Quisinostat (JNJ-26481585) Dihydrochloride

JNJ-26481585 présente une activité antiproliférative à large spectre dans les lignées cellulaires de cancers solides et hématologiques, telles que toutes les lignées cellulaires de tumeurs pulmonaires, mammaires, coliques, prostatiques, cérébrales et ovariennes, avec une IC50 allant de 3,1 à 246 nM, ce qui est plus puissant que le R306465, le CRA-24781 ou le mocetinostat dans diverses lignées cellulaires de cancers humains testées. [1] Une étude récente montre que le JNJ-26481585 favorise la mort des cellules myélomateuses à de faibles concentrations nanomolaires en entraînant une déplétion de Mcl-1 et une induction de Hsp72. [2]

Dans un modèle de criblage de tumeur ovarienne A2780 sensible à l'HDAC1, l'administration de JNJ-26481585 à sa dose maximale tolérée (10 mg/kg i.p. et 40 mg/kg p.o.) pendant 3 jours conduit à une fluorescence régulée par l'HDAC1, ce qui prédit l'inhibition de la croissance tumorale. De plus, le JNJ-26481585 montre également des effets inhibiteurs plus puissants sur la croissance des métastases hépatiques colorectales C170HM2. [1]

• Tests d'activité HDAC

  Dans tous les cas, les protéines HDAC pleine longueur sont exprimées en utilisant des cellules Sf9 infectées par le baculovirus. De plus, HDAC3 est coexprimée en tant que complexe avec la NCOR2 humaine. Pour évaluer l'activité des complexes cellulaires contenant HDAC1, les complexes HDAC1 immunoprécipités sont incubés avec un fragment de peptide d'histone H4 marqué au [³H]acétyle [biotine-(6-aminohexanoïque)Gly-Ala-(acétyl[3H])Lys-Arg-His-Arg-Lys-Val-NH2] dans un volume total de 50 μL de tampon d'essai enzymatique (25 mM HEPES (pH 7,4), 1 M saccharose, 0,1 mg/mL BSA et 0,01 % (v/v) Triton X-100). L'incubation est effectuée pendant 45 minutes à 37 °C (immunoprécipités) ou 30 minutes à température ambiante. Avant l'ajout du substrat, les inhibiteurs d'HDAC sont ajoutés à des concentrations croissantes et préincubés pendant 10 minutes à température ambiante. Après incubation, la réaction est arrêtée avec 35 μL de tampon d'arrêt (1 M HCl et 0,4 M d'acide acétique). L'acide [³H]acétique libéré est extrait avec 800 μL d'acétate d'éthyle et quantifié par comptage par scintillation. Des quantités égales d'HDAC1 sont immunoprécipitées comme indiqué par l'analyse Western blot. Les résultats d'activité de l'HDAC1 sont présentés comme la moyenne ± ET de trois expériences indépendantes sur un seul lysat.

• Lignées cellulaires

  NCL-H2106, Colo699 and LNCAP cells

• Concentrations

  0-300 nM

• Temps dincubation

  24 hours

• Méthode

  All cell lines are obtained from American Type Culture Collection and cultured according to instructions. The effect of HDAC inhibitors on cell proliferation is measured using an MTT. Proliferation of non–small cell lung carcinoma (NSCLC) cell lines is assessed using an Alamar Blue–based assay. For proliferation of hematologic cell lines, cells are incubated for 72 hours and the cytotoxic activity is evaluated by MTS assay. Data are presented as mean IC50 or IC40 ± SD of at least three independent experiments.

• Modèles animaux

  HCT116 human colon carcinoma cells are injected s.c. into the inguinal region of athymic male NMRI nu/nu mice, C170HM2 cell suspensions are injected into the peritoneal cavity of male MFI nude mice.

• Posologies

  ≤10 mg/kg

• Administration

  Administered via both p.o. and i.p.