H2DCFDA (DCFH-DA)

N° de catalogueS9687 Lot :S968702

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Données techniques

Formule

C24H16Cl2O7
Poids moléculaire 487.29 Numéro CAS 4091-99-0
Solubilité (25°C)* In vitro DMSO 97 mg/mL (199.06 mM)
Ethanol 15 mg/mL (30.78 mM)
Water Insoluble
In vivo (Ajouter les solvants au produit individuellement et dans lordre.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
5%DMSO 40%PEG300 5%Tween80 50%ddH2O

Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.

 4.850mg/ml (9.95mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 97 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
Clear solution
5% DMSO 95% Corn oil

Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.

 0.800mg/ml (1.64mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 16 mg/ml clear DMSO stock solution to 950 μL of corn oil and mix evenly. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description H2DCFDA (DCFH-DA) est une sonde perméable aux cellules utilisée pour détecter la production intracellulaire d'espèces réactives de l'oxygène (ROS). Elle est dé-estérifiée intracellulairement et se transforme en 2′,7′-dichlorofluorescéine hautement fluorescente après oxydation. Ce composé est utilisé pour la quantification sensible et rapide des espèces réactives à l'oxygène en réponse au métabolisme oxydatif ; un essai sur microplaques pour détecter les produits oxydatifs dans les cellules phagocytaires, et un essai quantitatif de différenciation myéloïde en plusieurs puits (Ex/Em=488/525 nm).
Cibles
ROS
In vitro

1. H2DCFDA (DCFH-DA) est dissous dans du DMSO pour obtenir des solutions mères à 10 mM et dilué davantage avant utilisation.
2. Les cellules sont incubées avec 5 μM de ce composé dans du PBS dans l'obscurité pendant 30 min à 37°C, puis récoltées avec une solution de trypsine-EDTA à 0,05%, suspendues dans un nouveau milieu et immédiatement analysées par cytométrie de flux.
3. Parallèlement, si indiqué, utiliser une modification de la fluorescéine DCFDA insensible aux ROS comme contrôle positif. La procédure de coloration est la même que pour le H2DCFDA.
Émission (Em)=517 Excitation (Ex)=492 517

Protocole (de référence)

Test cellulaire :

[2]
  • Lignées cellulaires

    hCECs

  • Concentrations

    10 μM

  • Temps dincubation

    30 min

  • Méthode

    Intracellular ROS levels in hCECs are measured by incubating the cells with the redox-sensitive fluorescent dye H2DCFDA (DCFH-DA) (10 μM) at 37℃ for 30 minutes in the dark. The cells are then detached from the culture wells using 0.25% trypsin-EDTA and washed twice using ice-cold PBS. Flow cytometry measurements are performed three times for each treatment. Mean fluorescence intensity is quantified using software. Cells that had been incubated without this compound are used as negative control. The distribution of fluorescent dichlorofluorescein (DCF) on the cell monolayer is visualized and photographed using a fluorescence microscope.

Références

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26976009/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/30372737/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26976009/

Sellecks H2DCFDA (DCFH-DA) A été cité par 9 Publications

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Erianin inhibits the growth and metastasis through autophagy-dependent ferroptosis in KRASG13D colorectal cancer [ Free Radic Biol Med, 2023, 204:301-312] PubMed: 37217090
FLRT2 suppresses bladder cancer progression through inducing ferroptosis [ J Cell Mol Med, 2023, 10.1111/jcmm.17855] PubMed: 37480224
Reactive sulfur species disaggregate the SQSTM1/p62-based aggresome-like induced structures via the HSP70 induction and prevent parthanatos [ J Biol Chem, 2023, 299(6):104710] PubMed: 37060999
[A Novel Chinese Medicine Formula Inhibits Non-small Cell Lung Cancer by Triggering Oxidative Stress Dependent on Pentose Phosphate Pathway] [ Zhongguo Fei Ai Za Zhi, 2023, 10.3779/j.issn.1009-3419.2023.101.27] PubMed: 37985150
Elevated neutrophil extracellular traps by HBV-mediated S100A9-TLR4/RAGE-ROS cascade facilitate the growth and metastasis of hepatocellular carcinoma [ Cancer Commun (Lond), 2022, 10.1002/cac2.12388] PubMed: 36346061
S100A8-Mediated NLRP3 Inflammasome-Dependent Pyroptosis in Macrophages Facilitates Liver Fibrosis Progression [ Cells, 2022, 11(22)3579] PubMed: 36429008
The potential efficacy and mechanism of bendamustine in entra-nodal NK/T cell lymphoma [ Hematol Oncol, 2022, 10.1002/hon.3007] PubMed: 35439335

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