PLX4032 (Vemurafenib)

N° de catalogueS1267 Lot :S126716

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Données techniques

Formule

C23H18ClF2N3O3S
Poids moléculaire 489.92 Numéro CAS 918504-65-1
Solubilité (25°C)* In vitro DMSO 98 mg/mL (200.03 mM)
Water Insoluble
Ethanol Insoluble
In vivo (Ajouter les solvants au produit individuellement et dans lordre.)
Homogeneous suspension
CMC-NA
≥5mg/ml Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution
4%DMSO 30%PEG300 5%Tween80 61%ddH2O

Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.

 1.250mg/ml (2.55mM) Taking the 1 mL working solution as an example, add 40 μL of 31.25 mg/ml clarified DMSO stock solution to 300 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 610 μL of ddH2O to make it clear. Volume up to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results. 
* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description Vemurafenib (PLX4032, RG7204, RO5185426) est un nouvel inhibiteur puissant de B-RafV600E avec une IC50 de 31 nM dans un essai acellulaire. Il est 10 fois plus sélectif pour B-RafV600E que pour le B-Raf de type sauvage dans les essais enzymatiques et la sélectivité cellulaire peut dépasser 100 fois. Vemurafenib (PLX4032, RG7204) induit l'Autophagy.
Cibles
SRMS
(Cell-free assay)		 ACK1
(Cell-free assay)		 B-Raf (V600E)
(Cell-free assay)		 C-Raf
(Cell-free assay)		 MAP4K5 (KHS1)
(Cell-free assay)		 Voir plus
18 nM 19 nM 31 nM 48 nM 51 nM
In vitro Vemurafenib (PLX4032) inhibe B-RAFV600E, C-RAF, ainsi que le B-RAF de type sauvage, avec des IC50 de 31 nM, 48 nM et 100 nM, respectivement. Ce composé inhibe également plusieurs kinases non-RAF, y compris ACK1, KHS1 et SRMS, avec des IC50 de 18 nM à 51 nM. Dans les lignées cellulaires de mélanome, l'effet inhibiteur de ce composé dépend du statut mutationnel de B-RAF, car il inhibe puissamment celles qui hébergent des mutants B-RAF V600, y compris V600E, V600D, V600K et V600R, mais pas le type sauvage ou d'autres mutants. Les valeurs d'IC50 sur ces cellules, y compris MALME-3M, Colo829, Colo38, A375, SK-MEL28 et A2058, varient de 20 nM à 1 μM. Dans ces cellules, Vemurafenib (0,1 μM à 30 μM) inhibe également la phosphorylation de MEK1/2 et ERK1/2. Il est très efficace dans le traitement du mélanome, pour sa capacité à inhiber B-RAFV600E. Cependant, ce composé présente un effet limité chez les patients atteints de cancer du côlon qui portent également l'oncoprotéine B-RAFV600E. La raison en est que, dans les cellules de cancer du côlon, l'inhibition de B-RAFV600E par celui-ci entraîne une activation rapide du rétrocontrôle de l'EGFR, ce qui compense la prolifération cellulaire inhibée par PLX4032.
In vivo Dans des modèles de xénogreffe de souris mutantes B-RAFV600E, Vemurafenib (PLX4032) (6 mg/kg–20 mg/kg) inhibe la croissance tumorale. Dans des modèles de xénogreffe de souris de cellules LOX, Colo829 et A375, ce composé (12,5 mg/kg–100 mg/kg) inhibe la croissance tumorale et prolonge la survie des souris.
Caractéristiques Un nouvel inhibiteur puissant de l'oncoprotéine B-RAFV600E.

