P22077

P22077 est un analogue de l'inhibiteur de l'USP7 récemment découvert P5091. Ce composé a une activité négligeable contre DEN1 et SENP2core sur la plage de concentrations testée, mais inhibe l'USP7 avec une IC50 de 8 μM. [1]

Les activités inhibitrices de cette substance chimique in vitro contre un panel de DUBs, de cystéine protéases et d'autres familles d'enzymes protéolytiques démontrent qu'elle inhibe l'USP7 et la DUB USP47 étroitement apparentée. Elle inhibe un sous-ensemble plus petit de DUBs à une concentration de 15 à 45 mM dans les lysats cellulaires. Ce composé induit la mort cellulaire (tumorale) avec des valeurs d'EC50 dans la plage des faibles micromolaires. Son inhibition a montré des changements dans les niveaux de protéines ubiquitinées qui sont distincts de l'inhibiteur à large spécificité. De plus, la MS quantitative suggère que les composants de l'E3 Ubiquitin ligase RBX1, DCAF7, DCAF11, et la protéine de liaison aux dommages de l'ADN 1 (DDB1) sont réduits après traitement cellulaire avec cette substance chimique. [2]

L'inhibition de l'USP7 par P22077 inhibe également la croissance des tumeurs mélanomateuses in vivo.

• Essais UbL-EKL

  Sauf indication contraire, l'isopeptidase recombinante est mélangée avec UbL-EKL et EKLsubstrate I à des concentrations finales de 20, 50 et 20 nM, respectivement, dans un volume total de 100 μL dans un puits d'une plaque à 96 puits à parois noires. Toutes les dilutions sont effectuées dans un tampon d'essai d'isopeptidase (20 mM Tris-HCl, pH 8,0, 2 mM CaCl₂ et 2 mM β-mercaptoéthanol). L'augmentation de l'intensité de fluorescence au fil du temps est déterminée sur un lecteur de plaques de fluorescence Perkin Elmer Envision avec des filtres d'excitation et d'émission correspondant au peptide de transfert d'énergie par résonance de fluorescence utilisé. Sauf indication contraire, les unités de fluorescence relatives nettes (RFU) sont déterminées en soustrayant la valeur de RFU du blanc (20 nM EKL substrate I ou 100 nM EKL substrate II dans un tampon d'essai d'isopeptidase) de chaque point de données. Les expériences de sensibilité SENP2core, SUMO3-EKL sont réalisées en mélangeant 0–100 fM de SENP2core avec 50 nM de SUMO3-EKL et 100 nM de EKL substrate I dans un volume total de 100 μL comme ci-dessus.

• Modèles animaux

  Female SD nude mice

• Posologies

  10 mg/kg

• Administration

  i.v.