SM-164

SM-164 se lie à XIAP contenant les deux domaines BIR avec une IC50 de 1,39 nM, étant 300 et 7000 fois plus puissant que ses homologues monovalents et le peptide Smac AVPI naturel, respectivement. Ce composé cible le XIAP cellulaire et induit efficacement l'apoptose à des concentrations aussi faibles que 1 nM dans la lignée cellulaire de leucémie HL-60. [1]

Ce produit chimique induit l'apoptose dépendante de la caspase-8 et de la caspase-3 dans les cellules cancéreuses. Il induit également l'apoptose dépendante du TNFα et la dégradation de cIAP-1. [2]

Il est hautement synergique avec TRAIL in vitro dans les lignées cellulaires cancéreuses sensibles et résistantes au TRAIL du cancer du sein, de la prostate et du côlon. Ce composé améliore l'apoptose induite par TRAIL dans les cellules cancéreuses par amplification de la voie extrinsèque d'apoptose médiée par la caspase-8 [3]

SM-164 induit une dégradation rapide de cIAP-1 et une forte apoptose dans les tissus tumoraux de xénogreffe MDA-MB-231 et entraîne une régression tumorale, mais n'a aucune toxicité dans les tissus murins normaux. [2]

Ce composé induit la dégradation de cIAP1 dans les tissus tumoraux et améliore considérablement l'activité antitumorale in vivo du TRAIL, et la combinaison de ce produit chimique et du TRAIL permet une régression tumorale sans toxicité pour les animaux. [3]

• Essais de liaison.

  L'essai basé sur la FP pour la protéine XIAP BIR3 est décrit. En bref, la 5-carboxyfluorescéine est couplée à la chaîne latérale de lysine d'un peptide Smac muté avec la séquence et ce peptide marqué fluorescent (nommé SM5F) est utilisé comme traceur fluorescent dans l'essai de liaison basé sur la FP au XIAP BIR3. La valeur Kd de ce traceur fluorescent est déterminée à 17,9 nM pour le XIAP BIR3. Dans les expériences de liaison compétitive, un composé testé est incubé avec 30 nM de protéine XIAP BIR3 et 5 nM de SM5F dans le tampon d'essai (100 mM phosphate de potassium, pH 7,5; 100 μg/ml gamma globuline bovine; 0,02 % azide de sodium). La valeur Kd de SM5F pour la protéine cIAP-1 BIR3 est déterminée à 4,1 nM. Dans les expériences de liaison compétitive, 10 nM de protéine cIAP-1 BIR3 et 2 nM de traceur SM5F sont utilisés. La valeur Kd de SM5F pour la protéine cIAP-2 BIR3 est déterminée à 6,6 nM. Dans les expériences de liaison compétitive, 25 nM de protéine cIAP-2 BIR3 et 2 nM de traceur SM5F sont utilisés. Pour déterminer les affinités de liaison des mimétiques Smac au XIAP contenant les domaines BIR2 et BIR3, un essai de liaison compétitive basé sur la FP est établi en utilisant un traceur bivalent marqué fluorescentement, nommé Smac-1F. La valeur Kd du traceur marqué bivalent pour le XIAP contenant les domaines BIR2 et BIR3 est déterminée à 2,3 nM. Dans les expériences de liaison compétitive, un composé testé est incubé avec 3 nM de protéine XIAP contenant les domaines BIR2 et BIR3 (résidus 120-356) et 1 nM dans le même tampon d'essai.

• Lignées cellulaires

  HT-29 cells

• Concentrations

  1 μM

• Temps dincubation

  6 or 12 h

• Méthode

  Cells pre-treated with HG (5 μM) for 30 min were treatment with SM-164 (1 μM) for 6 or 12 h.

• Modèles animaux

  MDA-MB-231 xenografted SCID mice

• Posologies

  1 and 5 mg/kg

• Administration

  i.v.