AZD6482

N° de catalogueS1462 Lot :S146201

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Données techniques

Formule

C₂₂H₂₄N₄O₄

Poids moléculaire

408.45

Numéro CAS

1173900-33-8

Solubilité (25°C)*

In vitro

DMSO

82 mg/mL (200.75 mM)

Ethanol

10 mg/mL (24.48 mM)

Water

Insoluble

In vivo (Ajouter les solvants au produit individuellement et dans lordre.)

Homogeneous suspension

CMC-NA

≥5mg/ml

Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description

AZD6482 (KIN-193) est un inhibiteur de PI3Kβ avec un IC50 de 10 nM, 8, 87 et 109 fois plus sélectif pour la PI3Kβ que pour la PI3Kδ, la PI3Kα et la PI3Kγ dans les essais sans cellules. Phase 1.

Cibles

PI3Kβ (Cell-free assay)	PI3Kδ (Cell-free assay)	DNA-PK (Cell-free assay)	PI3Kα (Cell-free assay)
10 nM	80 nM	420 nM	870 nM

In vitro

AZD6482 inhibe également PI3Kα, γ et δ, avec un IC50 de 80 nM à 1,09 μM, ce qui est significativement plus faible que son énantiomère (+)- (forme S). Ce composé est un agent antiplaquettaire ; il bloque l'activation, l'adhésion/l'agrégation plaquettaire et favorise la désagrégation plaquettaire dans un essai d'agrégation plaquettaire lavée (WPA), avec une valeur IC50 de 6 nM. De plus, en ciblant PI3Kβ, ce produit chimique inhibe spécifiquement la thrombose sans interférer avec l'hémostase normale. Il est donc utilisé comme médicament antithrombotique pour la prophylaxie des troubles thrombotiques.

Protocole (de référence)

Test kinase :^{^[1]}	Essai d'inhibition enzymatique de PI3K L'inhibition de PI3Kβ, PI3Kα, PI3Kγ et PI3Kδ est évaluée dans un essai d'activité enzymatique basé sur AlphaScreen utilisant des enzymes recombinantes humaines. L'essai mesure la conversion de PIP2 en PIP3 médiée par PI3K. Le PIP3 biotinylé, un domaine d'homologie de pleckstrine (PH) marqué GST et les deux billes AlphaScreen forment un complexe qui émet un signal lors de l'excitation laser à 680 nm. Le PIP3 formé lors de la réaction enzymatique entre en compétition avec le PIP3 biotinylé pour la liaison au domaine PH, réduisant ainsi le signal avec l'augmentation du produit enzymatique. Ce composé est dissous dans du DMSO et ajouté à des plaques de 384 puits. PBKβ, PBKα, PBKγ ou PBKδ est ajouté dans un tampon Tris (50 mM Tris pH 7,6, 0,05 % CHAPS, 5 mM DTT et 24 mM MgCl₂) et laissé à préincuber avec ce produit chimique pendant 20 minutes avant l'ajout de la solution de substrat contenant PIP2 et ATP. La réaction enzymatique est arrêtée après 20 minutes par l'ajout d'une solution d'arrêt contenant de l'EDTA et du biotin-PIP3, suivi de l'ajout d'une solution de détection contenant du GST-grpl PH et des billes AlphaScreen. Les plaques sont laissées pendant un minimum de 5 heures dans l'obscurité avant l'analyse. Les concentrations finales de DMSO, d'ATP et de PIP2 dans l'essai sont respectivement de 0,8 %, 4 μM et 40 μM. Les valeurs IC50 sont calculées selon l'équation, y = {a+[(b-a)/(l+(x/IC50)^s)]}, où y = % d'inhibition ; a = 0 % ; b = 100 % ; s = la pente de la courbe concentration-réponse ; x = la concentration de ce composé.
Test cellulaire :^{^[1]}	Lignées cellulaires Human platelet pellet Concentrations 0–60 nM, dissolved in DMSO Temps dincubation 5 min Méthode For assay of washed platelet aggregation (WPA), the platelet pellets are isolated from human blood and re-suspended to 2 × 10¹⁵/L in Tyrodes buffer (TB) containing 1 μM hirudin and 0.02 U/mL apyrase. Then, the platelet suspension is left to rest at room temperature for 30 min. Just prior to time for assay, CaCl₂ is added to a final concentration of 2 mM. AZD6482, dissolved in DMSO, is added to a 96-well plate prior to the addition of the washed platelet suspension. The platelet suspension is preincubated with this compound for 5 min. Light absorption at 650 nm is recorded before and after a 5 min plate shake and referred to as recording 0 (R0) and Rl. A mouse anti-human CD9 antibody is added (at a donor specific concentration) to each well prior to next 10 min plate shake and light absorption recording; R2. For data analysis, light absorbance in wells with TB are subtracted from all readings before percent aggregation is calculated according the formula: [(R1-R2)/R1] × 100 = % aggregation. Spontaneous aggregation or pro-aggregatory effect of the inhibitor is evaluated by the same formula, [(R0-Rl)/R0] × 100 = % aggregation. IC50 values are calculated according to the equation, y = {a+[(b-a)/(l+(x/IC50)^s)]}, where y = % inhibition; a = 0%; b = 100%; s = the slope of the concentration-response curve; x = this chemical concentration.

