VX-809 (Lumacaftor)

N° de catalogueS1565 Lot :S156507

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Données techniques

Formule

C24H18F2N2O5
Poids moléculaire 452.41 Numéro CAS 936727-05-8
Solubilité (25°C)* In vitro DMSO 90 mg/mL (198.93 mM)
Ethanol 4 mg/mL (8.84 mM)
Water Insoluble
In vivo (Ajouter les solvants au produit individuellement et dans lordre.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description Le Lumacaftor (VX-809, VRT 826809) agit pour corriger les mutations du CFTR courantes dans la mucoviscidose en augmentant la maturation du CFTR mutant (F508del-CFTR), EC50 de 0,1 μM dans les cellules thyroïdiennes de rat Fisher. Phase 3.
Cibles
F508del-CFTR
(Fisher rat thyroid cells)
0.1 μM(EC50)
In vitro

Le Lumacaftor (VX-809) agit au niveau du RE pour permettre à une fraction du F508del-CFTR d'adopter une forme correctement repliée, de sortir du RE et de se mobiliser vers la surface cellulaire pour un fonctionnement normal. Dans les cellules thyroïdiennes de rat Fischer (FRT) exprimant le F508del-CFTR, le traitement par ce composé améliore significativement la maturation du F508del-CFTR de 7,1 fois avec une EC50 de 0,1 μM, et améliore le transport du chlorure médié par le F508del-CFTR d'environ 5 fois avec une EC50 de 0,5 μM, tandis que le VRT-768 a des valeurs d'EC50 plus élevées de 7,9 μM et 16 μM, respectivement. Dans les cellules HEK-293 exprimant le F508del-CFTR, il (3 μM) augmente la sortie du F508del-CFTR du RE de 6 fois, atteignant des niveaux comparables à 34 % du CFTR. Dans les cellules épithéliales bronchiques humaines primaires (HBE) avec la mutation F508del-CFTR, l'agent augmente la maturation du CFTR et améliore la sécrétion de chlorure avec des EC50 de 350 nM et 81 nM, respectivement, plus efficace que le Corr-4a et le VRT-325. Le F508del-CFTR corrigé par lui présente une probabilité d'ouverture de canal unique de 0,39 similaire à celle du CFTR normal de 0,40. Contrairement au VX-770, ce n'est pas un potentialisateur du CFTR, car une addition aiguë n'a aucun effet sur la fonction du F508del-CFTR. Contrairement au VRT-325 et au Corr-4a, il n'améliore pas le traitement des formes normales ou mutantes de hERG ou de P-gp, ainsi que d'autres protéines mal localisées causant des maladies, y compris le mutant α1-antitrypsine Z (E342K-α1-AT) ou la N370S-β-glucosidase, suggérant qu'il est spécifique au CFTR. Il, en combinaison avec le VRT-325 ou le Corr-4a, a un effet additif sur le transport du chlorure médié par le CFTR dans les F508del-HBE cultivées.

In vivo

Lumacaftor (VX-809; VRT 826809) est un modulateur du CFTR qui corrige le repliement et le trafic de la protéine CFTR.
Caractéristiques Spécificité et efficacité plus élevées par rapport à d'autres médicaments contre les défauts du CFTR.

Protocole (de référence)

Test kinase :

[1]
  • maturation du F508del-CFTR

    Les cellules FRT exprimant de manière stable le F508del-CFTR sont traitées avec des concentrations croissantes de Lumacaftor (VX-809) pendant 48 heures. Après incubation, les cellules sont récoltées dans une solution D-PBS glacée (sans calcium ni magnésium) et centrifugées à 1 000 × g à 4 °C. Les culots cellulaires sont lysés dans 1 % de Nonidet P-40, 0,5 % de désoxycholate de sodium, 200 mM de NaCl, 10 mM de Tris, pH 7,8, et 1 mM d'EDTA plus un mélange d'inhibiteurs de protéase (1:250) pendant 30 minutes sur glace. Les lysats sont centrifugés pendant 10 minutes à 10 000 × g à 4 °C pour culotter les noyaux et les matériaux insolubles. Environ 12 μg de protéines totales sont chauffées dans un tampon de Laemmli avec 5 % de β-mercaptoéthanol à 37 °C pendant 5 minutes et chargées sur un gel Tris-acétate de 3 % à 8 %. Le gel est transféré sur nitrocellulose et traité pour Western blotting en utilisant un anticorps monoclonal CFTR ou polyclonal anti-GAPDH. Les blots sont développés par chimiluminescence améliorée. La quantification des quantités relatives des bandes C et GAPDH est effectuée en utilisant l'analyse NIH ImageJ des films scannés.
Test cellulaire :

