Etoposide

Etoposide inhibe la synthèse de l'ADN en formant un complexe avec la topoisomerase II et l'ADN, ce qui induit des ruptures dans l'ADN double brin et empêche la réparation par liaison à la topoisomerase II. Les ruptures accumulées dans l'ADN empêchent l'entrée dans la phase mitotique de la division cellulaire et entraînent la mort cellulaire. Ce composé agit principalement dans les phases G2 et S du cycle cellulaire. [1] Il inhibe la croissance de la lignée cellulaire d'hémangiosarcome murin (ISOS-1) sur une période de 5 jours avec une IC50 de 0,25 μg/mL. La croissance cellulaire des cellules endothéliales microvasculaires murines normales (mECs) est moins sensible à ce produit chimique avec une IC50 de 10 μg/mL). [2] Cet agent traité pendant 6 heures inhibe les colonies de la variante tétraploïde de la lignée lymphoblastique leucémique humaine CCRF-CEM avec une IC50 de 0,6 μM. [3] Il traité pendant 2 heures inhibe la croissance des lignées cellulaires de cancer du pancréas humain Y1, Y3, Y5, Y19, YM. YS et YT avec des IC50 de 300 μg/mL, 300 μg/mL, 300 μg/mL, 91 μg/mL, 0,68 μg/mL, 300 μg/mL, 300 μg/mL et 260 μg/mL, respectivement. [4] Ce composé exposé pendant 1 heure inhibe la croissance des lignées cellulaires de gliome humain CL5, G142, G152, G111 et G5 avec une IC50 de 8, 9, 9,8, 10 et 15,8 μg/mL respectivement pendant 12 jours. Dans les mêmes conditions, la valeur IC90 est atteinte dans les lignées cellulaires CL5, G152, G142 et G111 à 26, 27, 32 et 33 μg/mL. Son inhibition de la topoisomerase II est homogène pour chaque cellule. Les taux d'inhibition moyens sont de 15%, 21,8%, 31,8%, 41,5% et 49,5% pour 1, 2, 4, 8 et 16 μg de cet agent, respectivement. [5]

L'Etoposide administré en monothérapie s'est avéré inefficace dans la croissance de nombreux xénogreffes, tels que les hépatoblastomes hétérotransplantés NMHB1 et NMHB 2, [6] les xénogreffes de neuroblastome humain, [7] et les xénogreffes de cancer gastro-intestinal humain, [8] tandis que la dose de 10 mg/kg i.p. de ce composé inhibe les tumeurs d'hémangiosarcome murin ISOS-1 chez 36% des contrôles. [2] Ce produit chimique induit une immunité tumorale dans le cancer du poumon de Lewis. Une seule administration de 50 mg/kg de cet agent i.p. induit une survie de 60% des souris C57B1/6 injectées avec des cellules de cancer du poumon de Lewis (3LL) sur 60 jours. Environ 40% de ces souris survivantes rejettent un défi ultérieur avec 3LL, tandis qu'aucune des souris témoins ne survit au-delà de 30 jours. Les cellules 3LL qui ont survécu à une concentration léthale de 90% de ce composé in vitro tuent 75% des souris receveuses, mais 60% des souris survivantes rejettent le défi avec 3LL. Les splénocytes récoltés chez les souris rejetant la tumeur protègent les souris naïves injectées avec 3LL. [9]

• dosage de l'activité de la Topoisomerase II

  Des extraits nucléaires sont préparés et les noyaux sont isolés. L'activité de la topoisomerase II est calculée à partir du pourcentage de décathénation obtenu. De l'ADN kinoplaste tritié (KDNA 0,22 μg) est utilisé comme substrat. Etoposide et la topoisomerase II sont incubés pendant 30 min à 37 ℃ et sont arrêtés avec 1% de dodécylsulfate de sodium (SDS) et de protéinase K (100 μg/mL). Les pourcentages de décathénation et d'inhibition de la topoisomerase II par ce composé sont obtenus.

• Lignées cellulaires

  Human glioma cell lines CL5

• Concentrations

  80 μg/mL

• Temps dincubation

  1 hour

• Méthode

  After the Etoposide treatment, cells are removed from the dish with phosphate-buffered saline (PBS) containing 0.03% trypsin and 0.27 mM ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) and are diluted into culture dishes in appropriate numbers to yield between 20 and 200 colonies. After 12 days, cultures are fixed with methanol-acetic acid, stained with crystal violet, and scored for colonies containing more than 50 cells. The standard errors are typically less than 15% of the mean value unless otherwise stated.

• Modèles animaux

  Murine angiosarcoma xenografts ISOS-1

• Posologies

  10 mg/kg

• Administration

  i.p. every day for 5 days from day 7