Bortezomib

Bortezomib, un dipeptide d'acide boronique, est un inhibiteur hautement sélectif et réversible du 26S Proteasome qui fonctionne principalement dans la dégradation des protéines mal repliées et est essentiel pour la régulation du cycle cellulaire. L'exposition à ce composé a montré qu'elle stabilise p21, p27 et p53, ainsi que les protéines proapoptotiques Bid et Bax, la cavéoline-1 et l'inhibiteur κB-α, ce qui empêche l'activation des voies de survie cellulaire induites par le facteur nucléaire κB. Il favorise également l'activation de la c-Jun-NH2 terminal kinase proapoptotique, ainsi que la réponse au stress du réticulum endoplasmique. L'altération des niveaux de ces protéines cellulaires conduit à l'inhibition de la prolifération, de la migration et à la promotion de l'apoptose des cellules cancéreuses. [2] Ce produit chimique est démontré pénétrer dans les cellules et inhiber la protéolyse intracellulaire des protéines à longue durée de vie médiée par le Proteasome, avec une concentration qui inhibe 50% de la protéolyse d'environ 0,1 μM. La valeur moyenne d'inhibition de croissance de 50% pour ce composé sur l'ensemble des 60 lignées de cellules cancéreuses dérivées de multiples tumeurs humaines de l'US National Cancer Institute (NCI) est de 7 nM. Le traitement des cellules PC-3 avec celui-ci (100 nM) pendant 8 h entraîne l'accumulation de cellules en G2-M, avec une diminution correspondante du nombre de cellules en G1. Il tue les cellules PC-3 à 24 et 48 h avec une IC50 de 100 et 20 nM, respectivement. Cet agent induit une condensation nucléaire 16 à 24 h après le traitement. Son traitement entraîne le clivage de PARP de manière dépendante du temps avec des concentrations aussi faibles que 100 nM étant efficaces à 24 h. [1]

Les effets anticancéreux de Bortezomib en monothérapie ont été démontrés dans des modèles xénogreffes de myélome multiple, de leucémie à cellules T adultes, de cancers du poumon, du sein, de la prostate, du pancréas, de la tête et du cou, et du côlon, ainsi que dans le mélanome. [2] L'administration orale de ce composé à 1,0 mg/kg par jour pendant 18 jours entraîne des retards de croissance tumorale, ainsi qu'une diminution du nombre de métastases dans le modèle de cancer du poumon de Lewis. Ce composé à une dose unique allant jusqu'à 5 mg/kg a significativement diminué la fraction survivante des cellules tumorales mammaires. L'administration hebdomadaire de ce produit chimique à 1,0 mg/kg pendant 4 semaines réduit la croissance tumorale de 60 % dans des modèles xénogreffes murins de cancer de la prostate. Le traitement avec cet agent à 1,0 mg/kg pendant 4 semaines entraîne une réduction de 72 % ou 84 % de la croissance des xénogreffes murines de cancer du pancréas, ainsi qu'une augmentation de l'apoptose des cellules tumorales. Ce composé à 1,0 mg/kg entraîne une inhibition significative de la croissance des xénogreffes de plasmacytome humain, une augmentation de l'apoptose des cellules tumorales et de la survie globale, et une diminution de l'angiogenèse tumorale. [3]

• Méthodes cinétiques

  Dans une analyse cinétique typique, 2,00 mL de tampon de dosage (20 mM HEPES, 0,5 mM EDTA, 0,035 % SDS, pH 7,8) et de Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-AMC dans du DMSO sont ajoutés à une cuvette de fluorescence de 3 mL, et la cuvette est placée dans le support de cellule à enveloppe d'un spectrophotomètre de fluorescence. La température de réaction est maintenue à 37 ℃ par un bain-marie à circulation. Une fois que la solution de réaction a atteint l'équilibre thermique (5 minutes), 1 μL à 10 μL de la solution enzymatique mère est ajoutée à la cuvette. La progression de la réaction est surveillée par l'augmentation de l'émission de fluorescence à 440 nm (λ_ex= 380 nm) qui accompagne le clivage de l'AMC des substrats peptide-AMC.

• Lignées cellulaires

  Human multiple myeloma cells line U266

• Concentrations

  ~10 μM

• Temps dincubation

  2 days

• Méthode

  The inhibitory effect of Bortezomib on cell growth is assessed by measuring MTT dye absorbance of the cells. Cells from 48-hour cultures are pulsed with 10 μL of 5 mg/mL MTT to each well for the last 4 hour of 48-hour cultures, followed by 100 μL of isopropanol containing 0.04 N HCl. Absorbance is measured at 570 nm using a spectrophotometer.

• Modèles animaux

  Human plasmacytoma xenografts RPMI 8226

• Posologies

  1 mg/kg

• Administration

  i.v. twice weekly for 4 weeks, then once weekly