Protocole (de référence)

Test kinase :

[1]
  • Mesures de l'activité de la kinase RAF

    Les activités kinases des RAF de type sauvage et des mutants sont déterminées en mesurant la phosphorylation de la protéine BAD biotinylée en présence de Vemurafenib (PLX4032). Pour chaque enzyme (0,01 ng), des réactions de 20 μL sont réalisées dans 20 mM Hepes (pH 7,0), 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, 0,01% (v/v) Tween-20, 50 nM de protéine biotin-BAD et 1 mM d'ATP à température ambiante. Les réactions sont arrêtées à 5 min avec 5 μL d'une solution contenant 20 mM Hepes (pH 7,0), 200 mM NaCl, 80 mM EDTA, 0,3% (p/v) d'albumine de sérum bovin (BSA). La solution d'arrêt comprend également un anticorps phospho-BAD (Ser112), des billes donneuses revêtues de streptavidine et des billes accepteuses de protéine A. L'anticorps et les billes sont pré-incubés dans la solution d'arrêt dans l'obscurité à température ambiante pendant 30 min. La dilution finale de l'anticorps est de 1/2000 et la concentration finale de chaque bille est de 10 μg/mL. Les plaques d'essai sont incubées à température ambiante pendant une heure, puis lues sur un lecteur PerkinElmer AlphaQuest. Les activités mutantes sont la moyenne de deux lots différents de protéines purifiées testées en double dans trois expériences différentes.
Test cellulaire :

[2]
  • Lignées cellulaires

    MALME-3M, Colo829, Colo38, A375, SK-MEL28, and A2058 cells

  • Concentrations

    0–10 μM , dissolved in DMSO

  • Temps dincubation

    5 days

  • Méthode

    Cellular proliferation is evaluated by MTT assay. Briefly, cells are plated in 96-well microtiter plates at a density of 1000 to 5000 cells per well in a volume of 180 μL. Vemurafenib (PLX4032) is prepared at 10 times the final assay concentration in media containing 1% DMSO. Twenty-four hours after cell plating, 20 μL of the appropriate dilution of this compound are added to plates in duplicate. The plates are assayed for proliferation 6 days after the cells are plated. Percent inhibition is calculated and the IC50 is determined from the regression of a plot of the logarithm of the concentration versus percent inhibition.
Étude animale :

[2]
  • Modèles animaux

    Mice (athymic nude) xenograft models of LOX, Colo829, and A375 cells

  • Posologies

    12.5 mg/kg–100 mg/kg

  • Administration

    Oral gavage twice daily

Références

  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20823850/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20551065/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22281684/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15808862/
  • https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22180495/

Validation du produit par le client

The regressing tumour microenvironment stimulates the outgrowth, infiltration and metastasis of drug-resistant clones. b, Bioluminescent signal of drug-resistant A375RTGL cells in vemurafenib-sensitive, A375 tumours, treated with vehicle or vemurafenib for 5 days (vehicle, n = 36; vemurafenib, n = 15 tumours). D, day. c, EdU incorporation in A375R-TGL cells in A375/A375R-TGL tumours treated with vehicle or vemurafenib for 4 days, as determined by FACS (vehicle, n = 8; vemurafenib, n = 6 tumours). d, Bioluminescent signal of A375R-TGL tumours alone, treated with vehicle or vemurafenib for 5 days (vehicle, n 5 38; vemurafenib, n = 15 tumours). e, Bioluminescent signal of TGLexpressing drug-resistant cancer cells (A375R, M249R4, PC9 and H2030) in drug-sensitive tumours (Colo800, LOX, UACC62, M249, H3122 and HCC827) treated with vehicle or drugs (vemurafenib, crizotinib and erlotinib) for 5 days (n (from left to right on the graph) = 6, 7, 12, 12, 9, 9, 25, 26, 9, 12, 12, 12, 16 and 11 tumours). f, Spontaneous lung metastasis by A375R cells in mice bearing A375/A375R-TGL tumours treated with vehicle or vemurafenib (10 days), visualized by BLI (n = 4).