[1]
  • Lignées cellulaires

    FRT (CFTR or F508del-CFTR), HEK-293 (CFTT or F508del-CFTR) , and HBE cells

  • Concentrations

    Dissolved in DMSO, final concentrations ~0.1 mM

  • Temps dincubation

    24 or 48 hours

  • Méthode

    Cells are exposed to various concentrations of Lumacaftor (VX-809) for 24 or 48 hours. Ussing chamber techniques are used to record the transepithelial current (IT) resulting from CFTR-mediated chloride transport. The single-channel activity of CFTR is measured by using excised inside-out membrane patch recordings. Immunoblot techniques using the monoclonal CFTR antibody are used to measure CFTR maturation in FRT, HEK-293, or HBE cells expressing CFTR or F508del-CFTR.
Étude animale :

[1]
  • Modèles animaux

    Male Sprague– Dawley rats

  • Posologies

    1 mg/kg

  • Administration

    p.o.

Références

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21976485/

Validation du produit par le client

<p>△F508CFTR diffusion is increased by different correction mechanisms. A, example trajectories from MDCK cell lines for wtCFTR (black) and △F508CFTR rescued by VX-809 treatment in the absence (red) and presence (blue ) of mCh-CFTR-C. B, summary graph for wtCFTR, r△F508CFTR and CFTR△PDZ diffusion in VX-809-treated and control MDCK cell lines. C, example trajectories for MDCK cells transiently expressing 3FLAG-tagged wtCFTR(black), △F508CFTR rescued by VX-809 (red), CFTR△PDZ ( blue ), and △F508CFTR△PDZ rescued by VX-809 (green). D, summary graph for CFTR dif- fusion in VX-809-treated MDCK transiently transfected with 3FLAG-tagged CFTR constructs. E, example trajectories from MDCK cell lines stably expressing wtCFTR ( left ) and △F508CFTR ( right ) treated with thapsigargin ( black)or CoPo-22 (red) or transiently expressing GFP-GRASP55 (blue ). F, graphs for △F508CFTR ( top ) and wtCFTR (bottom) diffusion in MDCK cell lines treated with thapsigargin or CoPo-22 or transiently expressing GFP-GRASP55. For reference, median and interquartile values for wtCFTR diffusive range are shown by dashed lines(bar 1, top ). G, GFP-GRASP55 is Golgi-localized by immunocytochemical analysis (scale bar, 10 μm). Scale bar in A (500 nm) refers to all trajectories. In panels Band D, statistically significant differences in populations are shown (*, p<0.001). SPT data for MDCK cell lines was derived from 140 –788 trajectories and for transiently transfected MDCK cells from 131–298 trajectories.</p>

Données de [ J Biol Chem , 2012 , 287, 43630-8 ]

<p> </p><p>VX809 inceases the expression of DF508 CFTR in oocytes.  Oocytes injected with DF508 CFTR and b-adrenergic receptor RNAs were incubated at 17oC for 3 days with and without 5 μM VX809.  The conductance at the reversal potential (gCl at Vm = Erev) was assayed using two-electrode-voltage clamp. Oocytes were placed in experimental chambers and perfused with standard Frog Ringer's at room temperature where the conductance was monitored as a function of time. The conductance was near zero before stimulation using a cocktail containing 10 μM isoproterenol and 1 μM 3-isobutyl-1-methylxanthine (hatched bar).  At steady state, conductance of oocytes treated with 5 μM VX809 ("x" symbols in panel A and white bar in panel B) was significantly larger than that of untreated oocytes ("+" symbols in panel A and black bar in panel B).  Towards the end of the experiments, oocytes were exposed to 10 μM CFTR-172 to verify that the conductance was due to CFTR chloride channels. </p>

