FTY720 (Fingolimod) Hydrochloride

L'effet inhibiteur du S1P est inversé par diverses concentrations de FTY720, avec un effet IC50 de 173 nM. De plus, le FTY720 (10 nM) seul n'exerce aucun effet sur l'expression des molécules co-stimulatrices. Le FTY720 inverse l'augmentation de l'expression de HLA-I induite par le S1P, tant pour les pourcentages de cellules que pour le MFI, en comparant l'effet du S1P à l'effet de la combinaison du S1P avec le FTY720. [1] Le FTY720-P à doses moyennes et élevées augmente également les niveaux de TGF-β1. L'expression de l'ARNm de TGF-β1 et de Foxp3 est régulée à la hausse dans le groupe FTY720-P à dose élevée. La prolifération des lymphocytes T effecteurs est significativement supprimée dans le groupe FTY720-P à doses moyennes et élevées à un rapport cellules Treg/Teff de 1:1. À un rapport de 1:1, la prolifération des lymphocytes T effecteurs est également supprimée dans le groupe FTY720 à dose élevée. [2]

Le FTY720 est efficace dans les xénogreffes de LLA Ph⁺ mais pas Ph^- utilisant un modèle de maladie précoce. Le FTY720 produit une réduction significative du fardeau de la maladie dans les xénogreffes de LLA Ph⁺ utilisant un modèle de maladie précoce. Les xénogreffes humaines de LLA Ph⁺ répondent au FTY720 avec une réduction de 80 % de la maladie globale si le traitement a été initié tôt. En revanche, le traitement des souris avec le FTY720 n'entraîne pas de réduction de la leucémie par rapport aux contrôles utilisant quatre xénogreffes humaines distinctes de LLA Ph^-. [3]

• Lignées cellulaires

  Immature DCs

• Concentrations

  10 nM

• Temps dincubation

  4 hours

• Méthode

  Immature DCs are left intact or are incubated with 2 μM S1P, 10 nM FTY720, 10 nM SEW2871 or the combinations of S1P with these drugs for 4 hours. As a control 1 μg/mL LPS is used. The cells are washed and incubated in a 96-well plate (v-bottom, 2 × 10⁵ cells per well), washed again and resuspended in PBS buffer containing 0.1% sodium azide. They are labeled with 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD80, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD83, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human CD86, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-class I, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-DR, 1 μg/mL FITC-conjugated mouse anti-human HLA-E, or 1 μg/mL FITC-conjugated mouse IgG as a control. The cells are washed twice, and examined in the flow cytometer. Markers are set according to the isotype control FITC-conjugated mouse IgG. To stain NK cells with antibodies for various NK cell activating receptors, they are either left untreated or incubated with 2 μM S1P for 4 hours, washed and stained with 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKp30 (CD337), 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKp44 (CD336), 1 μg/mL PE-conjugated mouse anti-human NKG2D (CD314), or as a control 1 μg/mL PE-conjugated mouse IgG1, for 45 min at 4 °C. NK cells are also stained with 1 μg/mL FITC-conjugated anti-killer inhibitory receptor (KIR)/CD158 antibody which recognizes KIR2DL2, KIR2DL3, KIR2DS2 and KIR2DS4, and as a control with FITC-conjugated mouse IgG. The cells are washed twice, and examined in the flow cytometer. Markers are set according to the isotype control PE-conjugated or FITC-conjugated mouse IgG.

• Modèles animaux

  NOD/SCIDγc^−/− mice bearing ALL cells.

• Posologies

  5 mg/kg/day, 10 mg/kg/day

• Administration

  Administered via i.p.