Fludarabine

Fludarabine inhibe efficacement la prolifération des cellules RPMI 8226 avec une IC50 de 1,54 μg/mL. L'IC50 de ce composé contre les cellules MM.1S et MM.1R est respectivement de 13,48 μg/mL et 33,79 μg/mL. En revanche, les cellules U266 sont résistantes à ce produit chimique avec une IC50 de 222,2 μg/mL. Le traitement par ce composé entraîne une augmentation du nombre de cellules en phase G1 du cycle cellulaire, accompagnée d'une réduction concomitante des cellules en phase S du cycle cellulaire de manière temps-dépendante. Il induit un blocage du cycle cellulaire et déclenche l'apoptose dans les cellules MM. Il déclenche le clivage temps-dépendant de la caspase-8, -9, et -3, -7, suivi du clivage de la PARP. Il augmente l'expression de Bax de manière temps-dépendante, tandis que l'expression de Bak ne change pas. Après une exposition à ce produit chimique pendant 12 heures, les cellules RPMI 8226 montrent une perte de potentiel membranaire avec 61,05% des cellules exprimant une faible fluorescence de la rhodamine 123 par rapport à 8,62% des cellules dans le contrôle non traité. [1] Pour améliorer la solubilité, il est formulé sous forme de monophosphate (F-ara-AMP, fudarabine), qui est instantanément et quantitativement déphosphorylé en nucléoside parent après perfusion intraveineuse. À l'intérieur des cellules, une rephosphorylation se produit, ce qui conduit au triphosphate d'arabinoside de fluoroadénine (F-ara-ATP), le métabolite cytotoxique majeur de F-ara-A. [2] Il peut également induire une stimulation pro-inflammatoire des cellules monocytaires, comme évalué par une augmentation de l'expression de l'ICAM-1 et de la libération d'IL-8. [3] Ce composé n'affecte pas la croissance des lignées cellulaires de cancer de l'ovaire, alors qu'il induit une inhibition marquée et dose-dépendante de la prolifération dans les lignées cellulaires de mélanome. [4] C'est un inhibiteur de STAT1 qui réduit spécifiquement STAT1 sans affecter les autres membres de la famille STAT[5]. En plus de l'accumulation cytoplasmique, le cisplatine à faible dose répétée (RLDC) induit l'expression de HMGB1, qui est fortement supprimée par le knockdown de STAT1. De manière cohérente, ce produit chimique supprime l'expression de HMGB1 pendant le traitement RLDC de manière dose-dépendante dans les cellules tubulaires rénales traitées par RLDC[5].

Les tumeurs traitées avec du PBS se développent rapidement pour atteindre environ 10 fois leur volume initial en 25 jours, tandis que les tumeurs traitées avec Fludarabine à 40 mg/kg augmentent moins de 5 fois. Un effet antitumoral significatif de 40 mg/kg de ce composé sur la croissance tumorale de RPMI8226 est démontré. Les tumeurs RPMI8226 traitées avec 40 mg/kg de ce produit chimique au jour 10 augmentent les noyaux apoptotiques. Ce composé est efficace pour supprimer les xénogreffes de myélome RPMI8226 chez les souris SCID. [1]

• Lignées cellulaires

  Dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines

• Concentrations

  2 μg/mL

• Temps dincubation

  24 hours

• Méthode

  After treated with Fludarabine or control, dexamethasone-sensitive (MM.1S) and -resistant (MM.1R) human MM cell lines, RPMI8226 and U266 cell lines (5 × 10⁵ cells) are washed twice in phosphate-buffered saline (PBS) and fixed with 70% ice-cold ethanol, then centrifuged and suspended in PBS containing 100 μg/mL RNase A. After incubated for 30 minutes at 37 ºC, samples are resuspended in 25 μg/mL propidium iodide. Flow cytometry is performed on a FACSCalibur automated system. Apoptosis is determined by Annexin V-FITC apoptosis detection kit, according to the manufacturer's instructions. For TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate nick end labeling) assay, cells are analyzed by flow cytometry using the in situ cell death detection kit.

• Modèles animaux

  Severe combined immunodeficient (SCID) mice bearing RPMI 8226 cells

• Posologies

  40 mg/kg

• Administration

  Administered via i.p.