Afatinib (BIBW2992)

N° de catalogueS1011 Lot :S101113

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Données techniques

Formule

C24H25ClFN5O3
Poids moléculaire 485.94 Numéro CAS 850140-72-6
Solubilité (25°C)* In vitro DMSO 97 mg/mL (199.61 mM)
Ethanol 90 mg/mL (185.2 mM)
Water Insoluble
In vivo (Ajouter les solvants au produit individuellement et dans lordre.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description Afatinib inhibe l'EGFR/ErbB irréversiblement in vitro avec une IC50 de 0,5, 0,4, 10, 14, 1 nM pour EGFRwt, EGFR L858R , EGFR L858R/T790M ErbB2 (HER2) et ErbB4 (HER4), respectivement. Ce composé induit l'autophagie.
Cibles
EGFR (L858R)
(Cell-free assay)		 EGFR (wt)
(Cell-free assay)		 ErbB4
(Cell-free assay)		 EGFR (L858R/T790M)
(Cell-free assay)		 HER2
(Cell-free assay)
0.4 nM 0.5 nM 1 nM 10 nM 14 nM
In vitro BIBW2992 montre une activité puissante contre les formes sauvage et mutante de l'EGFR et de HER2. Sa puissance est similaire à celle du Gefitinib contre l'EGFR L858R, mais il est environ 100 fois plus actif contre le double mutant L858R-T790M EGFR résistant au Gefitinib. Ce composé exerce des effets puissants sur la phosphorylation de l'EGFR et de HER2 in vivo. Il se compare favorablement aux composés de référence (tels que le Lapatinib et al.) dans tous les types de cellules testés, tels que la lignée cellulaire de carcinome épidermoïde humain A431 exprimant l'EGFR wt, les cellules murines NIH-3T3 transfectées avec HER2 wt, ainsi que la lignée cellulaire de cancer du sein BT-474 et la lignée cellulaire de cancer gastrique NCI-N87, qui expriment HER2 endogène.
In vivo L'administration orale quotidienne de BIBW2992 à 20 mg/kg pendant 25 jours entraîne une régression tumorale spectaculaire avec un rapport volume tumoral traité/témoin cumulatif (rapport T/C) de 2%. La phosphorylation réduite de l'EGFR et de l'AKT est confirmée par coloration immunohistochimique des coupes tissulaires. Par conséquent, comme le lapatinib et le neratinib, ce composé est un inhibiteur de la Protein Tyrosine Kinase (TKI) de nouvelle génération qui inhibe irréversiblement les kinases du récepteur 2 du facteur de croissance épidermique humain (Her2) et du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR). Il est non seulement actif contre les mutations de l'EGFR ciblées par les TKI de première génération comme l'Erlotinib ou le Gefitinib, mais aussi contre celles insensibles à ces thérapies standard.

Protocole (de référence)

Test kinase :

[1]
  • Essais d'activité kinase in vitro

    Le domaine de la tyrosine kinase de type sauvage de l'EGFR humain ainsi que celui du double mutant EGFR L858R/T790M sont fusionnés à la Glutathione-S-transférase (GST) et extraits. L'activité enzymatique est ensuite testée en présence de l'inhibiteur BIBW2992, dilué en série dans 50% de DMSO. Un polymère aléatoire pEY (4:1) est utilisé comme substrat et le pEY biotinylé (bio-pEY) est ajouté comme substrat traceur. Le domaine kinase de HER2 est cloné à l'aide du système baculovirus et extrait de manière similaire à celui de la kinase EGFR. Les détails des essais pour l'activité kinase de l'EGFR, HER2, SRC, BIRK et VEGFR2 sont disponibles dans les informations supplémentaires.
Test cellulaire :

[1]
  • Lignées cellulaires

    NSCLC cells

  • Concentrations

    0-10 μM

  • Temps dincubation

    1 hour

  • Méthode

    1 × 104 NSCLC cells are transferred into each well of a 96-well plate and cultured overnight in serum-free media for the EGFR phosphorylation assay. After addition of this compound on the next day, the plates are incubated at 37 °C for 1 hour. EGF-stimulation is done using 100 ng/mL for 10 min at room temperature. Cells are washed with ice cold PBS, extracted with 120 μL HEPEX buffer per well and shaken at room temperature for 1 hour. In all 2 × 104 cells per well is used for the HER2 phosphorylation assay. Streptavidin precoated plates are coated with anti-EGFR-biotin at 1:100 dilution in blocking buffer and c-erb2/HER2 oncoprotein Ab-5(Clone N24)-Biotin. Cell extracts is then transferred to the antibody-coated wells and incubated at room temperature for 1 hour. Extinction is measured at 450 nm.
Étude animale :