Test kinase :^{^[1]}

Essai d'inhibition enzymatique de PI3K
L'inhibition de PI3Kβ, PI3Kα, PI3Kγ et PI3Kδ est évaluée dans un essai d'activité enzymatique basé sur AlphaScreen utilisant des enzymes recombinantes humaines. L'essai mesure la conversion de PIP2 en PIP3 médiée par PI3K. Le PIP3 biotinylé, un domaine d'homologie de pleckstrine (PH) marqué GST et les deux billes AlphaScreen forment un complexe qui émet un signal lors de l'excitation laser à 680 nm. Le PIP3 formé lors de la réaction enzymatique entre en compétition avec le PIP3 biotinylé pour la liaison au domaine PH, réduisant ainsi le signal avec l'augmentation du produit enzymatique. Ce composé est dissous dans du DMSO et ajouté à des plaques de 384 puits. PBKβ, PBKα, PBKγ ou PBKδ est ajouté dans un tampon Tris (50 mM Tris pH 7,6, 0,05 % CHAPS, 5 mM DTT et 24 mM MgCl₂) et laissé à préincuber avec ce produit chimique pendant 20 minutes avant l'ajout de la solution de substrat contenant PIP2 et ATP. La réaction enzymatique est arrêtée après 20 minutes par l'ajout d'une solution d'arrêt contenant de l'EDTA et du biotin-PIP3, suivi de l'ajout d'une solution de détection contenant du GST-grpl PH et des billes AlphaScreen. Les plaques sont laissées pendant un minimum de 5 heures dans l'obscurité avant l'analyse. Les concentrations finales de DMSO, d'ATP et de PIP2 dans l'essai sont respectivement de 0,8 %, 4 μM et 40 μM. Les valeurs IC50 sont calculées selon l'équation, y = {a+[(b-a)/(l+(x/IC50)^s)]}, où y = % d'inhibition ; a = 0 % ; b = 100 % ; s = la pente de la courbe concentration-réponse ; x = la concentration de ce composé.

Test cellulaire :^{^[1]}

Lignées cellulaires
Human platelet pellet
Concentrations
0–60 nM, dissolved in DMSO
Temps dincubation
5 min
Méthode
For assay of washed platelet aggregation (WPA), the platelet pellets are isolated from human blood and re-suspended to 2 × 10¹⁵/L in Tyrodes buffer (TB) containing 1 μM hirudin and 0.02 U/mL apyrase. Then, the platelet suspension is left to rest at room temperature for 30 min. Just prior to time for assay, CaCl₂ is added to a final concentration of 2 mM. AZD6482, dissolved in DMSO, is added to a 96-well plate prior to the addition of the washed platelet suspension. The platelet suspension is preincubated with this compound for 5 min. Light absorption at 650 nm is recorded before and after a 5 min plate shake and referred to as recording 0 (R0) and Rl. A mouse anti-human CD9 antibody is added (at a donor specific concentration) to each well prior to next 10 min plate shake and light absorption recording; R2. For data analysis, light absorbance in wells with TB are subtracted from all readings before percent aggregation is calculated according the formula: [(R1-R2)/R1] × 100 = % aggregation. Spontaneous aggregation or pro-aggregatory effect of the inhibitor is evaluated by the same formula, [(R0-Rl)/R0] × 100 = % aggregation. IC50 values are calculated according to the equation, y = {a+[(b-a)/(l+(x/IC50)^s)]}, where y = % inhibition; a = 0%; b = 100%; s = the slope of the concentration-response curve; x = this chemical concentration.

Références

http://www.wipo.int/patentscope/search/en/WO2009093972

Validation du produit par le client

: , , Mol Cancer Res, 2017, 15(6):765-775

: , , One customer

: , , Dr. Zhang of Tianjin Medical University

: Données de [ , , Oncotarget, 2016, 7(34):54897-54912 ]

Sellecks AZD6482 A été cité par 27 Publications

Human colonic organoids for understanding early events of familial adenomatous polyposis pathogenesis [ J Pathol, 2025, 265(1):26-40]	PubMed: 39641466
Longitudinal phosphoproteomics reveals the PI3K-PAK1 axis as a potential target for recurrent colorectal liver metastases [ Cell Rep, 2024, 43(12):115061]	PubMed: 39689713
Molecular mechanisms of PI3K isoform dependence in embryonic growth [ J Turk Ger Gynecol Assoc, 2024, 25(3):159-166]	PubMed: 39219229
A Gene Co-Expression Network-Based Drug Repositioning Approach Identifies Candidates for Treatment of Hepatocellular Carcinoma [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1573]	PubMed: 35326724
ZAP70 Activation Compensates for Loss of Class IA PI3K Isoforms Through Activation of the JAK-STAT3 Pathway [ Cancer Diagn Progn, 2022, 2(3):391-404]	PubMed: 35530641
Synergism between the phosphatidylinositol 3-kinase p110β isoform inhibitor AZD6482 and the mixed lineage kinase 3 inhibitor URMC-099 on the blockade of glioblastoma cell motility and focal adhesion formation [ Cancer Cell Int, 2021, 21(1):24]	PubMed: 33407478
Metabolic Imaging Detects Resistance to PI3Kα Inhibition Mediated by Persistent FOXM1 Expression in ER+ Breast Cancer [ Cancer Cell, 2020, S1535-6108(20)30427-X]	PubMed: 32976773
PIK3CA C-terminal frameshift mutations are novel oncogenic events that sensitize tumors to PI3K-α inhibition [ Proc Natl Acad Sci U S A, 2020, 117(39):24427-24433]	PubMed: 32929011
Targeting phosphatidylinositol 3 kinase-β and -δ for Bruton tyrosine kinase resistance in diffuse large B-cell lymphoma [ Blood Adv, 2020, 4(18):4382-4392]	PubMed: 32926124
Application of a Biphasic Mathematical Model of Cancer Cell Drug Response for Formulating Potent and Synergistic Targeted Drug Combinations to Triple Negative Breast Cancer Cells. [ Cancers (Basel), 2020, 27;12(5)pii: E1087]	PubMed: 32349331

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