Degrasyn (WP1130)

En plus d'induire une régulation à la baisse rapide de Bcr/Abl sans affecter Bcr ou c-Abl, Degrasyn (WP1130) régule également la stabilité de Jak2 et c-Myc sans affecter d'autres kinases (HER1, HER2, c-Kit, FAK, ERK1, ERK2, Akt, Btk, Src et Src-related kinases) ou facteurs de transcription (p53 de type sauvage, STAT1, STAT3, STAT5, c-Jun, NF-κB et Max). Contrairement à l'adaphostine, ce composé induit une régulation à la baisse de Bcr/Abl en 60 minutes. Il est plus efficace pour induire l'apoptose des cellules tumorales myéloïdes et lymphoïdes avec une IC50 d'environ 0,5-2,5 μM par rapport aux précurseurs hématopoïétiques CD34⁺ normaux, aux fibroblastes dermiques ou aux cellules endothéliales avec une IC50 d'environ 5-10 μM. Ce produit chimique (5 μM) régule spécifiquement et rapidement à la baisse les protéines Bcr/Abl de type sauvage et mutante T315I sans affecter l'expression du gène bcr/abl ni engager la voie de dégradation protéasomale dans les cellules de leucémie myéloïde chronique (LMC), accompagnée de l'induction d'Apoptosis. Il est plus efficace pour réduire la formation de colonies de cellules leucémiques par rapport aux cellules progénitrices normales, et efficace contre les cellules leucémiques primaires hébergeant la mutation T315I. [1] Ce composé induit une dégradation rapide, dépendante du protéasome, de la protéine c-Myc dans les lignées de myélome multiple MM-1 et d'autres cellules tumorales, corrélée à l'inhibition de la croissance tumorale. [2] Contrairement à l'AG490, il agit comme un inhibiteur de déubiquitinase (DUB) partiellement sélectif pour induire une accumulation rapide et marquée de protéines polyubiquitinées (liées K48/K63) dans les aggresomes juxtanucléaires sans affecter l'activité du protéasome. Ce produit chimique (5 μM) inhibe directement l'activité DUB d'USP9x, USP5, USP14, UCH-L1 et UCH37, mais pas d'UCH-L3, entraînant une régulation à la baisse des protéines antiapoptotiques et une régulation à la hausse des protéines proapoptotiques, telles que MCL-1 et p53. [3]

L'administration de WP1130 inhibe la croissance des tumeurs K562 ainsi que des cellules BaF/3 exprimant Bcr/Abl de type sauvage et Bcr/Abl mutante T315I transplantées chez des souris nues. [1] Conformément à la régulation à la baisse de c-Myc, ce composé présente une puissante activité inhibitrice contre les tumeurs de mélanome A375 établies chez des souris nues. [2]

• Lignées cellulaires

  BV173, BV173R, K562, and BaF/3

• Concentrations

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

• Temps dincubation

  72 hours

• Méthode

  Cells are treated with increasing concentrations of WP1130 (0.08-10 μM) in 96-well plates. Plates are incubated at 37 °C for 72 hours, after which 20 μL of MTT reagent is added, and the plates are incubated at 37 °C for another 2 hours. Cells are lysed with 100 μL lysis buffer (20% sodium dodecyl sulfate [SDS] in 50% N, N-dimethylformamide adjusted to pH 4.7 with 80% acetic acid and 1 M hydrochloric acid; final concentration of acetic acid is 2.5% and hydrochloric acid is 2.5%) and incubated for 6 hours. The optical density of each sample at 570 nm is determined with a SPECTRA MAX M2 plate reader.

• Modèles animaux

  Swiss Nu/Nu mice transplanted with K562 tumor cells, BaF/3wt cells, or BaF/3/T315I cells

• Posologies

  ~40 mg/kg every other day

• Administration

  Injected intraperitoneally