|
Comment citer 1. Pour la citation dans le texte (Matériel & Méthodes) : 2. Pour le tableau des ressources clés : |
||
|
Numéro vert : (877) 796-6397 -- États-Unis et Canada uniquement -- |
Fax : +1-832-582-8590 Commandes : +1-832-582-8158 |
Support technique : +1-832-582-8158 Ext:3 Veuillez indiquer votre numéro de commande dans le-mail. Nous nous efforçons de répondre à toutes les demandes par e-mail dans un délai dun jour ouvrable. |
Description biologique
| Spécificité | Endothelial Cell Antibody [K23P8] reconnaît les niveaux endogènes de la protéine Endothelial Cell totale. |
|---|---|
| Contexte | Les cellules endothéliales forment une monocouche mince et unique tapissant les surfaces intérieures des vaisseaux sanguins et lymphatiques, servant de barrière critique entre les fluides circulants et les tissus environnants. Elles sont connectées par des jonctions serrées et ancrées à une membrane basale, avec des protéines de surface spécialisées telles que la VE-cadherine et le PECAM-1 qui maintiennent l'intégrité vasculaire et médient les interactions des cellules immunitaires. Elles régulent le tonus vasculaire en libérant des vasodilatateurs comme l'oxyde nitrique et des vasoconstricteurs tels que l'endothéline, maintiennent l'hémostase en équilibrant les facteurs pro- et anticoagulants, et contrôlent la filtration des fluides à travers les parois des vaisseaux. Elles jouent des rôles essentiels dans l'Angiogenesis en proliférant et en migrant pour former de nouveaux capillaires, qui sont importants pour la cicatrisation des plaies, la reproduction et la croissance tumorale. Les cellules endothéliales modulent également la surveillance immunitaire par l'expression de sélectines et d'intégrines, facilitant le roulement, l'adhésion et la transmigration des leucocytes pendant l'inflammation. Le dysfonctionnement des cellules endothéliales contribue à des maladies telles que l'athérosclérose, l'hypertension, les complications vasculaires liées au diabète et l'inflammation chronique. Dans les tumeurs, les cellules endothéliales anormales forment des vaisseaux irréguliers et fragiles dépourvus de muscle lisse et de couverture de péricytes, ce qui favorise la progression et la métastase du cancer. Le dysfonctionnement endothélial modifie leur phénotype d'anticoagulant et anti-inflammatoire à pro-thrombotique et pro-inflammatoire, ce qui entraîne la progression des maladies vasculaires. |
Informations dutilisation
| Application | IHC | Dilution |
|
||
|---|---|---|---|---|---|
| Réactivité | Rat | ||||
| Source | Mouse Monoclonal Antibody | MW | |||
| Tampon de stockage | PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3 | Stockage (À partir de la date de réception) |
-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years | ||
| IHC |
Experimental Protocol：
Deparaffinization/Rehydration
1. Deparaffinize/hydrate sections:
2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.
3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.
4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.
5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.
6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.
Staining
1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.
2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.
3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
4. Wash sections in wash buffer for 5 min.
5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.
6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.
7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.
8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.
9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.
10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.
11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.
12. Immerse slides in dH2O.
13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.
14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.
15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.
16. Mount sections with coverslips and mounting medium.
|
Références
|
Données dapplication
IHC
Validé par Selleck
-
Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded rat brain tissue with F1713 at 1:200 dilution.