Posaconazole

Posaconazole a une puissante activité trypanocide. L'amiodarone agit en synergie avec ce composé. Il affecte également et perturbe l'homéostasie du Ca²⁺ chez T. cruzi. Ce produit chimique bloque la biosynthèse de l'ergostérol, qui est essentiel à la survie du parasite. Il a un effet clair, dose-dépendant sur la prolifération des stades épimastigotes (extracellulaires), avec une concentration minimale inhibitrice de 20 nM et une IC50 de 14 nM. Contre la forme amastigote intracellulaire cliniquement pertinente du parasite, ce composé est encore plus puissant. Il a des valeurs de concentration minimale inhibitrice et d'IC50 de 3 nM et 0,25 nM. [1] Il est actif contre les isolats de Candida et Aspergillus spp. qui présentent une résistance au Fluconazole, au Voriconazole et à l'Amphotéricine B et est beaucoup plus actif que les autres triazoles contre les zygomycètes. [2]

Le traitement des animaux infectés avec de l'amiodarone seule réduit la parasitémie, augmente la survie 60 jours post-infection (0% pour les contrôles non traités contre 40% pour les animaux traités à l'amiodarone) et, lorsqu'elle est administrée en association avec Posaconazole, retarde le développement de la parasitémie. [1] La coadministration de ce composé et de Boost Plus augmente l'exposition au médicament par rapport à l'administration de ce composé seul à jeun. La nourriture, en particulier les repas riches en matières grasses, augmente significativement la biodisponibilité de ce composé. L'exposition systémique à ce composé augmente de 4 et 2,6 fois lorsqu'il est consommé avec un repas riche en matières grasses et un repas sans matières grasses, respectivement. [3] Ce composé et l'amiodarone peuvent constituer une thérapie anti-T. cruzi efficace avec peu d'effets secondaires. [4] À des doses deux fois par jour de ≥15 mg/kg de poids corporel, ce composé prolonge la survie des souris et réduit la charge tissulaire. [5]

• Lignées cellulaires

  Epimastigote form of T. cruzi amastigotes

• Concentrations

  0 nM -4 nM

• Temps dincubation

  96 hours

• Méthode

  The epimastigote form of the parasite is cultivated in liver infusion tryptose medium, supplemented with 10% new born calf serum at 28 °C with strong (120 rpm) agitation. Cultures are initiated at a cell density of 2 × 10⁶ epimastigotes/mL, and Posaconazole is added at a cell density of 0.5−1.0 × 10⁷ epimastigotes/mL. Cell densities are measured by using an electronic particle counter as well as by direct counting with a hemocytometer. Cell viability is followed by Trypan blue exclusion, using light microscopy. Amastigotes are cultured in Vero cells maintained in minimal essential medium supplemented with 1% fetal calf serum in a humidified atmosphere (95% air−5% CO₂) at 37 °C. Cells are infected with 10 tissue culture-derived trypomastigotes per cell for 2 hours and then washed three times with phosphate-buffered saline (PBS) to remove nonadherent parasites. Fresh medium with and without this compound is added, and the cells are incubated for 96 hours with a medium change at 48 hours. The percent of infected cells and the numbers of parasites per cell are determined directly using light microscopy, and a statistical analysis of the results is carried out. IC50 values are calculated by nonlinear regression, using the program GraFit. Fractional inhibitory concentrations (FIC) are calculated. Cytoplasmic free Ca²⁺ concentrations in control and drug-treated extracellular epimastigotes are determined by fluorimetric methods using Fura-2. Subcellular Ca²⁺ levels and mitochondrial membrane potentials are monitored on individual Vero cells infected with T. cruzi amastigotes by using time-scan confocal microscopy. Briefly, Vero cells heavily infected (72 hours) with T. cruzi amastigotes are plated onto 22 × 40 mm glass coverslips (0.15 mm thickness) and incubated simultaneously with 10 μM cell-permeant Rhod-2 and 10 μg/mL Rhodamine-123 for 50 minutes at 37 °C in culture medium and then washed and incubated with Ringer's solution, with or without amiodarone. Under the conditions used fluorescence of Rhod-2 comes mainly from intracellular Ca²⁺-rich compartments, like mitochondria, since its low affinity for Ca²⁺ limits its fluorescence in the Ca²⁺-poor cytoplasm of the Vero cells or amastigotes. Rhodamine-123 is a mitochondrion-specific cationic dye, which distributes across the inner mitochondrial membranes strictly according to their membrane potential.

• Modèles animaux

  Female NMRI−IVIC mice with acute Chagas

• Posologies

  20 mg/kg/d

• Administration

  Oral