ICG-001

ICG-001 n'a aucun effet sur le construit rapporteur apparenté, FOPFLASH, qui contient des sites TCF mutés. Après un traitement avec 25 μM de ce composé pendant 8 heures, les cellules SW480 réduisent les niveaux à l'état stable d'ARN et de protéines Survivine et Cycline D1, tous deux pouvant être régulés à la hausse par la β-caténine. Ce composé induit sélectivement l'apoptose dans les cellules transformées mais pas dans les cellules normales du côlon, et réduit la croissance in vitro des cellules de carcinome du côlon. [1] Il peut sauver phénotypiquement la différenciation neuronale induite par le facteur de croissance nerveuse (NGF) normal et la croissance des neurites dans les cellules mutantes de la préséniline-1, soulignant l'importance de la voie de signalisation TCF/β-caténine sur la croissance des neurites et la différenciation neuronale. [2] Une étude récente démontre que 5 μM de ce produit chimique inhibe l'EMT induite par la leptine, l'invasion et la formation de sphères tumorales dans les cellules MCF7. [3]

L'administration d'un analogue hydrosoluble de l'ICG-001 pendant 9 semaines réduit la formation de polypes du côlon et de l'intestin grêle de 42 %, aussi efficacement que l'anti-inflammatoire non stéroïdien, qui a constamment démontré son efficacité dans ce modèle. Aucune toxicité manifeste n'est détectée tout au long du traitement. Dans le modèle de xénogreffe de souris nues SW620 de régression tumorale, 150 mg/kg, i.v. de ce composé démontre une réduction spectaculaire du volume tumoral sur les 19 jours de traitement, sans mortalité ni perte de poids. [1] Ce produit chimique (5 mg/kg par jour) inhibe significativement la signalisation de la bêta-caténine et atténue la fibrose pulmonaire induite par la bléomycine chez la souris, tout en préservant simultanément l'épithélium. [4]

• Test de rapporteur DUAL-Luciférase

  Le système DUAL-Luciferase Reporter (DLR) Assay System offre un moyen efficace de réaliser des tests de double rapporteur. Dans l'essai DLR^TM, les activités des luciférases de luciole (Photinus pyralis) et de Renilla (Renilla reniformis, également connue sous le nom de plume de mer) sont mesurées séquentiellement à partir d'un seul échantillon. Le rapporteur luciférase de luciole est mesuré en premier en ajoutant le réactif de test de luciférase II (LAR II) pour générer un signal luminescent de type « lumière ». Après avoir quantifié la luminescence de la luciole, cette réaction est éteinte et la réaction de la luciférase de Renilla est initiée en ajoutant simultanément le réactif Stop & Glo® dans le même tube. Le réactif Stop & Glo® produit également un signal de type « lumière » de la luciférase de Renilla, qui diminue lentement au cours de la mesure. Dans le système DLR^TM Assay, les deux rapporteurs donnent des dosages linéaires avec des sensibilités subattomolaires (<10-18) et aucune activité endogène de l'un ou l'autre des rapporteurs dans les cellules hôtes expérimentales. De plus, le format intégré du DLR^TM Assay permet une quantification rapide des deux rapporteurs, soit dans les cellules transfectées, soit dans les réactions de transcription/traduction acellulaires.

• Lignées cellulaires

  Human colon carcinoma cell lines SW480, SW620, and HCT116, normal colonic epithelial cell line CCD-841Co

• Concentrations

  ~25 μM

• Temps dincubation

  24 hours

• Méthode

  1. Prior to starting the assay, prepare the Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent, and mix thoroughly. 2. For best results, empirical determination of the optimal cell number, apoptosis induction treatment and incubation period for the cell culture system may be necessary. 3. Use identical cell numbers and volumes for the assay and the negative control samples. 4. Do not mix Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent and samples by manual pipetting. Mixing in this manner is unnecessary and may create bubbles that interfere with fluorescence readings or cross-contaminate the samples. Gentle mixing may be performed using a plate shaker. 5. Total incubation time for the assay depends upon the amount of caspase- 3/7 present in the sample. 6. The Apo-ONE Caspase-3/7 Reagent is formulated to mediate cellular lysis and support optimal caspase-3/7 activity. In rare instances, the reagent does not affect complete lysis of cultured cells. In such cases, lysis is enhanced by a freeze-thaw cycle. For best results, freeze at -70 °C, then thaw at room temperature. After equilibration, mix to homogeneity and incubate until measurable fluorescence is achieved

• Modèles animaux

  C57BL/6 and nude mice tumor models

• Posologies

  20 mg/ kg

• Administration

  i.p.