanosoma brucei with IC50 of 40 nM in vitro kinase assays. This chemical significantly inhibits cell growth of cultured infectious bloodstream forms (BF) with IC50 of 48 nM, and only weakly inhibits cell growth of insect stage procyclic forms (PF) with IC50 of 550 nM.
Essai kinase
Le dosage de la kinase Aurora B
Pour le dosage de la kinase Aurora B, les cellules HeLa sont lysées dans un tampon contenant 50 mM de NaCl. L'extrait cellulaire total est centrifugé à 13 000 tr/min pendant 20 minutes à 4 °C à l'aide d'une centrifugeuse de paillasse. Le culot obtenu à partir de 200 mg d'extrait cellulaire total est à nouveau extrait dans 15 mL de tampon de lyse contenant 250 mM de NaCl afin d'obtenir la kinase Aurora B active à partir de la chromatine mitotique. Le surnageant à faible vitesse de ce dernier extrait est utilisé pour l'immunoprécipitation. L'anticorps monoclonal de souris anti-AIM-1, ou l'anticorps de souris anti-HA, est couplé à la GammaBind Plus Sepharose, et les billes sont agitées en rotation dans l'extrait pendant 90 minutes à 4 °C. Les billes sont lavées, aliquotées et lavées dans un tampon de kinase (20 mM Tris, pH 7,5, 150 mM NaCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, 10 mM NaF). Le dosage de la kinase est effectué avec 10 μL de billes dans 20 μL de tampon de kinase contenant 5 μg d'histone H3, 10 μM d'ATP, 2,5 μCi de [γ-32P]ATP et différentes concentrations de ce composé pendant 20 minutes à 37 °C. Un tampon d'échantillon SDS est ajouté, et les échantillons sont bouillis et résolus par SDS-PAGE. Le gel est séché et le signal radioactif est détecté par analyse PhosphorImager. Les données sont analysées à l'aide du logiciel ImageQuant.
Références

Applications (Applications)

Méthodes Biomarqueurs Images PMID
Western blot trypanosome histone H3
S1529-WB1
19320832