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Description biologique
| Spécificité | CD163L1 Antibody [C10D1] détecte les niveaux endogènes de la protéine CD163L1 totale. |
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| Contexte | CD163L1, également connu sous le nom de CD163 molecule-like 1 ou M160, est une protéine membranaire de type I de la superfamille des récepteurs éboueurs riches en cystéine (SRCR) du groupe B, qui présente de multiples domaines SRCR (généralement 9 à 12), un seul segment transmembranaire et une queue cytoplasmique qui médie l'endocytose via une voie dépendante de la clathrine indépendante de la réticulation des ligands. Issu d'une duplication évolutive tardive du gène CD163, CD163L1 est fortement exprimé sur des sous-populations spécifiques de macrophages tissulaires (souvent en colocalisation avec CD163), mais est minimalement présent ou absent dans les monocytes, les macrophages alvéolaires, les cellules gliales et les cellules de Kupffer ; deux variants d'épissage cytoplasmiques influencent en outre sa localisation subcellulaire. CD163L1 sert de récepteur éboueur endocytaire se liant probablement à des ligands non encore identifiés pour médier la clairance et promouvoir la résolution de l'inflammation par une signalisation anti-inflammatoire et le maintien de l'homéostasie tissulaire, le différenciant de CD163, qui piège spécifiquement les complexes hémoglobine-haptoglobine. CD163L1 ne montre aucune affinité pour l'hémoglobine-haptoglobine ou les bactéries testées, et ne forme pas de complexes protéiques connus. Son expression régulée pendant la différenciation monocyte-macrophage soutient la modulation immunitaire innée, avec une pertinence pathologique dans des conditions inflammatoires telles que l'athérosclérose, potentiellement par une clairance des oxydants similaire à CD163, et dans des contextes auto-immuns en atténuant les réponses immunitaires excessives. |
Informations dutilisation
| Application | IHC | Dilution |
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| Réactivité | Human | ||||
| Source | Rabbit Monoclonal Antibody | MW | |||
| Tampon de stockage | PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 | Stockage (À partir de la date de réception) |
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years | ||
| IHC |
Experimental Protocol：
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
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Références
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