Fiche technique

Description biologique

Spécificité	Monocyte + Macrophage Antibody [E17C4] détecte les niveaux endogènes de l'antigène total Monocyte + Macrophage. Cet anticorps reconnaît un antigène intracellulaire des macrophages et monocytes de souris. Il réagit fortement avec les macrophages des organes lymphoïdes chez toutes les souches de souris.
Contexte	Les monocytes et les macrophages sont des composants essentiels du système immunitaire inné, jouant un rôle central dans l'initiation et la coordination des réponses inflammatoires. Au-delà de la production de médiateurs inflammatoires et de la formation de l'immunité innée et adaptative, ils sont également cruciaux pour résoudre l'inflammation et restaurer l'homéostasie tissulaire. La dérégulation de leur fonction est donc une caractéristique commune dans la pathogenèse des infections chroniques, des maladies auto-immunes et des maladies inflammatoires stériles graves. Les monocytes, qui représentent 5 à 10 % des leucocytes circulants, sont des cellules mononucléaires dérivées de la moelle osseuse avec une courte durée de vie de 1 à 3 jours. Dans des conditions stables, ils soutiennent l'homéostasie et conservent la capacité de se différencier en macrophages tissulaires. Pendant l'inflammation, les monocytes sont activement recrutés vers les sites affectés, où ils se différencient en macrophages inflammatoires ou en cellules dendritiques. Les macrophages sont distribués dans tous les tissus du corps et présentent une hétérogénéité fonctionnelle remarquable. Ils sont indispensables au développement tissulaire, à la surveillance immunitaire et au maintien de l'homéostasie locale. De nombreuses populations de macrophages sont établies pendant l'embryogenèse, provenant du sac vitellin ou des progéniteurs hépatiques fœtaux, et peuvent persister indépendamment du réapprovisionnement en monocytes dans des conditions normales. En revanche, les macrophages des tissus tels que la peau, le cœur et l'intestin sont initialement ensemencés par des progéniteurs embryonnaires mais sont rapidement remplacés après la naissance par des monocytes dérivés de cellules souches hématopoïétiques. Il est important de noter que les macrophages résidents des tissus possèdent à la fois une capacité proliférative et un potentiel d'auto-renouvellement. L'activation et la polarisation des monocytes et des macrophages sont déclenchées par leur reconnaissance de motifs moléculaires associés aux agents pathogènes ou aux dommages (PAMPs et DAMPs) via des récepteurs de reconnaissance de motifs (PRRs), ce qui leur permet d'adapter leurs réponses à une grande variété de signaux physiologiques et pathologiques.

Spécificité

Monocyte + Macrophage Antibody [E17C4] détecte les niveaux endogènes de l'antigène total Monocyte + Macrophage. Cet anticorps reconnaît un antigène intracellulaire des macrophages et monocytes de souris. Il réagit fortement avec les macrophages des organes lymphoïdes chez toutes les souches de souris.

Contexte

Les monocytes et les macrophages sont des composants essentiels du système immunitaire inné, jouant un rôle central dans l'initiation et la coordination des réponses inflammatoires. Au-delà de la production de médiateurs inflammatoires et de la formation de l'immunité innée et adaptative, ils sont également cruciaux pour résoudre l'inflammation et restaurer l'homéostasie tissulaire. La dérégulation de leur fonction est donc une caractéristique commune dans la pathogenèse des infections chroniques, des maladies auto-immunes et des maladies inflammatoires stériles graves. Les monocytes, qui représentent 5 à 10 % des leucocytes circulants, sont des cellules mononucléaires dérivées de la moelle osseuse avec une courte durée de vie de 1 à 3 jours. Dans des conditions stables, ils soutiennent l'homéostasie et conservent la capacité de se différencier en macrophages tissulaires. Pendant l'inflammation, les monocytes sont activement recrutés vers les sites affectés, où ils se différencient en macrophages inflammatoires ou en cellules dendritiques. Les macrophages sont distribués dans tous les tissus du corps et présentent une hétérogénéité fonctionnelle remarquable. Ils sont indispensables au développement tissulaire, à la surveillance immunitaire et au maintien de l'homéostasie locale. De nombreuses populations de macrophages sont établies pendant l'embryogenèse, provenant du sac vitellin ou des progéniteurs hépatiques fœtaux, et peuvent persister indépendamment du réapprovisionnement en monocytes dans des conditions normales. En revanche, les macrophages des tissus tels que la peau, le cœur et l'intestin sont initialement ensemencés par des progéniteurs embryonnaires mais sont rapidement remplacés après la naissance par des monocytes dérivés de cellules souches hématopoïétiques. Il est important de noter que les macrophages résidents des tissus possèdent à la fois une capacité proliférative et un potentiel d'auto-renouvellement. L'activation et la polarisation des monocytes et des macrophages sont déclenchées par leur reconnaissance de motifs moléculaires associés aux agents pathogènes ou aux dommages (PAMPs et DAMPs) via des récepteurs de reconnaissance de motifs (PRRs), ce qui leur permet d'adapter leurs réponses à une grande variété de signaux physiologiques et pathologiques.

