HS-173

HS-173 montre de puissants effets antiprolifératifs dans les cellules T47D, SK-BR3 et MCF7 avec une IC50 de 0,6, 1,5 et 7,8 μM, respectivement. [1] Ce composé provoque une suppression complète de la voie PI3K dans les lignées cellulaires cancéreuses (Hep3B et SkBr3). De plus, il induit l'apoptose cellulaire en affectant la distribution du cycle cellulaire et en activant les caspases, et bloque l'angiogenèse induite par le VEGF in vitro. [2]

HS-173 diminue la formation de vaisseaux sanguins chez la souris. [2] Ce composé atténue de manière significative le développement de la fibrose hépatique en bloquant la signalisation PI3K/Akt in vivo. [4]

• Test de la PI3-Kinase

  Le test PI3K est réalisé à l'aide du kit de test de kinase luminescent Kinase-Glo Max qui quantifie la quantité d'ADP produite par la réaction PI3K. En bref, une PI3K active (100 ng) est préincubée avec ce composé pendant 5 minutes dans un tampon de réaction de kinase (25 mM MOPS [pH 7,0], 5 mM MgCl₂ et 1 mM EGTA) et 10 μg de l-α-phosphatidylinositol (PI). Avant l'ajout de PI, il est soniqué avec un tampon de sonication (25 mM MOPS [pH 7,0], 1 mM EGTA) dans de l'eau pendant 20 minutes pour permettre la formation de micelles. Ensuite, la réaction est démarrée par l'ajout de 10 μM d'ATP et dure 180 minutes. Pour arrêter la réaction de kinase, le même volume de tampon Kinase-Glo Max est ajouté. Après 10 minutes, les plaques sont ensuite lues sur un lecteur de plaques GloMax pour la détection de la luminescence.

• Lignées cellulaires

  T47D, SK-BR3, MCF7 cells

• Concentrations

  ~50 μM

• Temps dincubation

  48 hours

• Méthode

  Cell viability is performed by a MTT assay. Briefly, T47D cells are plated in 96-well plates for 24 h. Then, the medium is removed and cells were treated with either DMSO as a control or various concentrations of inhibitors. The final concentration of DMSO in the medium was ≤0.1% (v/v). After the cells are incubated for 48 h, 20 μL MTT solution (5 mg/mL) is added to each well for another 4 h at 37 °C. The formazan crystals that formed are dissolved in DMSO (100 μL/well) by constant shaking for 5 min. The plate is then read on a microplate reader at 540 nm. Three replicate wells are used for each analysis. The median inhibitory concentration (IC50, defined as the drug concentration at which cell growth is inhibited by 50%) is assessed from the dose−response curves. To assess the effect of compounds on cell proliferation, T47D cells are cultured with this compound (0.1−100 μM) for 48 h before MTT analysis.

• Modèles animaux

  Male BALB/c mice with CCl4-induced liver fibrosis

• Posologies

  ~20 mg/kg

• Administration

  p.o.