Mocetinostat (MGCD0103)

Le Mocetinostat (MGCD0103) inhibe seulement un sous-ensemble des neuf HDAC recombinantes humaines, y compris HDAC1, HDAC2, HDAC3 et HDAC11 à des concentrations nanomolaires ou micromolaires faibles, de manière dose-dépendante. Il révèle l'activité inhibitrice la plus puissante contre les enzymes HDAC1 et HDAC2 humaines in vitro, et n'inhibe pas les HDAC de classe II. Le groupe amino exocyclique de ce composé est nécessaire à l'activité inhibitrice de l'enzyme car l'activité inhibitrice d'HDAC contre HDAC1 et HDAC2 est complètement abolie avec l'analogue désamino. Son activité inhibitrice atteint le plateau maximal à 6 μM, et le pool d'enzymes maximal inhibable affecté par le MGCD0103 représente 75 % de l'activité enzymatique totale dans les cellules HCT116, tandis que le NVP-LAQ824 inhibe presque 100 % de celle-ci dans ces cellules. Dans les cellules A549, il présente également une inhibition dose-dépendante de l'activité HDAC dans les cellules entières. [1]

Le Mocetinostat (MGCD0103) inhibe significativement la croissance des xénogreffes tumorales humaines chez les souris nues et l'activité antitumorale est corrélée à l'induction de l'acétylation des histones dans les tumeurs. L'administration P.O. de ce composé (sel de 2HBr) diminue significativement la croissance des tumeurs A549 avancées implantées chez les souris nues de manière dose-dépendante après 13 jours d'administration quotidienne. Il (170 mg/kg pour le sel de 2HBr, correspondant à 120 mg/kg de base libre) bloque significativement la croissance des tumeurs par rapport au traitement par véhicule seul sans changement de poids corporel. De plus, il ne réduit pas le nombre de globules blancs et est bien toléré. Le composé est également actif par voie orale dans de nombreux autres modèles de xénogreffes tumorales humaines, y compris le CPNPC H1437. À 80 mg/kg (base libre), il bloque presque complètement la croissance des tumeurs H1437 après 13 jours d'administration quotidienne p.o. sans réduction du poids corporel chez les animaux. [1] Il réduit la pression artérielle pulmonaire de manière plus spectaculaire. De plus, ce composé améliore le temps d'accélération de l'artère pulmonaire et réduit l'encoche systolique de l'enveloppe du flux de l'artère pulmonaire, ce qui suggère un impact positif de l'inhibiteur HDAC sur le remodelage et la rigidification vasculaire pulmonaire. [2]

• Essai enzymatique HDAC in vitro

  Le dosage enzymatique de la désacétylase est basé sur un dosage homogène par libération de fluorescence. Les enzymes HDAC recombinantes purifiées sont incubées avec Mocetinostat (MGCD0103) dilué à diverses concentrations pendant 10 minutes dans un tampon de dosage [25 mM HEPES (pH 8.0), 137 mM NaCl, 1 mM MgCl₂, 2.7 mM KCl] à température ambiante. Le substrat Boc-Lys(ε-Ac)-AMC est ajouté à la réaction pour une incubation ultérieure à 37 °C. La concentration du substrat et le temps d'incubation varient pour les différents isotypes des enzymes HDAC. Une incubation de 20 minutes avec la trypsine à température ambiante permet la libération du fluorophore du substrat désacétylé. Le signal fluorescent est détecté par fluoromètre à une excitation de 360 nm, une émission de 470 nm et une coupure à 435 nm.

• Lignées cellulaires

  Human mammary epithelial cells (HMEC), human foreskin fibroblasts (MRHF) cells

• Concentrations

  0-60 μM

• Temps dincubation

  72 hours

• Méthode

  Human mammary epithelial cells (HMEC) and human foreskin fibroblasts (MRHF) cells in 96-well plates are incubated with Mocetinostat (MGCD0103) at various concentrations for 72 hours at 37 °C in 5% CO₂. MTT is added at a final concentration of 0.5 mg/ml and incubated with the cells for 4 hours before an equal volume of solubilization buffer is added. After overnight incubation, solubilized dye is quantified by reading at 570 nm using a reference at 630 nm. Absorbance values are converted to cell numbers according to a standard growth curve of the relevant cell line. The concentration which reduces cell numbers to 50% relative to DMSO-treated cells is determined as MTT IC5

• Modèles animaux

  Female CD-1 nude mice bearing H1437 tumors

• Posologies

  80 mg/kg

• Administration

  Administered via p.o.