, , Xuehong Liu of Oregon Health & Science University

<p> </p><p>Figure 7. Using chamber experiments demonstrating that TGF- β1 inhibits functional rescue of △ F508-CFTR in CF-HBE cells. Representative recordings ( A&B) demonstrating that VX-809 and CF-106951 partially rescued the CFTRinh -172 sensitive I sc compared to vehicle control (Vehicle). VX-809 (10 μM), CF-106951 (10 μM) or vehicle control (DMSO) was added to the basolateral medium for 24 h. The final concentration of DMSO was ,0.1%. Experiments were repeated at least 3 times in CF-HBE cells from 3 different donors. In subsequent experiments, corrector VX-809 ( C&D) or CF-106951 ( E&F ) was used for 24 h to rescue the CFTRinh-172 sensitive Isc. Subsequently, TGF- β1 (15 ng/ml) or vehicle control (CTRL) was added with fresh VX-809 or CF-106951 to the basolateral medium for 24 h. Monolayers were bathed in Ringer’s solution in the presence of amiloride (10 μM). TGF-β1 decreased the CFTRinh-172 sensitive Isc rescued by either VX-809 or CF-106951.</p>

,

RAF1 and CAMKK1 single siRNA validation in flow cytometry. RAF1 and CAMKK1 single Dharmacon ON-TARGETplus siRNAs with or without VX-809 treatment. Measured surface CFTR fluorescence with a BD Accuri flow cytometer with Intellicyt HTFC. The grayed out region represents VX-809s average surface fluorescence. VX-809 + siRNA significance is shown from VX-809 negative control. Data are shown as mean ± SEM (3−4 replicates). One-way ANOVA with multiple comparison for significant changes from VX-809 neg. ctrl (0 nM) (red P-values). ***P ≤ 0.001; **P ≤ 0.01; *P ≤ 0.05.

Données de [ , , Mol Pharm, 2018, 15(3):759-767 ]

Sellecks VX-809 (Lumacaftor) A été cité par 240 Publications

ACE-tRNAs are a platform technology for suppressing nonsense mutations that cause cystic fibrosis [ Nucleic Acids Res, 2025, 53(13)gkaf675] PubMed: 40650978
In silico, in vitro and ex vivo characterization of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator pathogenic variants localized in the fourth intracellular loop and their rescue by modulators [ Br J Pharmacol, 2025, 10.1111/bph.70176] PubMed: 40831301
Global functional genomics reveals GRK5 as a cystic fibrosis therapeutic target synergistic with current modulators [ iScience, 2025, 28(3):111942] PubMed: 40040803
Human Induced Lung Organoids: A Promising Tool for Cystic Fibrosis Drug Screening [ Int J Mol Sci, 2025, 26(2)437] PubMed: 39859153
Nasal cells as a bronchial cell surrogate for pre-clinical assessment of drug response in cystic fibrosis [ Front Pharmacol, 2025, 16:1651122] PubMed: 40978488
Inhibitors of the ubiquitin‑proteasome system rescue cellular levels and ion transport function of pathogenic pendrin (SLC26A4) protein variants [ Int J Mol Med, 2025, 55(5)69] PubMed: 40052591
The Inhibition of the Membrane-Bound Transcription Factor Site-1 Protease (MBTP1) Alleviates the p.Phe508del-Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator (CFTR) Defects in Cystic Fibrosis Cells [ Cells, 2024, 13(2)185] PubMed: 38247876
Comprehensive Assessment of CFTR Modulators' Therapeutic Efficiency for N1303K Variant [ Int J Mol Sci, 2024, 25(5)2770] PubMed: 38474016
Estimation of Chloride Channel Residual Function and Assessment of Targeted Drugs Efficiency in the Presence of a Complex Allele [L467F;F508del] in the CFTR Gene [ Int J Mol Sci, 2024, 25(19)10424] PubMed: 39408749
The F508del-CFTR trafficking correctors elexacaftor and tezacaftor are CFTR-independent Ca2+-mobilizing agonists normalizing abnormal Ca2+ levels in human airway epithelial cells [ Respir Res, 2024, 25(1):436] PubMed: 39702307

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