GW9662

GW9662 se lie à la Cys(285) sur PPARgamma, qui est conservée parmi les trois PPAR. Ce composé agit comme un antagoniste de PPARgamma, ce qui est confirmé dans un essai d'inhibition de la différenciation des adipocytes. [1] Il prévient l'activation de PPARγ et inhibe la croissance des lignées cellulaires de tumeurs mammaires humaines (MCF7, MDA-MB-468, MDA-MB-231) avec une IC50 de 20 μM-30 μM, suggérant soit l'existence de propriétés agonistes de PPARγ de cette substance chimique, soit des mécanismes d'inhibition de la croissance indépendants de PPARγ. Un co-traitement avec ce composé (10 μM) entraîne un nombre de cellules viables statistiquement plus faible après 7 jours dans les cellules MDA-MB-231. [2] Les ligands de PPARγ1 pourraient supprimer la formation d'ostéoclastes induite par RANKL dans les cellules myéloïdes murines primaires (BMs) et RAW264.7. Fait important, la suppression par ces ligands est inversée de manière dose-dépendante avec cette substance chimique (2 μM). Il (2 μM) bloque la suppression de la formation d'ostéoclastes par l'IL-4 dans les BMs. Ce composé (1 μM) bloque l'activation de NF-κB par RANKL dans les cellules RAW264.7. [3] GW9662 (10 μM) inhibe l'adipogenèse induite par les hormones et les agonistes des préadipocytes primaires de patients atteints de maladie oculaire thyroïdienne. [4]

Un prétraitement avec du LPS (1 mg/kg i.p.) atténue significativement tous les marqueurs de lésion et de dysfonctionnement rénal causés par la lésion d'ischémie/reperfusion (I/R) chez les rats. Plus particulièrement, ce composé (1 mg/kg i.p.) abolit les effets protecteurs du LPS. [5]

• Essai de liaison

  Les domaines de liaison au ligand (LBD) des PPARα, PPARγ et PPARδ humains sont exprimés dans E. coli sous forme de protéines de fusion marquées par une polyhistidine. Les récepteurs sont immobilisés sur des billes SPA par addition du récepteur désiré (15 nM) à une suspension de billes SPA modifiées par la streptavidine (0,5 mg/mL) dans le tampon d'essai. Le mélange est laissé à l'équilibre pendant au moins 1 heure à température ambiante, et les billes sont centrifugées à 1×10³ g. Le surnageant est jeté, et les billes sont remises en suspension dans le volume original de tampon d'essai frais avec un mélange doux. La procédure de centrifugation/remise en suspension est répétée, et la suspension résultante de billes recouvertes de récepteur est utilisée immédiatement ou stockée à 4 ℃ pendant jusqu'à 1 semaine avant utilisation. [3H]GW2443 sont utilisés comme radioligands pour la détermination de la liaison compétitive à PPARα, PPARγ et PPARδ, respectivement. Sauf indication contraire, le tampon utilisé pour tous les essais est 50 mM HEPES (pH 7), 50 mM NaCl, 5 mM CHAPS, 0,1 mg/mL BSA et 10 mM DTT. Pour certaines expériences, le HEPES (pH 7) est remplacé par 50 mM Tris (pH 8).

• Lignées cellulaires

  MDA-MB-231 cells

• Concentrations

  10 μM

• Temps dincubation

  10 days

• Méthode

  MDA-MB-231 cells are seeded at a density of 1 × 10⁵ cells per 25 cm³ tissue culture flask. After 24 h (day 0), the growth medium is replaced with fresh medium containing GW9662 (10 μM) or both together. Control flasks receives 0.1% DMSO. Cells are harvested on days 0, 3, 5, 7, 10 for each treatment condition by trypsinisation, stained using trypan blue, and the total and viable number of cells per flask calculates using a haemocytometer.

• Modèles animaux

  male Wistar rats

• Posologies

  1 mg/kg

• Administration

  intraperitoneal injection