Obinutuzumab (anti-CD20)

N° de catalogueA2023        Batch: A202301

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Données techniques

Numéro CAS 949142-50-1
Formule PBS buffer, pH 7.2
Isotype Human IgG1 isotype control
Source Humanized (from mouse)
Stockage
(À partir de la date de réception)		 Store the undiluted solution at 4°C in the dark to avoid freeze-thaw cycles
Pureté 99.65%
Concentration en protéines : 5 mg/ml
Niveau dendotoxines ≤1 EU/mg

Activité biologique

Description Obinutuzumab (anti-CD20) (Gazyva, GA101, Gazyvaro, Afutuzumab) est un nouvel anticorps monoclonal anti-CD20 humanisé, de type II, glyco-ingénierie, qui a été développé pour la leucémie lymphoïde et le lymphome d'origine à cellules B. MW : 146,1 kD.
In vitro

GA101 est le premier anticorps IgG1 humanisé de type II, conçu par ingénierie Fc, dirigé contre le CD20. Par rapport au rituximab, le GA101 présente une cytotoxicité directe et médiée par les cellules effectrices immunitaires accrue, et manifeste une activité supérieure dans les essais cellulaires et les essais de déplétion des lymphocytes B dans le sang total.
In vivo

Dans les modèles de xénogreffes de lymphome humain, le GA101 présente une activité antitumorale supérieure, entraînant l'induction d'une rémission tumorale complète et une augmentation de la survie globale. Chez les primates non humains, le GA101 démontre une activité de déplétion des lymphocytes B supérieure dans les tissus lymphoïdes, y compris les ganglions lymphatiques et la rate.

Protocole (pour référence uniquement)

Test cellulaire :

  • Objectif: Essai FACS Annexine V/PI
    Cellules: Lignées cellulaires de LNH
    Concentrations: 10 μg/mL
    Temps d'incubation: 36 h
    Méthode: Pour la stimulation de CD40 des cellules hCD20 de souris transgéniques, les globules rouges (GR) sont éliminés par lyse hypotonique à l'ammonium-chlorure-potassium (ACK), et les lymphocytes B spléniques intacts sont purifiés par déplétion des cellules non-B médiée par anti-CD43 (MACS). Les lymphocytes B sont incubés dans un milieu RPMI 1640 complet conditionné contenant 10 % de sérum de veau fœtal pendant 2 heures (avec ou sans stimulation mitogène de 10 μg/mL) et des anticorps anti-CD40 ou anti-IgM Fab2. Ceci est suivi par 36 heures de stimulation anti-CD20 (GA101 ou rituximab 10 μg/mL). Comme contrôles positifs pour l'induction de la mort cellulaire, les agents suivants sont utilisés : 100nM de staurosporine pour l'apoptose médiée par les mitochondries, ou 1 μg/mL d'anti-CD95 Fas pour l'induction extrinsèque de l'apoptose.
    Référence: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

    Obinutuzumab peut s'appliquer aux souris humanisées (ex:souris SCID beige), au sang périphérique et à d'autres essais connexes (Pour référence seulement)
Étude animale :

  • Objectif: Taux de contrôle tumoral (TCR) et inhibition de la croissance tumorale (TGI)
    Modèles animaux: Souris SCID beige femelles âgées de 4 à 8 semaines
    Formulation: --
    Dosages: 30 mg/kg
    Administration: i.p.
    Référence: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24304419/

    Objectif: Études de xénogreffes de lymphome non hodgkinien chez des souris SCID beige
    Modèles animaux: Souris SCID beige femelles âgées de 4 à 5 semaines
    Formulation: --
    Dosages: 10 mg/kg, 30 mg/kg
    Administration: i.p.
    Référence: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

    Obinutuzumab peut être appliqué aux souris humanisées (par exemple : souris SCID beige), au sang périphérique et à d'autres essais connexes (Uniquement pour référence)
Références
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28004361/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24304419/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20194898/

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