Capsazepine

La Capsazepine (CPZ) à une concentration de 94,2 µg/ml (concentration IC50 de ce composé) présente une inhibition statistiquement significative de la croissance et de la prolifération des ostéoclastes[2]. Ce composé convertit la NKA en Na-ATPase. Il inhibe l'activité dépendante du K+ mais permet la Na-ATPase associée au transport de Na+. La CPZ n'a aucun effet sur la Na-ATPase mesurée en l'absence de K+. Ce produit chimique inhibe également l'activité para-nitrophényl phosphatase, bien qu'avec une affinité plus faible. Il réduit fortement le niveau d'EP à l'état stable et l'affinité du Na+ pour la phosphorylation a diminué de 3 fois après le traitement par CPZ. En résumé, ce composé bloque un cycle Na+/K+ dans la NKA mais laisse un cycle Na+ intact, réduisant la stoechiométrie de transport de la pompe[3]. Ce produit chimique inhibe la formation d'ostéoclastes et la résorption osseuse de manière dose-dépendante dans des co-cultures de moelle osseuse-ostéoblastes et des cultures d'ostéoclastes générées par RANKL. Il supprime également la phosphorylation d'IκB et d'ERK1/2 induite par RANKL et provoque l'apoptose des ostéoclastes matures et inhibe également l'activité de la phosphatase alcaline et la formation de nodules osseux dans les cultures d'ostéoblastes calvaires[4].

Le prétraitement à la Capsazepine prévient l'augmentation de la résistance du système respiratoire et diminue l'augmentation de l'amortissement tissulaire pendant l'endotoxémie. Ce composé atténue également les lésions pulmonaires par une réduction de la zone d'effondrement du parenchyme pulmonaire induite par le lipopolysaccharide (LPS).

• Lignées cellulaires

  Murine macrophage cell line RAW 264.7

• Concentrations

  94.2 µg/ml

• Temps dincubation

  72 h

• Méthode

  The cells are plated and treated with different concentrations of the test compounds and allowed to proliferate for 72 h. After 72 h of proliferation the cells are fixed in 10% formalin saline (50 μl/well) for 30 min. Then the cells are stained with crystal violet (0.05% w/v) for 30 min. The wells are then washed thoroughly with distilled water to remove any unbound dye and destained with Sorenson's buffer (0.1 M sodium citrate in 50% ethanol, pH 4.2). The absorbance of the extracted stain is measured at 540 nm.