GW4064

Le GW 4064 est un agoniste complet avec des valeurs de CE50 de 80 et 90 nM, respectivement, dans des cellules CV-1 transfectées avec des vecteurs d'expression de FXR de souris et d'humain et un gène rapporteur établi. Il n'y a aucune activité de ce composé sur d'autres récepteurs nucléaires, y compris le récepteur de l'acide rétinoïque, à des concentrations allant jusqu'à 1 μM. Ainsi, cette substance chimique est un agoniste de FXR puissant et sélectif non stéroïdien. [2]

L'analyse pharmacocinétique chez le rat montre que le GW 4064 possède une biodisponibilité orale de 10 % avec un t_1/2 = 3,5 h. Des rats Fisher sont traités avec ce composé par gavage oral. Après 7 jours, une diminution dose-dépendante des triglycérides sériques est observée chez les rats recevant cette substance chimique, avec une DE50 = 20 mg/kg. [2]

• Essai de transfection transitoire FXR

  Les cellules CV1 sont maintenues dans un milieu DMEM à haute teneur en glucose. Les cellules CV1 sont récoltées 72 heures avant la transfection et ensemencées dans un milieu DMEM-F12 sans rouge de phénol contenant 5 % de sérum bovin fœtal traité au charbon de bois/dextran et 2 mM de glutamine. Le jour de la transfection, les cellules CV1 sont récoltées dans un milieu DMEM-F12 sans rouge de phénol contenant 5 % de sérum bovin fœtal traité au charbon de bois/dextran et 2 mM de glutamine, comptées et ensemencées dans une fiole de T-175 cm² à une densité de 14 millions de cellules par fiole avant d'ajouter le mélange de transfection. Le mélange de transfection FuGENE® 6 contenant 0,55 μg de plasmide d'expression pFA-CMV-GAL4-human FXR LBD, 10,92 μg du plasmide rapporteur (UAS)-tk-Luciferase, 20,75 μg de pBluescript II KS+ et 3,82 μg d'un construit de co-activateur de récepteur stéroïdien humain (SRC-1) est incubé puis ajouté aux cellules CV1 pour une incubation pendant une nuit dans un incubateur. Les cellules CV1 transfectées sont récoltées dans un milieu DMEM-F12 sans rouge de phénol contenant 5 % de sérum bovin fœtal traité au charbon de bois/dextran et 2 mM de glutamine. Les cellules transfectées sont ajoutées à une concentration de 3750 cellules/puits dans des plaques à 384 puits contenant des ligands. L'expression de la luciférase est mesurée à l'aide du système d'essai Steady-Glo™Luciferase 24 heures après incubation avec le ligand. Ce composé est utilisé comme contrôle, et les données sont normalisées par rapport à ce composé en % de contrôle.

• Lignées cellulaires

  HepG2 cells

• Concentrations

  10 µM

• Temps dincubation

  2 h

• Méthode

  Cells were treated with indicated concentration of GW4064 for 2 h.

• Modèles animaux

  Fisher rats

• Posologies

  0-100 mg/kg

• Administration

  Orally, b.i.d.