Onvansertib (NMS-1286937, NMS-P937)

Onvansertib (NMS-1286937, NMS-P937) montre une activité antiproliférative à large spectre contre différentes lignées cellulaires de tumeurs solides, de leucémies et de lymphomes. Il provoque puissamment un arrêt du cycle cellulaire mitotique suivi d'une apoptose dans les cellules A2780. [2]

Onvansertib (NMS-1286937, NMS-P937) montre une inhibition significative de la croissance tumorale chez des souris xénogreffées avec des cellules d'adénocarcinome colorectal humain HCT116 à 90 mg/kg/j i.v. ou p.o. [1]

Chez des souris porteuses de xénogreffes de tumeurs HT29, Colo205 colorectales ou A2780 ovariennes, il inhibe la croissance tumorale des xénogreffes. De plus, ce composé, en combinaison avec des médicaments cytotoxiques approuvés, provoque une régression tumorale améliorée et prolonge la survie des animaux. [2]

• Profil de kinase

  L'activité inhibitrice d'Onvansertib (NMS-1286937, NMS-P937) et la puissance des composés sélectionnés sont déterminées à l'aide d'un dosage de transphosphorylation. Des substrats peptidiques ou protéiques spécifiques sont transphosphorylés par leur sérine-thréonine ou tyrosine kinase spécifique, en présence d'ATP tracé avec ³³P-γ-ATP, dans des conditions de tampon et de cofacteurs optimisées. À la fin de la réaction de phosphorylation, plus de 98 % de l'ATP non marqué et de l'ATP radioactif sont capturés par l'ajout d'un excès de résine échangeuse d'ions Dowex ; la résine se dépose ensuite au fond de la plaque de réaction par gravité. Le surnageant, contenant le substrat phosphorylé, est ensuite prélevé et transféré dans une plaque de comptage, puis évalué par comptage b. L'évaluation de la puissance inhibitrice pour toutes les kinases testées a été réalisée à 25 °C en utilisant un dosage à point final de 60 min où les concentrations d'ATP et de substrats sont maintenues égales à 2 x αKm et saturées (>5 x αKm), respectivement.

• Lignées cellulaires

  137 solid tumor cell lines, and 43 cell lines derived from leukemias and lymphomas

• Concentrations

  ~10 μM

• Temps dincubation

  72 hours

• Méthode

  Cells are seeded into 96- or 384-well plates at densities ranging from 10,000 to 30,000/cm2 for adherent and 100,000/mL for nonadherent cells in appropriate medium supplemented with 10% fetal calf serum. After 24 hours, cells were treated in duplicate with serial dilutions of Onvansertib (NMS-1286937, NMS-P937), and 72 hours later, the viable cell number was assessed by the CellTiter-Glo Assay (Promega). IC50 values were calculated with a sigmoidal fitting algorithm (Assay Explorer MDL). Experiments were carried out independently at least twice.