Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222)

L'Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222) à 5 μM inhibe complètement la polymérisation de la tubuline isolée de cerveaux bovins, mais contrairement au VCR, ce composé à une concentration élevée de 80 μM n'entraîne pas l'agrégation de la tubuline. À 16 μM, il dépolymérise également puissamment la tubuline polymérisée (IC50 = 3,8 μM). L'ajout d'Ansamitocin p-3 à des cellules en culture bloque l'altération morphologique des cellules AC de fibroépithélioïdes à un type de cellule gliale causée par l'exposition à une certaine concentration de dibutyryl adénosine 3':5'-monophosphate cyclique. De plus, à 16 nM, il provoque la dispersion rapide du réseau bien défini de microtubules cytoplasmiques des cellules A31. Un traitement à court terme avec ce composé inhibe également la synthèse de l'ADN dans les cellules A31 ou les cellules KB. Ces résultats confirment qu'il agit en interférant avec le système d'assemblage des microtubules, entraînant ainsi une inhibition de la formation des fibres du fuseau mitotique et, finalement, une cytokilling. [1] Ce composé présente une cytotoxicité puissante contre les cellules A-549, HT-29 et MCF-7 de manière dose-dépendante avec des ED50 de 4 ×10^-7, 4 × 10^-7 et 2 × 10^-6 μg/mL, respectivement. [2] Il présente également une cytotoxicité contre les cellules HCT-116 avec un EC50 beaucoup plus faible de 0,081 nM. [3] L'Ansamitocin p-3 améliore l'effet des radiations à la fois dans les cellules de drosophile et les cellules cancéreuses humaines de manière dépendante de p53. [4]

Le traitement à l'Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222) (>1 μg) supprime significativement la croissance de la leucémie SN36 et induit un arrêt accru en métaphase des cellules leucémiques P388. À 25 μg/kg/jour, il prolonge significativement la durée de survie des souris porteuses d'un mélanome B16 i.p. de 130 %. Ce composé prolonge également significativement la durée de survie des souris porteuses d'un carcinome ascite d'Ehrlich, d'un sarcome 180 et d'un mastocytome P815, tout en prolongeant légèrement la durée de survie des souris porteuses d'un myélome ascite MOPC-104E, d'une leucémie L1210 et d'une leucémie C1498. [1]

• Test d'inhibition de la polymérisation

  Après l'ajout de 100 μL de diverses concentrations de solution d'Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222) (tampon MES sans GTP) ou de tampon Tris 1 M, pH 8,4 (pour le blanc), à 400 μL de solution de tubuline bovine (1 mg/mL dans un tampon MES froid), maintenue à 0 °C pendant 10 à 15 minutes, le mélange est réchauffé dans un bain-marie à 37 °C pendant 30 à 60 minutes. La polymérisation de la tubuline est suivie par une augmentation de la turbidité du mélange pendant le réchauffement. La mesure de la turbidité est effectuée à 460 nm avec un spectrophotomètre Hitachi type 101.

• Lignées cellulaires

  A31 and KB

• Concentrations

  Dissolved in DMSO, final concentrations ~10 μM

• Temps dincubation

  ~24 hours

• Méthode

  Cells are synchronized and then exposed to various concentrations of Ansamitocin p-3 (Maytansinol isobutyrate, NSC292222) for ~24 hours. After pulse-labeling at 37 °C for 1 hour with [³H]thymidine (5 Ci/mM, 1 µCi/mL) in 1 mL of the medium, the cells on coverslips are fixed with methanol:acetic acid (3:1). The acid-soluble fraction is washed out from the cells, and the radio activity of each coverslip is determined by a liquid scintillation counter.

• Modèles animaux

  Female DBA/2 mice bearing P388, L1210, or P815 cells, C57BL/6 mice bearing B16, or C1498 cells, ICR mice bearing sarcoma 180 and EAC, and BALB/c mice bearing MOPC-104E cells

• Posologies

  ~200 μg/kg

• Administration

  Administered i.p. or i.v. daily