Données de [ Nature , 2015 , 520(7547), 368-72 ]

FRA1 downregulation during RAFi treatment drives the reactive secretome. c, Relative mRNA levels of FRA1 during vemurafenib exposure [0.1-1 uM]. d, Representative immunofluorescence staining of A375/A375R tumours for GFP (A375R, green) and FRA1 (red) after vehicle or vemurafenib treatment (5 days). DAPI, 49,6-diamidino-2-phenylindole. Scale bars, 50 um.

Données de [ Nature , 2015 , 520(7547), 368-72 ]

The B-Raf inhibitor PLX4032 decreases cell surface DR5 levels . BCPAP cells were treated with the indicated concentrations of PLX4032 for 12 h and then harvested for extraction of cellular total RNA and subsequent RT-PCR to detection of DR5.

Données de [ Oncogene , 2015 , 10.1038/onc.2015.97 ]

Acquired EGFR expression in BRAF(V600E) mutant melanoma after vemurafenib resistance. Immunohistochemical (IHC) analysis (ultraView DAB stain, brown) showing increased EGFR expression in formalin-fixed paraffin embedded (FFPE) (Patient number 1-5) and frozen (Patient number 6) melanoma tissue sections from BRAF(V600E) mutant melanoma patients who developed resistance to vemurafenib, dabrafenib or trametinib as indicated. For each patient, the first biopsy is from the pre-treatment tumour; the second biopsy was performed after the tumour had progressed under treatment. For patient number 4, the first biopsy was performed when the patient was in partial response, but rapidly developed secondary resistance. Then 4.5 months later, the second biopsy was taken.

Données de [ Nature , 2014 , 508(7494), 118-22 ]

Sellecks PLX4032 (Vemurafenib) A été cité par 714 Publications

Pan-inhibition of super-enhancer-driven oncogenic transcription by next-generation synthetic ecteinascidins yields potent anti-cancer activity [ Nat Commun, 2025, 16(1):512] PubMed: 39779693
Blocking interplay between TERT and c-Myc: a new therapeutic strategy for BRAFV600E/pTERT double mutated tumors [ Int J Biol Sci, 2025, 21(11):4961-4978] PubMed: 40860184
Downregulated ALDH2 Contributes to Tumor Progression and Targeted Therapy Resistance in Human Metastatic Melanoma Cells [ Cells, 2025, 14(12)913] PubMed: 40558540
Inter-Relationship Between Melanoma Vemurafenib Tolerance Thresholds and Metabolic Pathway Choice [ Cells, 2025, 14(12)923] PubMed: 40558548
Exploiting Paradoxical Activation of Oncogenic MAPK Signaling by Targeting Mitochondria to Sensitize NRAS Mutant-Melanoma to Vemurafenib [ Int J Mol Sci, 2025, 26(6)2675] PubMed: 40141318
Acquired resistance to vemurafenib restrains thyroid cancer stem cell self-renewal by suppressing STAT3 activation [ Cell Signal, 2025, 133:111845] PubMed: 40345509
Dihydrotanshinone I enhanced BRAF mutant melanoma treatment efficacy by inhibiting the STAT3/SOX2 signaling pathway [ Front Oncol, 2025, 15:1429018] PubMed: 39944829
Suppression of Sebum Production by Vemurafenib Through Paradoxical ERK Activation Resulted in the Inhibition of the mTOR Pathway in 5α-Dihydrotestosterone-Differentiated Hamster Sebocytes In Vitro [ Exp Dermatol, 2025, 34(8):e70150] PubMed: 40817681
Selective inhibition of p300 by a novel small molecule EPS496 promotes cell death in vemurafenib-resistant BRAFV600E mutated melanoma cells [ Biochem Biophys Res Commun, 2025, 750:151382] PubMed: 39884005
Increased Mitochondrial Superoxide Level Is Partially Associated With Vemurafenib-Induced Renal Tubular Toxicity [ Basic Clin Pharmacol Toxicol, 2025, 136(4):e70015] PubMed: 40018909

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