R406

Le R406 est un puissant inhibiteur de l'activation des signaux du récepteur Fc médiée par l'immunoglobuline E (IgE) et l'IgG. Ce composé inhibe la production et la libération induites par l'anti-IgE de LTC4 et de cytokines et chimiokines, y compris le TNFα, l'IL-8 et le GM-CSF. Il inhibe la phosphorylation du lieur de substrat de Syk pour l'activation des lymphocytes T dans les mastocytes et la protéine de liaison des lymphocytes B/SLP65 dans les lymphocytes B. Cette substance chimique se lie à la poche de liaison de l'ATP de Syk et inhibe son activité kinase en tant qu'inhibiteur compétitif de l'ATP avec un K_i de 30 nM. Il bloque l'activation des monocytes/macrophages et des neutrophiles médiée par FcR dépendante de Syk et l'activation des lymphocytes B médiée par Bcr. [1]

Ce composé induit significativement l'apoptose des cellules de leucémie lymphoïde chronique (LLC) dans des cocultures de cellules nourricières et bloque la sécrétion de CCL3 et CCL4 par les cellules LLC en réponse au déclenchement du récepteur d'antigène des lymphocytes B (Bcr). [2]

C'est un puissant inhibiteur de la signalisation et des fonctions plaquettaires initiées par la réticulation de FcγRIIA par des anticorps spécifiques ou par des sérums de patients atteints de HIT. [3]

Le R406 réduit la réaction d'Arthus passive inverse cutanée d'environ 86 % à 5 mg/kg chez les souris traitées de manière prophylactique. Ce composé montre également une efficacité dans l'inhibition de l'inflammation de la patte dans des modèles murins d'arthrite induite par des anticorps. [1]

Il n'affecte pas négativement la fonction des macrophages ou des neutrophiles dans les réponses immunitaires innées et a une immunotoxicité fonctionnelle minimale malgré son effet lymphocytopénique. [4]

• Essai de kinase par polarisation de fluorescence In Vitro

  Le R406 est dilué en série dans du DMSO, puis dilué à 1 % de DMSO dans un tampon kinase (20 mM HEPES, pH 7,4, 5 mM MgCl₂, 2 mM MnCl₂, 1 mM DTT, 0,1 mg/mL BGG acétylé). L'ATP et le substrat dans le tampon kinase sont ajoutés à température ambiante, ce qui donne une concentration finale de DMSO de 0,2 %. Les réactions kinases sont effectuées dans un volume final de 20 µL contenant 5 mM de substrat peptidique HS1, 4 mM d'ATP et initiées par l'ajout de 0,125 ng de Syk dans le tampon kinase. La réaction est laissée à se dérouler pendant 40 minutes à température ambiante. La réaction est arrêtée par l'ajout de 20 µL d'un mélange de trempe PTK contenant de l'EDTA/anticorps anti-phosphotyrosine (1X final)/traceur phosphopeptidique fluorescent (0,5X final) dilué dans le tampon de dilution FP. La plaque est incubée pendant 30 minutes dans l'obscurité à température ambiante, puis lue sur un lecteur de plaque à polarisation de fluorescence Polarion. Les données sont converties en quantité de phosphopeptide présent à l'aide d'une courbe d'étalonnage générée par compétition avec le phosphopeptide compétiteur fourni dans le kit d'essai Tyrosine Kinase. Pour la détermination de l'IC50, ce composé est testé à onze concentrations et l'ajustement de la courbe est effectué par analyse de régression non linéaire.

• Modèles animaux

  Arthritis is induced in C57BL/6 mice by intraperitoneal injection of 150 μL of pooled sera from adult K/BxN mice.

• Posologies

  1 or 5 mg/kg

• Administration

  Administered orally