MK-5108

N° de catalogueS2770 Lot :S277001

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Données techniques

Formule

C22H21ClFN3O3S
Poids moléculaire 461.94 Numéro CAS 1010085-13-8
Solubilité (25°C)* In vitro DMSO 92 mg/mL (199.16 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Ajouter les solvants au produit individuellement et dans lordre.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description MK-5108 (VX-689) est un inhibiteur hautement sélectif de l'Aurora A avec une IC50 de 0,064 nM dans un test sans cellules et est 220 et 190 fois plus sélectif pour l'Aurora A que pour l'Aurora B/C, tandis qu'il inhibe TrkA avec moins de 100 fois de sélectivité. Ce composé induit l'Autophagy. Phase 1.
Cibles
Aurora A
(Cell-free assay)
0.064 nM
In vitro

Le MK-5108 inhibe l'activité d'Aurora-A de manière ATP-compétitive. Ce composé montre une sélectivité robuste contre les autres kinases de la famille, Aurora-B (220 fois) et Aurora-C (190 fois), dans l'essai biochimique. Il révèle également une sélectivité élevée pour Aurora-A par rapport aux autres protéines kinases. Le composé n'inhibe qu'une seule kinase (TrkA) avec une sélectivité <100 fois. Il pourrait être plus sélectif pour Aurora-A que le MLN8054. Conformément à l'induction de cellules pHH3-positives, ce produit chimique induit l'accumulation de cellules en phase G2-M. Il inhibe la prolifération des cellules tumorales, y compris HCC1143, AU565, MCF-7, HCC1806 et CAL85-1, avec une IC50 de 0,42 μM, 0,45 μM, 0,52 μM, 0,56μM et 0,74 μM, respectivement. Ce composé diminue la viabilité cellulaire de manière dose-dépendante dans les trois lignées cellulaires, y compris les cellules LEIO285, LEIO505 et SK-LSM1, avec une IC50 d'environ 100 nM. L'incubation avec celui-ci dans les cellules LEIO285 augmente la proportion de cellules en G2/M à 48 et 72 heures après le traitement. Le composé augmente significativement l'activité de la Caspase 3/7 par rapport aux cultures témoins traitées au DMSO aux deux points temporels. Dans les cellules LEIO505, il conduit à une accumulation plus importante de cellules en phases G2/M à 24 heures, mais pas à 48 heures ou 72 heures.  
In vivo

Le MK-5108 induit des cellules pHH3-positives à des doses de 16 mg/kg et 32 mg/kg. Les concentrations plasmatiques de ce composé à 8 mg/kg et 16 mg/kg sont de 1,7 μM et 4,4 μM, respectivement. Le traitement avec ce composé entraîne l'induction de pHH3 dans les tissus tumoraux et cutanés, qui commence à 2 heures et atteint un maximum à 4 heures. Les traitements chimiques à 15 mg/kg et 30 mg/kg entraînent une inhibition significative de la croissance tumorale avec un changement du volume tumoral moyen pour le groupe traité en pourcentage du changement moyen dans le groupe témoin (%T/C) de 10 % et −6 % au jour 11, et 17 % et 5 % au jour 18, respectivement. Il est bien toléré aux deux doses, avec une réduction minimale du poids corporel. Ce composé présente également une activité antitumorale significative grâce à un dosage intermittent chez des rats nus porteurs de tumeurs SW48 ; à 15 mg/kg et 45 mg/kg, il provoque une inhibition de la croissance tumorale dose-dépendante avec un %T/C de 35 % et 7 % au jour 10, et 58 % et 32 % au jour 27, respectivement.

Protocole (de référence)

Test kinase :

