GSK650394

N° de catalogueS7209 Lot :S720902

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Données techniques

Formule

C25H22N2O2
Poids moléculaire 382.45 Numéro CAS 890842-28-1
Solubilité (25°C)* In vitro DMSO 76 mg/mL (198.71 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Ajouter les solvants au produit individuellement et dans lordre.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description Le GSK650394 est un inhibiteur de la kinase-1 régulée par le sérum et les glucocorticoïdes, avec une CI50 de 62 nM et 103 nM pour SGK1 et SGK2, respectivement.
Cibles
SGK1
(Cell-free assay)		 SGK2
(Cell-free assay)
62 nM 103 nM
In vitro Le GSK650394 inhibe le transport épithélial médié par SGK1 avec une CI50 de 0,6 μM dans le test SCC. Dans les cellules LNCaP, ce composé inhibe l'augmentation de la phosphorylation de Nedd4-2 médiée par les androgènes et la croissance cellulaire médiée par les androgènes.Ce produit chimique contrecarre la diminution de la neurogenèse induite par le cortisol, les modifications de la signalisation Hedgehog et la translocation nucléaire du GR. [2] Il inhibe la réplication du virus de la grippe en altérant l'exportation des vRNP de la grippe dans le cytoplasme des cellules A549.

Protocole (de référence)

Test kinase :[1]
  • Test de proximité par scintillation (SPA)

    SGK1 S422D (60-431 aa ; concentration finale de 0,275 μg/mL) ou SGK2 (concentration finale de 0,875 μg/mL) sont activés par PDK1 (concentration finale de 1,1 μg/mL) dans un tampon composé de 50 mM Tris (pH 7,5), 0,1 mM d'EGTA, 0,1 mM d'EDTA, 10 mM de MgCl2, 0,1 % de β-mercaptoéthanol, 1 mg/mL de BSA et d'ATP (concentration finale de 0,15 mM) et incubé pendant 30 minutes à 30 °C. Le SGK2 est préparé exactement comme décrit pour le SGK1, sauf qu'il correspond à la protéine complète. Une solution contenant du peptide CROSStide biotinylé à une concentration finale de 75 μM et du γ32P-ATP correspondant à 2×106 cpm est préparée dans le tampon de réaction. Dans une plaque à 96 puits, 5 μL de ce composé sont ajoutés à 25 μL du mélange enzymatique activé. À cela, 20 μL du mélange CROSStide sont ajoutés et incubés pendant 1 heure à température ambiante. Ensuite, 50 μL d'une suspension de 25 mg/mL de billes SPA recouvertes de streptavidine dans du PBS avec 0,1 M d'EDTA, pH 8,0, sont ajoutés. La plaque est ensuite scellée et centrifugée pendant 8 minutes à 2000 tr/min, puis le signal est détecté en mesurant pendant 30 secondes/puits dans un compteur à scintillation Packard TopCount NXT. Les valeurs IC50 de l'inhibition des activités SGK1 et SGK2 par ce produit chimique sont calculées à partir de ces données à l'aide du logiciel GraphPad Prism 3.
Test cellulaire :[1]
  • Lignées cellulaires

    LNCaP cells

  • Concentrations

    ~10 μM

  • Temps dincubation

    7 days

  • Méthode

    LNCaP cells are plated at a density of 5,000 cells per well in 96-well plates in 100 μL PRF-RPMI 1640, supplemented with 8% CS-FBS, 0.1 mM NEAA, and 1 mM NaPyr. At day three, cells are treated with hormone with or without GSK650394 by removing 50 μL of the media and replacing this with 50 μL of PRF-RPMI 1640 with 8% CS-FBS, NEAA, NaPyr containing a 2X concentration of the appropriate hormone/this compound treatment. At days 5 and 7, the treatment is repeated. On the tenth day, the media is removed and the relative cell number is measured using the FluoReporter Blue assay according to the manufacturer’s instructions.

