AEE788 (NVP-AEE788)

N° de catalogueS1486 Lot :S148601

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Données techniques

Formule

C27H32N6
Poids moléculaire 440.58 Numéro CAS 497839-62-0
Solubilité (25°C)* In vitro DMSO 88 mg/mL (199.73 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Ajouter les solvants au produit individuellement et dans lordre.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description AEE788 (NVP-AEE788) est un puissant inhibiteur d'EGFR et d'HER2/ErbB2 avec des IC50 de 2 nM et 6 nM, respectivement. Il est moins puissant contre VEGFR2/KDR, c-Abl, c-Src et Flt-1, et n'inhibe pas Ins-R, IGF-1R, PKCα ou CDK1. Ce composé a atteint les essais cliniques de phase 1/2.
Cibles
EGFR
(Cell-free assay)		 HER2/ErbB2
(Cell-free assay)		 c-Abl
(Cell-free assay)		 FLT1
(Cell-free assay)		 c-Fms
(Cell-free assay)		 Voir plus
2 nM 6 nM 52 nM 59 nM 60 nM
In vitro AEE788 (NVP-AEE788) inhibe également KDR, c-abl, c-Src et Flt-1 avec des IC50 de 50-80 nM. Il n'est pas sensible à ErbB-4, PDGFR-β, Flt-3, Flt-4, RET et c-Kit et n'a pas d'effet inhibiteur sur Ins-R, IGF-1R, PKC-α et PKA. Ce composé inhibe puissamment la phosphorylation d'EGFR dans les cellules A431 avec une IC50 de 11 nM. Il inhibe également la phosphorylation de KDR dans les cellules CHO et d'erbB2 dans les cellules BT-474, sans aucun effet sur la phosphorylation induite par le PDGF dans les cellules A31. Il inhibe la prolifération des cellules NCI-H596, MK, BT-474 et SK-BR-3 avec des IC50 de 78, 56, 49 et 381 nM, respectivement. Par ailleurs, il possède la propriété supplémentaire d'inhiber la prolifération cellulaire induite par le mutant d'EGFR, y compris 32D/EGFR et 32D/EGFRvIII. Il inhibe en outre la prolifération des HUVEC induite par l'EGF et le VEGF avec des IC50 de 43 et 155 nM, respectivement. Il inhibe la phosphorylation d'EGFR, VEGFR2, Akt et MAPK dans les lignées cellulaires humaines de carcinome épidermoïde cutané (cellules Colo16, HaCaT, SRB1 et SRB12), ce qui entraîne une inhibition de la croissance et une induction de l'apoptose. Il inhibe la phosphorylation d'EGFR et d'Akt dans les cellules HT29 à des concentrations de 0,2 à 1,0 μM. Il inhibe la prolifération cellulaire et prévient l'activation de HER1, HER2 et HER3 induite par l'EGF et la neuréguline dans les lignées cellulaires de médulloblastome. Il présente des activités suppressives de croissance dans les cellules de médulloblastome chimiosensibles et chimiorésistantes.
In vivo AEE788 (NVP-AEE788) produit une inhibition dose-dépendante de la croissance tumorale dans les modèles de xénogreffe NCI-H596 ou DU145, avec seulement des changements mineurs du poids corporel. Il induit une régression tumorale de 57% à 50 mg/kg dans le modèle NeuT/erbB2 GeMag et inhibe puissamment la phosphorylation de l'EGFR induite par l'EGF dans les tumeurs A431 et la phosphorylation d'erbB2 dans les tumeurs GeMag. Ce composé inhibe de manière dose-dépendante l'angiogenèse induite par le VEGF et n'inhibe pas l'angiogenèse induite par le bFGF. Il supprime la croissance du volume tumoral de 54% dans les xénogreffes Colo16 à 50 mg/kg, ce qui est dû à l'inhibition de la phosphorylation d'EGFR, VEGFR, Akt et MAPK. À 50 mg/kg, il inhibe également la croissance des tumeurs dans le cæcum et le péritoine (>50%) et réduit l'incidence des métastases ganglionnaires à 70% dans les cellules HT29 implantées dans le cæcum de souris nues, sans perte de poids corporel et sans preuve macroscopique de néovascularisation. Il abaisse significativement les niveaux d'expression de pEGFR et pVEGFR dans les tumeurs cæcales HT29 et ne modifie pas ceux d'EGF, VEGF, EGFR ou VEGFR. Combiné avec le CPT-11, il entraîne des tumeurs significativement plus petites et une inhibition complète des métastases ganglionnaires. Ce composé inhibe la croissance des xénogreffes Daoy, DaoyPt et DaoyHER2 de 51%, 45% et 72%, respectivement. Il pourrait promouvoir la génération d'espèces réactives de l'oxygène médiée par LBH589 dans les cellules tumorales K562, ce qui à son tour augmente l'apoptose.

Protocole (de référence)

