Regorafenib Hydrochloride

Regorafenib prévient fortement l'autophosphorylation de VEGFR2 dans les cellules NIH-3T3/VEGFR2 avec une IC50 de 3 nM. Dans les HAoSMCs, le régorafénib supprime l'autophosphorylation de PDGFR-β après stimulation par PDGF-BB, avec une IC50 de 90 nM. Le régorafénib inhibe également la signalisation FGFR dans les cellules de cancer du sein (BC) MCF-7 stimulées par FGF10. Le régorafénib a très puissamment inhibé les récepteurs mutants KIT^K642E et RET^C634W, avec des IC50 d'environ 20 nM et 10 nM, respectivement. Le régorafénib inhibe la prolifération des HUVECs stimulées par VEGF¹⁶⁵, avec une IC50 d'environ 3 nM. Le régorafénib prévient la prolifération des HUVECs stimulées par FGF2 et des HAoSMCs stimulées par PDGF-BB avec des IC50 de 127 nM et 146 nM, respectivement. [1] Le régorafénib cible à la fois la prolifération des cellules tumorales et la vascularisation tumorale par l'inhibition des récepteurs de Protein Tyrosine Kinase (VEGFR, KIT, RET, FGFR et PDGFR) et des sérine/thréonine kinases (Raf et p38MAPK). [2] Le régorafénib supprime la croissance des cellules humaines Hep3B, PLC/PRF/5 et HepG2 de manière concentration- et temps-dépendante. [3]

Regorafenib révèle un TGI puissant dépendant de la dose dans divers modèles précliniques de xénogreffes humaines chez la souris, avec des réductions tumorales dans les modèles de carcinome mammaire MDA-MB-231 et rénal 786-O. Regorafenib prévient non seulement la croissance des tumeurs mammaires primaires syngéniques 4T1 poussant orthotopiquement dans le coussinet adipeux, mais supprime également la formation de métastases tumorales dans le poumon. [1]

• Tests de kinases

  Des tests in vitro utilisant les domaines kinase recombinants VEGFR2 (murine aa785–aa1367), VEGFR3 (murine aa818–aa1363), PDGFRβ (aa561–aa1106), Raf-1 (aa305–aa648) et BRafV600E (aa409–aa765) sont réalisés. Le profilage initial de l'inhibition des kinases in vitro est effectué à une concentration fixe de 1 μM de Regorafenib. Les valeurs de concentration inhibitrice de 50 % (IC50) sont déterminées à partir des kinases répondantes sélectionnées, par exemple VEGFR1 et RET. L'inhibition de la kinase TIE2 est mesurée avec un essai de fluorescence homogène résolue dans le temps (HTRF) utilisant une protéine de fusion recombinante de glutathion-S-transférase, le domaine intracellulaire de TIE2 et le peptide biotine-Ahx-EPKDDAYPLYSDFG comme substrat.

• Lignées cellulaires

  GIST 882 and TT cells

• Concentrations

  5-10 μM

• Temps dincubation

  96 h

• Méthode

  For proliferation assays, GIST 882 and TT cells are grown in RPMI medium containing L-glutamine, and MDA-MB-231, HepG2 and A375 cells in DMEM always containing 10% hiFBS. Cells are trypsinized, plated at 5×10⁴ cells/well in 96-well plates in complete media containing 10% FBS and grown overnight at 37 °C. The next day, vehicle or Regorafenib serially diluted in complete growth media to between 10 μM and 5 nM final concentrations, and 0.2% DMSO, is added and incubation is continued for 96 hours. Cell proliferation is quantified.

• Modèles animaux

  Female athymic NCr nu/nu mice with Colo-205, MDA-MB-231 or 786-O

• Posologies

  3 mg/kg, 10 mg/kg, 30 mg/kg, 100 mg/kg

• Administration

  o.g.