Références

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18794135/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23650397/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/23487453/

Validation du produit par le client

BV-2 cells were incubated in the absence or presence of gsk650394 (1 μM) for 30 min, followed by LPS (500 ng/ml) administration for 30 min, and then fixed. NF-κB p65 protein was visualized by indirect immunofluorescence staining using an antibody for NF-κB p65. For nuclear staining, the cells were stained with DAPI. Bar = 20 μm.

Données de [ , , Biochem Biophys Res Commun, 2016, 478(1):53-59 ]

GSK650394 treatment reduces steady state levels of BoHV-1 proteins. Cells were grown prior to infection. Three hours prior to infection 25 nM of GSK650394 was added to the designated cultures. CRIB cells were infected withBoHV-1 (moi=2) and then stripped FBS added. At the designated times after infection (hours), whole cell lysate (50 ug protein) was prepared and Western Blots performedusing the designated antibodies directed against a viral protein. Arrows denote the position of bICP0 (97 kD), bICP4 (178 kD), bICP22 (45 kD), VP16 (65 kD), and the bracketdenotes various gE forms. Tubulin was used as a loading control. The lane marked M are molecular weight markers: numbers to left are the approximate size of the respectivebands. These results are representative of 4 independent experiments. The relative levels of the respective BoHV-1 proteins were estimated by comparing the intensity ofthe bands to tubulin using a BioRad ChemiDoc MP and PMI System. The value of the respective viral protein that was first detected after infection was set at 10 and the othervalues normalized to this value. ND refers to those lanes in which the viral protein was not detected. These results are representative of three independent experiments.

Données de [ , , Virus Res, 2016, 222:106-112. ]

Sellecks GSK650394 A été cité par 24 Publications

Patient-derived enteroids provide a platform for the development of therapeutic approaches in microvillus inclusion disease [ J Clin Invest, 2023, 133(20)e169234] PubMed: 37643022
Bacterial DNA promoting inflammation via the Sgk1/Nedd4L/Syk pathway in mast cells contributes to antihistamine non-responsive CSU [ J Leukoc Biol, 2023, qiad025] PubMed: 36857592
Estrogen-sensitive activation of SGK1 induces M2 macrophages with anti-inflammatory properties and a Th2 response at the maternal-fetal interface [ Reprod Biol Endocrinol, 2023, 21(1):50] PubMed: 37226177
Inhibition of SGK1 potentiates the anticancer activity of PI3K inhibitor in NSCLC cells through modulation of mTORC1, p‑ERK and β‑catenin signaling [ Biomed Rep, 2023, 19(6):94] PubMed: 37901878
Therapy Development for Microvillus Inclusion Disease using Patient-derived Enteroids [ bioRxiv, 2023, 2023.01.28.526036] PubMed: 36747680
Activation of Serum/Glucocorticoid Regulated Kinase 1/Nuclear Factor-κB Pathway Are Correlated with Low Sensitivity to Bortezomib and Ixazomib in Resistant Multiple Myeloma Cells [ Biomedicines, 2021, 9(1)E33] PubMed: 33406639
Identification and Kinetic Characterization of Serum- and Glucocorticoid-Regulated Kinase Inhibitors Using a Fluorescence Polarization-Based Assay [ SLAS Discov, 2021, 24725552211002465] PubMed: 33783250
Crosstalk between Hedgehog pathway and the glucocorticoid receptor pathway as a basis for combination therapy in T-cell acute lymphoblastic leukemia [ Oncogene, 2020, 10.1038/s41388-020-01453-2] PubMed: 32917954
Convergent genomic and pharmacological evidence of PI3K/GSK3 signaling alterations in neurons from schizophrenia patients [ Neuropsychopharmacology, 2020, 10.1038/s41386-020-00924-0] PubMed: 33288841
Targeting histone K4 trimethylation for treatment of cognitive and synaptic deficits in mouse models of Alzheimer's disease [ Sci Adv, 2020, 6(50)eabc8096] PubMed: 33298440

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