NSC 23766 Trihydrochloride

NSC23766 est identifié pour s'insérer dans une rainure de surface de Rac1 connue pour être critique pour la spécification des GEF. NSC23766 inhibe efficacement la liaison et l'activation de Rac1 par les GEF spécifiques de Rac Trio ou Tiam1 de manière dose-dépendante sans interférer avec la liaison ou l'activation de Cdc42 ou RhoA étroitement apparentées par leurs GEF respectifs ou avec l'interaction de Rac1 avec BcrGAP ou l'effecteur PAK1. [1]

NSC 23766 est actif dans la régulation des fonctions de la Rac GTPase sur le cytosquelette et de nombreuses fonctions cellulaires, y compris le Cell Cycle, la croissance cellulaire, l'adhésion, la migration et la transcription génique. NSC 23766 (50 μM) bloque puissamment l'activation de Rac1 induite par le sérum ou le facteur de croissance dérivé des plaquettes et la formation de lamellipodes sans affecter l'activité de Cdc42 ou RhoA endogènes dans les cellules NIH 3T3. NSC 23766 réduit la croissance des cellules NIH 3T3 stimulée par Trio ou Tiam1, mais pas par Vav, Lbc, Intersectin, ou un mutant constitutif actif de Rac1, et supprime la transformation cellulaire induite par Trio, Tiam1 ou Ras. NSC23766 inhibe de manière dose-dépendante la prolifération des cellules PC-3 et la croissance indépendante de l'ancrage. 25 μM NSC23766 inhibe l'invasion des cellules PC-3 à travers le Matrigel de 85 %. [1] 50 μM NSC 23766 inhibe l'activation induite par la thrombine de Rac1 et Rac2 dans les plaquettes humaines, ainsi que l'agrégation plaquettaire. [2]

NSC23766 prévient la production d'Aβ40 et Aβ42 dans les cellules swAPP-HEK293 sans affecter Notch et sAPPα. NSC23766 prévient l'activité γ-sécrétase dans la cellule, mais n'agit pas comme un inhibiteur direct de la γ-sécrétase. NSC23766 réduit de manière dose-dépendante les niveaux d'Aβ40 sécrétés et intracellulaires avec une IC50 de 48,94 μM. 50 μM NSC 23766 inhibe la libération d'Aβ42 de 57,97 %. [3]

NSC23766 régule l'expression de l'oxyde nitrique synthase endothéliale et la fonction endothéliale. 100 μM NSC23766 réprime l'activité du promoteur de l'eNOS de 60 % dans les CE aortiques bovines et de 30 % à 35 % dans les cellules bEND.3. L'inhibition de Rac1 avec NSC23766 déstabilise l'ARNm de l'eNOS et raccourcit sa demi-vie à 17 heures. NSC23766 atténue de manière dose-dépendante la relaxation des anneaux aortiques de souris de type sauvage induite par l'ACh. [4]

NSC23766 inhibe la croissance cellulaire et induit l'apoptose. NSC23766 diminue la viabilité des cellules MDA-MB-468 et MDA-MB-231 de manière dose-dépendante avec une IC50 d'environ 10 μM, ce qui n'est pas corrélé au statut du récepteur d'œstrogènes (ER), du récepteur de progestérone (PR), de Her2 et de la mutation p53. NSC23766 a peu d'effet sur la survie des cellules épithéliales mammaires normales MCF12A. Après 24 heures d'exposition à NSC 23766, les cellules MDA-MB-231 montrent une augmentation de 41 % à 65 % en phase G1 et une diminution concomitante des phases S et G2-M. 100 μM NSC23766 induit une augmentation de six fois des MDA-MB-468 apoptotiques. L'inhibition de NSC23766 sur l'arrêt du Cell Cycle ou l'apoptose dans les cellules cancéreuses du sein est médiatisée par la régulation négative de la cycline D1, de la survivine et de l'inhibiteur de l'apoptose lié à l'X. [5]

NSC23766 induit la mobilisation des cellules souches/progénitrices hématopoïétiques. L'administration intrapéritonéale de NSC23766 (2,5 mg/kg) à la souche de souris C57Bl/6 « faiblement mobilisatrice » entraîne une augmentation de deux fois des cellules souches/progénitrices hématopoïétiques circulantes 6 heures après l'injection. [2]

NSC23766 atténue les lésions pulmonaires aiguës induites par les lipopolysaccharides chez les souris. Le traitement avec NSC23766 à 1 ou 3 mg/kg réduit non seulement l'infiltration des cellules inflammatoires et les activités de la MPO, mais inhibe également l'expression de l'ARNm des médiateurs pro-inflammatoires, le facteur de nécrose tumorale-α et l'interleukine-1β. NSC23766 réduit également l'accumulation d'Evans Blue et d'albumine dans les poumons soumis aux LPS. [6]

• Dosage d'activité de Rho GTPase

  Les cellules sont cultivées en phase logarithmique dans une boîte de 10 cm, et sont privées de sérum dans un milieu à 0,5 % de sérum ou autrement indiqué pendant 24 h avant la lyse dans un tampon contenant 20 mM Tris HCl (pH 7,6), 100 mM NaCl, 10 mM MgCl₂, 1 % Nonidet P-40, 10 % glycérol et un mélange d'inhibiteurs de protéase 1×. Les lysats sont clarifiés, les concentrations de protéines sont normalisées, et le Rac1 lié au GTP dans les lysats est mesuré par un essai de pull-down du domaine effecteur. Pour l'essai de pull-down His6-PAK1 PBD, les lysats cellulaires sont incubés avec le domaine His6-PAK1 PBD immobilisé sur Ni2+-agarose (~1 μg chacun) purifié d'E. coli pendant 30 min. Les co-précipités de Ni2+-agarose sont lavés deux fois dans le tampon de lavage et analysés par immunobuvardage avec un anticorps monoclonal anti-Rac1.

• Lignées cellulaires

  Human breast cancer cells MDA-MB-468

• Concentrations

  0-100 μM

• Temps dincubation

  2 days

• Méthode

  Cells (1.5 × 10⁴/mL) are seeded in each well of 96-well tissue culture plates with 200 μL of medium. After 24 hours of plating, the medium is replaced with 200 μL of fresh medium containing NSC23766 at the indicated concentrations. At the end of the treatment period 20 μL of MTS solution are added to each well and incubated at 37 ℃ for 2 hours. Absorbance at 490 nm is read on a 96-well plate reader.

• Modèles animaux

  Male ICR mic

• Posologies

  1 or 3 mg/kg

• Administration

  i.p.