Taselisib (GDC 0032)

Le GDC-0032 est un inhibiteur oralement biodisponible, puissant et sélectif des isoformes de classe I PI3Kα, δ et γ, avec une inhibition 30 fois moindre de l'isoforme PI3K β par rapport à l'isoforme PI3Kα. Les données précliniques montrent que le GDC-0032 a une activité accrue contre les lignées cellulaires cancéreuses mutantes de l'isoforme PI3Kα (PIK3CA) et amplifiées HER2. Le GDC-0032 inhibe la prolifération des cellules MCF7-neo/HER2 avec une IC50 de 2,5 nM. [1]

La pharmacocinétique du GDC-0032 est approximativement proportionnelle à la dose et indépendante du temps avec une t_1/2 moyenne de 40 heures. La combinaison de GDC-0032 améliore l'activité, entraînant des régressions tumorales et un retard de croissance tumorale (91 % d'inhibition de la croissance tumorale (TGI)). De plus, la combinaison de GDC-0032 améliore l'efficacité in vivo (102 % TGI pour GDC-0032). [1]

• Caractérisation de l'activité biochimique et cellulaire in vitro

  L'activité enzymatique des isoformes de PI3K de classe I est mesurée à l'aide d'un test de polarisation de fluorescence qui surveille la formation de la molécule de 3,4,5-inositoltriphosphate, le produit, qui entre en compétition avec le PIP3 marqué par fluorescence pour se lier à la protéine du domaine d'homologie de la plékstrine GRP-1. Une augmentation du produit phosphatidyl inositide-3-phosphate entraîne une diminution du signal de polarisation de fluorescence, car le fluorophore marqué est déplacé du site de liaison de la protéine GRP-1. Les isoformes de PI3K de classe I sont exprimées et purifiées sous forme de protéines recombinantes hétérodimériques. Le PIP3 marqué à la tétraméthylrhodamine (TAMRA-PIP3), le di-C8-PIP2 et les réactifs de détection du PIP3 sont achetés auprès d'Echelon Biosciences. La PI3Kα est dosée dans des conditions de vitesse initiale en présence de 10 mM Tris (pH 7,5), 25 μM ATP, 9,75 μM PIP2, 5 % de glycérol, 4 mM MgCl₂, 50 mM NaCl, 0,05 % (v/v) de Chaps, 1 mM de dithiothréitol et 2 % (v/v) de DMSO à 60 ng/mL. Après un essai de 30 min à 25 °C, les réactions sont arrêtées avec une concentration finale de 9 mM d'EDTA, 4,5 nM de TAMRA-PIP3 et 4,2 μg/mL de protéine détectrice GRP-1 avant de lire la polarisation de fluorescence sur un lecteur de plaques Envision. Les valeurs d'IC50 sont calculées à partir de l'ajustement des courbes dose-réponse à une équation à 4 paramètres. Chaque valeur rapportée est une moyenne de trois expériences, et toutes ont un écart type inférieur à une moyenne géométrique.

• Modèles animaux

  MCF7-neo/Her2 xenograft model

• Posologies

  1.4, 2.8, 5.8, 11.25, or 22.5 mg/kg

• Administration

  oral