SN-38

SN-38, un métabolite biologiquement actif du CPT-11. Ce composé provoque la plus forte inhibition de la DNA topoisomerase I, suivie par le CPT puis le CPT-11. Le CPT-11 déplace la position de l'ADN relâché en fonction de la dose dans la direction de l'ADN coupé, mais ce composé et le CPT n'ont aucun effet sur la position de l'ADN relâché. Il inhibe la synthèse d'ADN de manière dose-dépendante et temps-dépendante. Les valeurs d'IC50 respectives de ce produit chimique, dans la synthèse d'ADN, sont de 0,077 µM. L'effet inhibiteur sur la synthèse d'ARN est inférieur à celui sur la synthèse d'ADN et il n'inhibe pas la synthèse de protéines. Ce métabolite a provoqué de fréquentes cassures simple brin de l'ADN dans les cellules P388. [1]

Après administration orale, les concentrations plasmatiques maximales de ce composé sont atteintes en 1 heure, et le pourcentage de lactone non liée dans le plasma murin à 1000 ng/mL est de 3,4 +/- 0,67 %, tandis qu'à 100 ng/mL, le pourcentage non lié est de 1,18 +/- 0,14 %. Les AUC de lactone chez les souris porteuses de xénogreffes de neuroblastome humain sont supérieures à celles des animaux sans tumeur. [2]

• Test de la Topoisomerase I

  Une unité (la quantité minimale pour la relaxation complète de 0,5 μg d'ADN de SV40 dans les conditions de cette étude) de Topoisomerase I, 0,5 μL des composés testés et 0,5 μg d'ADN de SV40 sont ajoutés séquentiellement au tampon de réaction, qui est composé de 25 mM Tris-HCl (pH 7,5), 50 mM KCl, 5 mM MgCl₂, 0,25 mM sel disodique d'EDTA, 0,25 mM dithiothréitol, 15 μg/mL d'albumine de sérum bovin et 5 % de glycérol. Ensuite, le mélange réactionnel (50 μL) est incubé pendant 10 min à 37 °C, et la réaction est terminée par traitement avec 7,5 μL d'une solution composée de 1 % de dodécylsulfate de sodium, 20 mM de sel disodique d'EDTA et 0,5 mg/mL de protéinase K pendant 30 min supplémentaires à 37 °C. Les échantillons sont mélangés avec 5 μL du tampon de charge contenant 10 mM de Na₂HPO₄, 31,3 % de saccharose et 0,3 % de bleu de bromophénol. L'ADN relâché (forme Ir) est séparé de l'ADN superenroulé (forme I) et de l'ADN nické (forme II) par électrophorèse sur gel d'agarose à 0,8 % à 50 mA et 20 V pendant 17 h en présence de 2 μg/mL de CHQ, 10 mM d'EDTA, 30 mM de NaH₂PO₄ et 36 mM de Tris-HCl (pH 7,8). Après l'électrophorèse, le gel est coloré avec 0,05 % de bromure d'éthidium et photographié sous lumière UV (302 nm). La quantité d'ADN est quantifiée à l'aide d'un densitomètre.

• Lignées cellulaires

  A-172, U-87, and LA-567

• Concentrations

  0 -1000 nM

• Temps dincubation

  48 h

• Méthode

  MTT assay

• Modèles animaux

  Male Sprague-Dawley rats

• Posologies

  10 mg/kg

• Administration

  i.v.