Informations dutilisation

Application

IHC, FCM

Dilution

Réactivité

Mouse

Source

Rat Monoclonal Antibody

MW

Tampon de stockage

PBS, pH 7.2+50% Glycerol+0.05% BSA+0.01% NaN3

Stockage
(À partir de la date de réception)

-20°C (avoid freeze-thaw cycles), 2 years

Méthodes expérimentales
IHC	Experimental Protocol： Deparaffinization/Rehydration 1. Deparaffinize/hydrate sections: 2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each. 3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each. 4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each. 5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each. 6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min. Staining 1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each. 2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min. 3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 4. Wash sections in wash buffer for 5 min. 5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature. 6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C. 7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each. 8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature. 9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each. 10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use. 11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity. 12. Immerse slides in dH2O. 13. If desired, counterstain sections with hematoxylin. 14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each. 15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each. 16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

Méthodes expérimentales

IHC

Experimental Protocol：

Deparaffinization/Rehydration

1. Deparaffinize/hydrate sections:

2. Incubate sections in three washes of xylene for 5 min each.

3. Incubate sections in two washes of 100% ethanol for 10 min each.

4. Incubate sections in two washes of 95% ethanol for 10 min each.

5. Wash sections two times in dH2O for 5 min each.

6.Antigen retrieval: For Citrate: Heat slides in a microwave submersed in 1X citrate unmasking solution until boiling is initiated; continue with 10 min at a sub-boiling temperature (95°-98°C). Cool slides on bench top for 30 min.

Staining

1. Wash sections in dH2O three times for 5 min each.

2. Incubate sections in 3% hydrogen peroxide for 10 min.

3. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

4. Wash sections in wash buffer for 5 min.

5. Block each section with 100–400 µl of blocking solution for 1 hr at room temperature.

6. Remove blocking solution and add 100–400 µl primary antibody diluent in to each section. Incubate overnight at 4°C.

7. Remove antibody solution and wash sections with wash buffer three times for 5 min each.

8. Cover section with 1–3 drops HRPas needed. Incubate in a humidified chamber for 30 min at room temperature.

9. Wash sections three times with wash buffer for 5 min each.

10. Add DAB Chromogen Concentrate to DAB Diluent and mix well before use.

11. Apply 100–400 µl DAB to each section and monitor closely. 1–10 min generally provides an acceptable staining intensity.

12. Immerse slides in dH2O.

13. If desired, counterstain sections with hematoxylin.

14. Wash sections in dH2O two times for 5 min each.

15. Dehydrate sections: Incubate sections in 95% ethanol two times for 10 sec each; Repeat in 100% ethanol, incubating sections two times for 10 sec each; Repeat in xylene, incubating sections two times for 10 sec each.

16. Mount sections with coverslips and mounting medium.

Références

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35741108/

Données dapplication

IHC

Validé par Selleck

Immunohistochemical analysis of formalin fixed paraffin embedded mouse carotid artery tissue with F3741 at 1:100 dilution.