3-Deazaneplanocin A (DZNep) Hydrochloride

3-Deazaneplanocin A (1,0 μM) entraîne une augmentation significative de l'accumulation de cellules en phase G0/G1 (58,5 %) avec une diminution concomitante du nombre de cellules en phase S (35,2 %) et en phases G2/M (6,3 %) du cycle cellulaire des cellules de leucémie myéloïde aiguë humaine OCI-AML3. 3-Deazaneplanocin A (1,0 μM) induit l'apoptose dans les cellules OCI-AML3 (~50 %) et HL-60 (~50 %), et une réduction de plus de 90 % de la croissance des colonies à 48 h. 3-Deazaneplanocin A réduit les niveaux de EZH2 et inhibe la triméthylation de la lysine 27 sur l'histone H3 dans les cellules HL-60 et OCI-AML3 et dans les cellules primaires de LAM. Le traitement par 3-Deazaneplanocin A induit p16, p21, p27 et FBXO32 tout en réduisant les niveaux de cycline E et de HOXA9. 500 nM de 3-Deazaneplanocin A induit la différenciation des cellules HL-60 en cellules CD11b⁺ par près de 3 fois à 48 h. [2] 3-Deazaneplanocin A a une excellente activité contre plusieurs types viraux. 3-Deazaneplanocin A est actif contre la stomatite vésiculaire dans les cellules L929, la parainfluenza 3 dans H.Ep-2, les virus de la vaccine et de la fièvre jaune dans les cellules vero avec des IC50 de 0,2, 3,6, 2,1 et 2,9 μg/mL, respectivement. [3] 3-Deazaneplanocin A présente un effet fortement et uniformément leishmanistatique sur les souches américaines de Leishmania (L mexicana et L brasiliensis) dans l'étude avec une ID50 moyenne de 96 ng/mL, mais ne montre aucune inhibition contre les plusieurs souches de T. cruzi et T. rangeli testées avec des concentrations allant jusqu'à 10 μg/mL. À une dose de 200 ng/mL, 3-Deazaneplanocin A inhibe l'incorporation de S-adénosyl-L-3H-méthylméthionine et de 3-thymidine par les promastigotes après quatre jours. À une dose de 100 ng/mL, 3-Deazaneplanocin A élimine environ 56 % de L mexicana et L brasiliensis des macrophages humains infectés. [4]

3-Deazaneplanocin A montre une activité antileucémique in vivo. La 3-Deazaneplanocin A à des doses de 8 mg/kg montre une activité antivirale in vivo contre le virus de la vaccine dans un test de variole de la queue de souris avec une médiane de 0,0 poxftail (84 % de protection). [3] La 3-Deazaneplanocin A à des doses allant de 0,5 à 1,5 mg/kg/jour, a significativement réduit le développement de l'infection cutanée leishmanienne produite chez des souris BALB/c consanguines par inoculation de L. b. guyanensis. [4] La 3-Deazaneplanocin A induit une production massivement accrue d'interféron-α chez les souris infectées par le virus Ebola. La 3-Deazaneplanocin A (injection s.c. de 2 mg/kg post-infection) prévient la mort chez les souris infectées par 1000 pfu (30 000 LD50) d'EBO-Z adapté à la souris. Le traitement avec la 3-Deazaneplanocin A au jour 1 réduit les titres viraux sériques moyens au jour 2 par un facteur de 100 et au jour 3 par un facteur de 100 000, par rapport aux contrôles sous placebo, et entraîne un niveau sérique moyen d'IFN-α de 1420 pg/mL au jour 2 et de 1830 pg/mL au jour 3. [5]

• Dosage de l'activité de la S-adénosylhomocystéine hydrolase

  Le mélange réactionnel utilisé pour le dosage de l'AdoHcyase contient, dans un volume final de 0,5 mL, 50 mM de phosphate de potassium (pH 7,6), 5 mM de dithiothréitol, 1 mM d'EDTA, 10 % de glycérol et l'enzyme. Le L-[8- ^14C]AdoHcy est utilisé comme substrat et 5 unités d'adénosine désaminase intestinale de veau sont incluses. La réaction est arrêtée par l'ajout de 100 μL d'acide formique 5 M, et le mélange réactionnel est ensuite versé sur une colonne (0,8×2,5 cm) de SP-Sephadex C-25, préalablement équilibrée dans de l'acide formique 0,1 M. Chaque tube à essai est rincé avec 0,5 mL d'acide formique 0,1 M. La [¹⁴C]Inosine formée est éluée de la colonne par 3,5 mL d'acide formique 0,1 M dans un flacon à scintillation. La radioactivité est déterminée après l'ajout de 10 mL de liquide de scintillation. La quantité d'enzyme utilisée est d'environ 105 pU, soit 75 ng de l'enzyme purifiée. Une unité est la quantité d'enzyme nécessaire pour former 1 pmol de produit en 1 min à 37 ℃.

• Lignées cellulaires

  Human acute myeloid leukemia HL-60

• Concentrations

  ~1 μM

• Temps dincubation

  2 days

• Méthode

  Cells are treated with the indicated concentrations of 3-Deazaneplanocin A for 48 hours. After the designated treatments, cells are harvested and washed twice with PBS, and approximately 500 cells are plated in complete Methocult and cultured for 7 to 10 days at 37 ℃ in a 5% CO₂ environment. Cells are dyed with crystal violet, and relative colony density is determined by solubilizing the crystal violet dye in 10% acetic acid followed by measurement of absorbance at 450 nm.

• Modèles animaux

  Human acute myeloid leukemia xenografts HL-60

• Posologies

  1 mg/kg

• Administration

  initiated on day 7 and administered twice per week (Tuesday-Thursday) intraperitoneally for 2 weeks