KN-93 Phosphate

KN-93 inhibe la formation de dopamine dans les cellules PC12h en modulant le taux de réaction de la TH afin de réduire les niveaux de phosphorylation de la molécule TH médiés par le Ca(2+). [1] KN-93 inhibe la croissance des fibroblastes induite par le sérum avec une IC50 de 8 μM, et induit l'apoptose après un arrêt prolongé en phase G1. [2] KN-93 inhibe l'activité du récepteur des androgènes et induit la mort cellulaire indépendamment de p53 dans les cellules PCa. [3]

KN-93 (5 μg) améliore la dyskinésie induite par la lévodopa en abaissant l'expression de pGluR1S845 dans un modèle de rat de la maladie de Parkinson. [4] Chez les souris MRL/lpr Foxp3-GFP, KN-93 entraîne une induction significative des cellules Treg dans la rate, les ganglions lymphatiques périphériques et le sang périphérique, et diminue les lésions cutanées et rénales. [5]

• Mesure des activités de la CaMKII autophosphorylée/non autophosphorylée

  L'activité de CaMKII est mesurée en utilisant le syntideII comme substrat. La CaMKII purifiée est pré-incubée dans le mélange de dosage (35 mM Hepes-Na (pH 8,0), 10 mM MgCl₂, 0,5 μM CaM, 5 μM ATP, 1 mM CaCl₂ ou 1 mM EGTA, total 25 μL) à 30 °C pendant 2 minutes. Après cette pré-incubation, le mélange substrat protéique/ATP radioactif est ajouté au même tube à essai et la préparation est incubée pendant 5 minutes supplémentaires à 30 °C (condition de dosage finale ; 35 mM Hepes-Na (pH 8,0), 10 mM MgCl₂, 0,125 μM CaCl₂, 20 μM syntideII, 11,25 μM [γ-³²P] ATP, 10 % de DMSO et les concentrations indiquées de KN-93, supplémenté avec 0,25 mM CaCl₂ et 2 mM EGTA (pour les échantillons autophosphorylés) ou 0,25 mM EGTA et 2 mM CaCl₂ (pour les échantillons non autophosphorylés), total 100 μL). La réaction est arrêtée par l'ajout de 25 μL de TCA glacé à 100 % (p/v). Après centrifugation, 80 μL du surnageant sont appliqués sur du papier phosphocellulose. Les filtres sont ensuite lavés avec 75 mM H₃PO₄ pendant 15 min avec agitation continue. Après 4 cycles de lavage, la radioactivité retenue sur le papier filtre est quantifiée dans un compteur à scintillation liquide.

• Lignées cellulaires

  NIH 3T3 fibroblasts

• Concentrations

  ~24 μM

• Temps dincubation

  70 hours

• Méthode

  NIH 3T3 fibroblasts are cultured on polystyrene dishes in DMEM and fetal bovine serum, supplemented with penicillin/streptomycmn in a 5% CO2 humidified chamber at 37 癈. Cell growth is measured by using the MTT dye reduction method.

• Modèles animaux

  Sprague Dawley female rats

• Posologies

  ~5 μg

• Administration

  Intrastriatal administration