[1]
  • Modèles animaux

    Athymic NMRI-nu/nu female mice

  • Posologies

    20 mg/kg

  • Administration

    Oral administration

Références

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18408761/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24266694/

Validation du produit par le client

<p>Inhibition of signaling pathway activation in lung tumor cell lines by kinase inhibitors. Lung tumor cells were cultured in 10% FBS until reaching ∼80% confluence and then the cells were starved in serum-free medium for overnight, followed by 4-hour treatment with the inhibitors. Cell lysates were then prepared and used for determination of the pathway activation signals by the CEER assay.</p>

Données de [ Int J Proteomics , 2011 , 2011, 215496 ]

<p>Inhibition of anchorage-independent growth of lung tumor cell lines by selected inhibitors. Each selected cell line was treated with the indicated inhibitor at 0.1 μM and 1 μM concentrations for two weeks and cell colony size formation was scored under the Nikon inverted-phase microscope.</p>

Données de [ Int J Proteomics , 2011 , 2011, 215496 ]

<p>After starved in serum-free medium for 24h, Breast cancer cells incubated with the indicated concentrations of BIBW2992 for 3h,followed by 15-minute stimolation of 100ng/ml EGF</p>

, , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

Immunoblot analysis of serum starved H2030 cells pre-treated with 500 nM or 1 µM of gefitinib, crizotinib, CP-724714, or afatinib for 12 hr, followed by stimulation with EGF, HGF, NRG1, or their combination (50 ng/ml) for 10 min.

Données de [ , , Nature, 2016, 534(7609):647-51 ]

Sellecks Afatinib (BIBW2992) A été cité par 453 Publications

Lysosomal EGFR acts as a Rheb-GEF independent of its kinase activity to activate mTORC1 [ Cell Res, 2025, 10.1038/s41422-025-01110-x] PubMed: 40259053
Longitudinal single-cell multiomic atlas of high-risk neuroblastoma reveals chemotherapy-induced tumor microenvironment rewiring [ Nat Genet, 2025, 10.1038/s41588-025-02158-6] PubMed: 40229600
The potential of lazertinib and amivantamab combination therapy as a treatment strategy for uncommon EGFR-mutated NSCLC [ Cell Rep Med, 2025, 6(2):101929] PubMed: 39874964
AP1-mediated reprogramming of EGFR expression triggers resistance to BLU-667 and LOXO-292 in RET-rearranged tumors [ J Exp Clin Cancer Res, 2025, 44(1):154] PubMed: 40405293
Anti-galectin-9 therapy synergizes with EGFR inhibition to reprogram the tumor microenvironment and overcome immune evasion [ J Immunother Cancer, 2025, 13(7)e010926] PubMed: 40664443
Blocking cancer-fibroblast mutualism inhibits proliferation of endocrine therapy resistant breast cancer [ Mol Syst Biol, 2025, 10.1038/s44320-025-00104-6] PubMed: 40341770
PI3K-dependent GAB1/Erk phosphorylation renders head and neck squamous cell carcinoma sensitive to PI3Kα inhibitors [ Cell Death Dis, 2025, 16(1):457] PubMed: 40533463
Exercise-induced adipokine Nrg4 alleviates MASLD by disrupting hepatic cGAS-STING signaling [ Cell Rep, 2025, 44(2):115251] PubMed: 39891907
Rare mutations at EGFR L747 position: molecular characteristics and superior response to afatinib in NSCLC patients [ ESMO Open, 2025, 10(9):105558] PubMed: 40834500
PTEN loss and ERBB2/ERBB3-mediated AKT reactivation drive resistance to MET inhibition in MET-amplified hepatocellular carcinoma [ Cell Oncol (Dordr), 2025, 10.1007/s13402-025-01097-y] PubMed: 40991144

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