PNU-74654

Le composé PNU-74654 (PNU) est un médicament non approuvé par la FDA qui empêche Tcf de se lier à la β-caténine, agissant comme un antagoniste de Wnt/beta-catenin. Dans les cellules NCI-H295, ce composé diminue significativement la prolifération cellulaire 96 h après le traitement, augmente l'apoptose précoce et tardive, diminue l'accumulation nucléaire de β-caténine, altère l'expression de CTNNB1/beta-catenin et augmente les gènes cibles de la β-caténine 48 h après le traitement. Aucun effet n'est observé sur les cellules HeLa. Dans les cellules NCI-H295, cette substance chimique diminue la sécrétion de cortisol, de testostérone et d'androstènedione 24 et 48 h après le traitement. De plus, dans les cellules NCI-H295, elle diminue l'expression de l'ARNm de SF1 et CYP21A2 ainsi que les niveaux de protéines de STAR et de l'aldostérone synthase 48 h après le traitement. Dans les cellules Y1, ce composé altère la sécrétion de corticostérone 24 h après le traitement mais ne diminue pas la viabilité cellulaire[2].

• Lignées cellulaires

  Adrenal (NCI-H295 and Y1) and non-adrenal (HeLa) cell lines

• Concentrations

  5-200 μM

• Temps dincubation

  24-96 h

• Méthode

  NCI-H295 cells are plated at 200,000 cells per well in 24-well plates for gene expression, protein analysis and adrenal steroid measurements. After 48 h, cells are treated with vehicle (0.1%-0.4% DMSO) or 10, 50, 100 and 200 μM PNU-74654. After 24 and 48 h, medium supernatants are collected for adrenal steroid measurements. Adherent cells are fixed for immunofluorescence or harvested for RNA and protein isolation.