Test kinase :[1]
  • Tests de Protein Kinase

    Les tests in vitro de Protein Tyrosine Kinase pour AEE788 (NVP-AEE788) sont réalisés dans des plaques à 96 puits (30 μL) à température ambiante pendant 15 à 45 min en utilisant les domaines kinase recombinants fusionnés à la glutathion S-transférase (4-100 ng, selon l'activité spécifique). Le [γ33P]ATP est utilisé comme donneur de phosphate et le peptide polyGluTyr-(4:1) comme accepteur. À l'exception de la Protein Kinase C-α, la cycline-dépendante kinase 1/cycB et la Protein Kinase A, le sulfate de protamine (200 μg/mL), l'histone H1 (100 μg/mL) et l'heptapeptide Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly (connu sous le nom de Kemptide Bachem) sont respectivement utilisés comme substrats peptidiques. Les tests sont optimisés pour chaque kinase en utilisant les concentrations d'ATP suivantes : 1,0 μM (c-Kit, c-Met, c-Fms, c-Raf-1 et RET), 2,0 μM (EGFR, erbB2, ErbB3 et ErbB4), 5,0 μM (c-abl), 8,0 μM (Flt-1, Flt-3, Flt-4, Flk, KDR, FGFR-1 et Tek), 10,0 μM (PDGFR-β, Protein Kinase C-α et cycline-dépendante kinase 1) et 20,0 μM (c-Src et Protein Kinase A). La réaction est terminée par l'ajout de 20 μL d'EDTA 125 mM. Trente μL (c-abl, c-Src, récepteur du facteur de croissance 1 de l'insuline, RET-Men2A et RET-Men2B) ou 40 μL (toutes les autres kinases) du mélange réactionnel sont transférés sur une membrane Immobilon-polyvinylidène difluorure, pré-trempée avec 0,5% H3PO4 et montée sur un collecteur de vide. Le vide est ensuite appliqué et chaque puits rincé avec 200 μL de H3PO4 à 0,5%. Les membranes sont retirées et lavées quatre fois avec 1,0% H3PO4 et une fois avec de l'éthanol. Les membranes séchées sont comptées après montage dans un cadre Packard TopCount à 96 puits et avec l'ajout de 10 μL/puits de Microscint. Les valeurs d'IC50 (±SE) sont calculées par analyse de régression linéaire du pourcentage d'inhibition et sont des moyennes d'au moins trois déterminations.
Test cellulaire :[1]
  • Lignées cellulaires

    T24, BT-474, SK-BR-3, and NCI-H596 cells

  • Concentrations

    ~10 μM

  • Temps dincubation

    4 or 6 days

  • Méthode

    Methylene Blue Cell Proliferation Assay. Cells are seeded at 1.5 × 103 cells/well into 96-well microtiter plates and incubated overnight at 37 °C, 5% v/v CO2 and 80% relative humidity. On day 1, dilutions of AEE788 (NVP-AEE788) are added, with the highest concentration being 10 μM. After incubation of the cell plates for an additional 4 (T24) or 6 (BT-474, SK-BR-3, and NCI-H596) days, cells are fixed with 3.3% v/v glutaraldehyde, washed with water, and stained with 0.05% w/v methylene blue. After washing, the dye is eluted with 3% HCl and the absorbance measured at 665 nm with a SpectraMax 340 spectrophotometer. IC50 values are determined by mathematical curve-fitting and are defined as the drug concentration leading to 50% inhibition of net cell mass increase compared with untreated control cultures.
Étude animale :[1]
  • Modèles animaux

    NCI-H596, DU145, A431, B16 and oncogenic NeuT-transfected HC11 cells in female BALB/c nu/nu (nude) mice

  • Posologies

    50 mg/kg

  • Administration

    Dosed orally

Références

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15256466/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15756022/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15867367/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20885895/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17317822/

Validation du produit par le client

<p>EGFR-SGLT1 interaction is irresponsive to modulators of EGFR’s tyrosine kinase. A: Immunoprecipitation coupled Western blot analysis ofinteractionsbetween EGFR-HA and SGLT1-FlaginHEK293 cells treatedwith EGF or AEE788. EGFR, total EGFR; pEGFR, phosphorylated EGFR; IP, immunoprecipitation; IB, immunoblot. Input, expression levels of indicated exogenous proteinsin HEK293 whole celllysates used for the IP.</p>

, , The Prostate, 2013, 73:1453-1461.

Representative images of mitochondria of PC3 cells treated with DMSO, EGF (20 ng/ml) AEE788 (a small molecular EGFR inhibitor at 6 μM) or AEE788+EGF for 24 h. Mitochondria were stained with Mitotracker Red and images were taken with a confocal microscope.

Données de [ , , Cell Cycle, 2014, 13(15):2415-30 ]

Sellecks AEE788 (NVP-AEE788) A été cité par 13 Publications

A community challenge for a pancancer drug mechanism of action inference from perturbational profile data [ Cell Rep Med, 2022, 3(1):100492] PubMed: 35106508
Comprehensive pharmacogenomic characterization of gastric cancer. [ Genome Med, 2020, 18;12(1):17] PubMed: 32070411
Targeting the non-canonical roles of PCNA modifies and increases the response to targeted anti-cancer therapy [ Oncotarget, 2019, 10(68):7185-7197] PubMed: 31921382
Rationale for Using Irreversible Epidermal Growth Factor Receptor Inhibitors in Combination with Phosphatidylinositol 3-Kinase Inhibitors for Advanced Head and Neck Squamous Cell Carcinoma. [ Mol Pharmacol, 2019, 95(5):528-536] PubMed: 30858165
Targeted reduction of the EGFR protein, but not inhibition of its kinase activity, induces mitophagy and death of cancer cells through activation of mTORC2 and Akt. [ Oncogenesis, 2018, 7(1):5] PubMed: 29358623
Synergistic induction of apoptosis by salinomycin and gefitinib through lysosomal and mitochondrial dependent pathway overcomes gefitinib resistance in colorectal cancer. [ Oncotarget, 2017, 8(14):22414-22432] PubMed: 26461472
A high-content EMT screen identifies multiple receptor tyrosine kinase inhibitors with activity on TGFβ receptor [ Oncotarget, 2016, 7(18-:25983-6002] PubMed: 27036020
[ Oncotarget, 2015, ] PubMed: 25965827
[ Oncotarget, 2015, ] PubMed: 26378037
Phosphorylation of Mutationally Introduced Tyrosine in the Activation Loop of HER3 Confers Gain-of-Function Activity [Hu Z, et al. PLoS One, 2015, 10(4):e0123623] PubMed: 25853726

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