[1]
  • Tests de kinases biochimiques

    La protéine Aurora-A humaine recombinante à queue His est exprimée chez Escherichia coli et purifiée à l'aide d'une colonne HisTrap HP. Les protéines Aurora-B et Aurora-C humaines recombinantes purifiées sont achetées. Les expériences sont réalisées en quintuplicata dans des plaques à 96 puits. La réaction d'essai d'Aurora-A est menée en présence de 20 μM d'ATP, 25 μM de Tetra-Kemptide [RRR(GLRRASLG)4R-NH2], 1,0 μCi par puits de [γ-33P]-ATP, 0,1 ng par puits d'Aurora-A dans 50 mM de Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM de Mg(OAc)2 et 0,2 mM d'EDTA à 30 °C pendant 40 minutes. Pour étudier le mode d'inhibition de MK-5108 pour Aurora-A, les valeurs d'IC50 de ce composé sont déterminées en présence de différentes concentrations d'ATP. Ensuite, la valeur d'IC50 est tracée en fonction de la concentration d'ATP pour analyser l'effet de la concentration d'ATP sur la valeur d'IC50 de ce produit chimique. La réaction d'essai d'Aurora-B est menée en présence de 15 μM d'ATP, 100 μM de Kemptide (GLRRASLG-NH2), 1,0 μCi par puits de [γ-33P]-ATP, 5,0 ng par puits d'Aurora-B dans 50 mM de Tris-HCl (pH 7,4), 15 mM de Mg(OAc)2 et 0,2 mM d'EDTA à 30 °C pendant 20 minutes. La réaction d'essai d'Aurora-C est menée en présence de 40 μM d'ATP, 100 μM de Kemptide, 1,0 μCi par puits de [γ-33P]-ATP, 15 ng par puits d'Aurora-C dans 10 mM de MOPS-NaOH (pH 7,4), 5 mM de Mg(OAc)2, 1 mM de (±) DTT et 1 mM d'EGTA à 30 °C pendant 20 minutes. Une fois les réactions de kinase terminées par l'ajout de 2,0 % d'acide phosphorique, le Tetra-Kemptide ou le Kemptide est piégé sur la plaque MultiScreen-PH. Les puits sont lavés cinq fois avec 0,64 % d'acide phosphorique puis surveillés pour la radioactivité dans un compteur à scintillation liquide.
Test cellulaire :

[1]
  • Lignées cellulaires

    HeLa-S3 cells

  • Concentrations

    0 μM -1 μM

  • Temps dincubation

    12 hours

  • Méthode

    HeLa-S3 cells are synchronized at the G1-S phase boundary by double thymidine block with 2 mM thymidine. Cells are washed and seeded to 96-well cell culture plates. After 4 hours, an equal volume of medium containing MK-5108 is added to each well. Nocodazole (300 nM) is used as a 100% control. The cells are fixed overnight with cold methanol 12 hours after seeding. Then, the cells are stained with rabbit anti-phospho-histone H3 Ser28 antibody and then with anti-rabbit IgG-Cy5. Total nuclei are stained with 10 mg/mL 4′,6-diamidino-2-phenylindole. Immunostained images are acquired using the IN Cell Analyzer1000 with ×10 objective lens. After acquisition of images, data are analyzed. The %pHH3-positive index is determined by measuring the %pHH3-positive cell counts per total nuclei counts for each sample, then by normalizing with respect to nocodazole-treated cells.
Étude animale :

[1]
  • Modèles animaux

    SCID mice bearing HCT116 tumors

  • Posologies

    30 mg/kg

  • Administration

    Oral administration

Références

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20053775/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22535157/

Validation du produit par le client

<p>MK-5108 specifically inhibits AURKA and delays mitotic exit. (a) MK-5108 inhibits AURKA but not AURKB. Mitotic HeLa cells were obtained by exposure to nocodazole for 16 h followed by mechanical shake off. The cells were incubated with the indicated concentrations of MK-5108 for 2 h. Nocodazole and MG132 were included to prevent mitotic exit. Lysates were then prepared and activated phospho-AURKAThr288 and AURKBThr232 were detected with immunoblotting. Uniform loading was confirmed by immunoblotting for actin. (b) MK-5108 prevents activation of AURKA but not AURKB. HeLa cells were incubated with the indicated concentrations of MK-5108 for 8 h. Nocodazole was then added for another 6 h to trap any cells that entered mitosis. Mitotic cells were isolated by mechanical shake off. Lysates were prepared and analyzed with immunoblotting. Actin analysis was included to assess loading and transfer. (c) MK-5108 induces a G 2 /M delay. HeLa cells were treated with the indicated concentrations of MK-5108 for 24 h. DNA contents were analyzed with flow cytometry.</p>

Données de [ Oncogene , 2014 , 33, 3550-60 ]

Effect of a selective small molecule inhibitor of AURKA on MYCN protein levels and cell viability. Western blot for MYCN protein in KNS42 cells after exposure to 0.1, 0.5 and 2.5 uM VX-689 (triangle). GAPDH is used as a loading control.

