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WAY-600 mTOR Inhibiteur

Réf. Catalogue: S2689

WAY-600 est un inhibiteur puissant, ATP-compétitif et sélectif de mTOR avec une IC50 de 9 nM; ce composé bloque mTORC1/P-S6K(T389) et mTORC2/P-AKT(S473) mais pas P-AKT(T308); il est sélectif pour mTOR par rapport à PI3Kα (>100 fois) et PI3Kγ (>500 fois).
WAY-600 mTOR Inhibiteur Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 494.59

Aller à

Contrôle Qualité (Quality Control)

Lot : S268901 DMSO]22 mg/mL]false]Ethanol]2 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Pureté : 99.34%
99.34

Informations chimiques, stockage et stabilité (Chemical Information, Storage & Stability)

Poids moléculaire 494.59 Formule

C28H30N8O

 Stockage (À compter de la date de réception)
N° CAS 1062159-35-6 Télécharger le SDF Stockage des solutions mères

Synonymes N/A Smiles C1CN(CCC1N2C3=C(C=N2)C(=NC(=N3)C4=CC5=C(C=C4)NC=C5)N6CCOCC6)CC7=CN=CC=C7

Solubilité (Solubility)

In vitro
Lot:

DMSO : 22 mg/mL (44.48 mM)
(Le DMSO contaminé par l'humidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 2 mg/mL

Water : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant l'expérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter d'abord s'il n'y a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter d'abord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant d'ajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous d'ajouter le(s) solvant(s) dans l'ordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de l'ajout précédent, est une solution claire avant de procéder à l'ajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme d'action (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
mTOR
9 nM
In vitro
Immune-complex kinase assay shows mTORC2-specific substrate His6-AKT or the mTORC1 substrate His6-S6K is dose dependently inhibited by WAY-600. This compound globally inhibits mTOR signaling and AKT function in cellular models dose dependently. It profoundly inhibits cap-dependent and global protein synthesis in MDA361, human breast cancer cells. This chemical shows antiproliferative effects in various cancer cell lines involving G1 cell cycle arrest and selective apoptosis. It down-regulate angiogenic factors, VEGF and HIF-1α, in U87MG, MDA361 and LNCap cells.
Essai kinase
Format DELFIA de FLAG-TOR purifié
Les essais de routine avec le FLAG-TOR purifié (FL et 3.5) sont effectués dans des plaques à 96 puits comme suit. Les enzymes sont d'abord diluées dans un tampon d'essai kinase (10 mM Hepes (pH 7.4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glycérophosphate, 10 mM MnCl2, 0.5 mM DTT, 0.25 lM microcystine LR et 100 lg/mL BSA). Dans chaque puits, 12 μL de l'enzyme diluée sont mélangés brièvement avec 0.5 μL d'inhibiteur test ou de véhicule témoin diméthylsulfoxyde (DMSO). La réaction kinase est initiée par l'ajout de 12.5 μL de tampon d'essai kinase contenant de l'ATP et de l'His6-S6K pour obtenir un volume de réaction final de 25 μL contenant 800 ng/mL de FLAG-TOR, 100 μM d'ATP et 1.25 μM d'His6-S6K. La plaque de réaction est incubée pendant 2 heures (linéaire de 1 à 6 heures) à température ambiante avec une légère agitation, puis terminée par l'ajout de 25 μL de tampon d'arrêt (20 mM Hepes (pH 7.4), 20 mM EDTA et 20 mM EGTA). La détection DELFIA de l'His6-S6K phosphorylé (Thr-389) est réalisée à température ambiante en utilisant un anticorps monoclonal anti-P(T389)-p70S6K (1A5) marqué avec de l'Europium-N1-ITC (Eu) (10.4 Eu par anticorps). Quarante-cinq microlitres du mélange de réaction kinase terminé sont transférés dans une plaque MaxiSorp contenant 55 μL de PBS. L'His6-S6K est laissé se fixer pendant 2 heures, après quoi les puits sont aspirés et lavés une fois avec du PBS. Cent microlitres de tampon DELFIA avec 40 ng/mL d'anticorps Eu-P(T389)-S6K sont ajoutés. La liaison de l'anticorps est poursuivie pendant 1 heure avec une légère agitation. Les puits sont ensuite aspirés et lavés quatre fois avec du PBS contenant 0.05% de Tween 20 (PBST). Cent microlitres de solution DELFIA Enhancement sont ajoutés à chaque puits et les plaques sont lues dans un lecteur de plaques PerkinElmer modèle Victor. Les données obtenues sont utilisées pour calculer l'activité enzymatique et l'inhibition enzymatique par des inhibiteurs potentiels.
Références