Données de [ Cancer Discov , 2013 , 10.1158/2159-8290.CD-12-0426 ]

P53 expression in the 14G2a mAb-treated IMR-32 cell line and after combinatorial treatment with MK-5108 inhibitor. P53 protein content was measured in whole cell-WCE (A), cytoplasmic-CE (C) and nuclear-NE (E) extracts at 2, 6, 24 and 48 h after 14G2a addition (40 ug/ml) into culture media of IMR-32 cells, and normalized to GAPDH levels (for WCE and CE), or TBP (for NE). Mean values of three separate experiments (盨EM) obtained for the 14G2a mAb-treated cells are shown as empty bars, and calculated versus control value, set as 1 (black baseline). ANOVA shows no statistically significant changes of P53 level in time in IMR-32 WCE [F(3, 9) = 1.35, p = 0.3181]. Statistically significant changes of P53 level in time were found in CE [F(3, 6) = 53.76, p = 0.0001], and in NE [F(3, 6) = 63.17, p = 0.0001], as compared to 2 h time point. P53 expression level was measured in whole cell-WCE (B), cytoplasmic-CE (D) and nuclear-NE (F) extracts at 2 and 24 h after the 14G2a mAb treatment alone (white bars with black stripes) or in combination with MK-5108 inhibitor (black bars with white stripes), and normalized to GAPDH levels (for WCE and CE), or TBP (for NE). Below each chart representative immunoblottings are presented; C-control cells; mAb-the 14G2a mAb-treated cells; I + mAb-MK-5108 inhibitor and the mAb-treated cells. P-values for t-test were as follow: p < 0.05 (*), p < 0.01 (**), p < 0.001 (***).

Données de [ Cancer Lett , 2013 , 341(2), 248-64 ]

<p>HeLa cells were first synchronized to G1/S boundary with double thymidine<br />procedure.  After the release of the secondary thymidine, the indicated<br />concentrations of VX-689 were added to the cells for 8 hrs.  The cells were<br />then treated with nocodazole to trap the mitotic cells for 4 hrs and subse-<br />quently harvested by the mechanical shake off.  Cell free extracts were<br />prepared and further analyzed by SDS-PAGE and western blotting with the<br />indicated antibodies.  The disappearance of phospho-aurora A but not<br />phospho-aurora B strongly suggested that VX-689 is a highly selective<br />aurora A kinase inhibitor.</p>

, , Ken Ma Hong Kong University of Science & Technology

Sellecks MK-5108 A été cité par 41 Publications

Establishment, characterization, and biobanking of 36 pancreatic cancer organoids: prediction of metastasis in resectable pancreatic cancer [ Cell Oncol (Dordr), 2024, 10.1007/s13402-024-00939-5] PubMed: 38619751
Inhibition of epigenetic and cell cycle-related targets in glioblastoma cell lines reveals that onametostat reduces proliferation and viability in both normoxic and hypoxic conditions [ Sci Rep, 2024, 14(1):4303] PubMed: 38383756
Exploiting ulnerabilities induced b recurrent mutations in chondrosarcoma and giant cell tumour of bone: therapeutic targeting of the altered epigenome and be [ Leiden University The Netherlands, 2023, ] PubMed: None
Spatially distinct inputs modulate the amount of active Mitotic-phase GAP to locally restrict RhoA signaling for successful cell division [ bioRxiv, 2023, 10.1101/2023.08.08.552464] PubMed: None
Revisiting the Resazurin-Based Sensing of Cellular Viability: Widening the Application Horizon [ Biosensors (Basel), 2022, 12(4)196] PubMed: 35448256
Culture and multiomic analysis of lung cancer patient-derived pleural effusions revealed distinct druggable molecular types [ Sci Rep, 2022, 12(1):6345] PubMed: 35428753
選択的オーロラキナーゼ A 阻害剤 TAS-119 を用いたオーロラキナーゼ A 阻害剤の薬剤感受性マーカーの探索 [ , 2022, ] PubMed: none
Targeting Aurora B kinase prevents and overcomes resistance to EGFR inhibitors in lung cancer by enhancing BIM- and PUMA-mediated apoptosis [ Cancer Cell, 2021, S1535-6108(21)00383-4] PubMed: 34388376
Multifocal Organoid Capturing of Colon Cancer Reveals Pervasive Intratumoral Heterogenous Drug Responses [ Adv Sci (Weinh), 2021, e2103360] PubMed: 34918496
Size-Selective VAILase Proteolysis Provides Dynamic Insights into Protein Structures [ Anal Chem, 2021, 93(30):10653-10660] PubMed: 34291915

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