WYE-125132 (WYE-132)

N° de catalogueS2661 Lot :S266101

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Données techniques

Formule

C₂₇H₃₃N₇O₄

Poids moléculaire

519.6

Numéro CAS

1144068-46-1

Solubilité (25°C)*

In vitro

DMSO

104 mg/mL (200.15 mM)

Water

Insoluble

Ethanol

Insoluble

In vivo (Ajouter les solvants au produit individuellement et dans lordre.)

Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	30%PEG400 1 0.5%Tween80 2 5%propylene glycol Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.	30.000mg/ml (57.74mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 300 μL of 100 mg/ml clarified PEG400 stock solution to 5 μL of Tween80, mix evenly to clarify it; add 50 μL Propylene glycol to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 645 μL ddH2O to adjust the volume. to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

* <1 mg/ml signifie légèrement soluble ou insoluble.
* Veuillez noter que Selleck teste la solubilité de tous les composés en interne, et la solubilité réelle peut différer légèrement des valeurs publiées. Ceci est normal et est dû à de légères variations dun lot à lautre.
* Expédition à température ambiante (les tests de stabilité montrent que ce produit peut être expédié sans aucune mesure de refroidissement.)

Préparation des solutions mères

Activité biologique

Description

WYE-125132 (WYE-132) est un inhibiteur de mTOR hautement puissant et compétitif de l'ATP avec une IC50 de 0,19 nM ; il est hautement sélectif pour mTOR par rapport aux PI3K ou aux kinases apparentées aux PI3K hSMG1 et ATR.

Cibles

mTOR
(Cell-free assay)

0.19 nM

In vitro

WYE-125132 (WYE-132) inhibe puissamment et de manière ATP-compétitive la kinase mTOR recombinante avec une IC50 de 0,19 nM et montre également une haute sélectivité par rapport à diverses PI3K et un panel de 230 protéines kinases. In vitro, il présente une activité anti-proliférative significative contre un panel de lignées cellulaires tumorales avec une IC50 allant de 2 nM (LNCap) à 380 nM (HTC116). De plus, ce composé provoque également la progression du cycle cellulaire, l'induction de l'apoptose et l'inhibition de la synthèse des protéines et de la taille des cellules. Il entraîne une réduction significative de la synthèse de l'ARNt précurseur^Leu de 72 %, 80 % et 53 % dans les cellules en prolifération active de MG63, MDA361 et HEK293, respectivement, en inhibant mTORC1. De plus, il a été constaté que WYE-125132 induit également la déphosphorylation de Maf1 (régulateur négatif de la transcription de la Pol III) et son accumulation dans le noyau.

In vivo

Le WYE-125132 (WYE-132) (5 mg/kg p.o.) produit une activité antitumorale significative et provoque un retard de croissance tumorale dépendant de la dose dans le modèle tumoral MDA361 hyperactif en PI3K/mTOR et HER2. De plus, il montre également une puissante efficacité antitumorale dans les modèles de gliome U87MG sans PTEN, de cancer du poumon non à petites cellules H1975 et A549.

Caractéristiques

Un inhibiteur de la kinase mTOR hautement puissant, compétitif de l'ATP et spécifique.

Protocole (de référence)

Test kinase :^{^[1]}	Essais de kinase Les essais enzymatiques de mTOR via le dosage immuno-enzymatique par fluorescence à lanthane améliorée par la dissociation (DELFIA), les dosages matriciels d'ATP et les dosages de la kinase en complexe immunitaire de mTOR sont effectués comme suit pour WYE-125132 (WYE-132). Le TOR endogène du lysat cellulaire LNCap est immunoprécipité par l'anti-FRAP/TOR (N-19). Le lysat cellulaire (1,0 mg) est mélangé avec 4 μg d'anticorps couplés à l'agarose protéine-G/A dans 1 ml de tampon de lyse. Les immunocomplexes sont lavés séquentiellement avec le tampon de lyse, le tampon de lyse plus 500 mM KCl et le tampon de lavage de kinase. Les immunocomplexes sont soumis à une réaction de kinase pendant 30 minutes à 30 °C dans un volume final de 50 μl contenant 10 mM Hepes (pH 7,4), 50 mM NaCl, 50 mM β-glycérophosphate, et 0,5 μM microcystine LR, 1 mM DTT, 10 mM MnCl₂, 100 μM ATP, 1 μg His6-S6K ou 1 μg His6-4EBP1. Les réactions de kinase (enzymes en complexe immunitaire et purifiées) sont terminées par le tampon d'échantillon NuPAGE LDS et résolues dans un gel NuPAGE Bis-Tris 4-12 % pour Western blotting avec anti-P(T389)-p70S6K et anti-P(T46)-4EBP1, anti-FRAP/TOR (N-19), anti-FLAG M2 et anti-His6 (Clone His-1). Dans le dosage radioactif, 10 μCi [γ-³²P]ATP (3000 Ci/mmol) et 100 μM d'ATP froid sont utilisés. Les produits marqués au ³²P sont résolus par SDS-PAGE et soumis à un autoradiogramme sur des films radiographiques Kodak.
Test cellulaire :^{^[1]}	Lignées cellulaires MDA-MB-361, MDA-MB-231, MDA-MB-468, BT549, LNCap, A549, H1975, H157, H460, U87MG, A498, 786-O, HCT116, MG63, Rat1, HEK293, and HeLa Concentrations 0 to 10 μM Temps dincubation 24 hours Méthode Cell lines of MDA-MB-361, MDA-MB-231, MDA-MB-468, BT549, LNCap, A549, H1975, H157, H460, U87MG, A498, 786-O, HCT116, MG63, Rat1, HEK293, and HeLa are obtained from the American Type Culture Collection. Cell growth assays and IC50 determination are described as follows. For tumor cell growth assays, cells are plated in 96-well culture plates at 1000 to 3000 cells per well for 24 hours, treated with DMSO or various doses of WYE-125132 (WYE-132). Viable cell densities are determined three days later by MTS assay employing an assay kit following the kit assay protocol. The effect of each treatment is calculated as percent of control growth relative to the DMSO-treated cells grown in the same culture plate. Inhibitor dose response curves are plotted for determination of IC50 values.
Étude animale :^{^[1]}	Modèles animaux U87MG, MDA361, H1975, A549, A498, and 786-O cells are injected s.c. into the right flank of CD1 nu/nu mice. Posologies ≤50 mg/kg Administration Administered via i.v. or p.o.

Références

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20068177/
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20233713/

Validation du produit par le client

: Données de [ J Cell Sci , 2014 , 127(Pt 4), 788-800 ]

Sellecks WYE-125132 (WYE-132) A été cité par 9 Publications

Suppression of MYC by PI3K/AKT/mTOR pathway inhibition in combination with all-trans retinoic acid treatment for therapeutic gain in acute myeloid leukaemia [ Br J Haematol, 2022, 10.1111/bjh.18187]	PubMed: 35468223
Identification of New Vulnerabilities in Conjunctival Melanoma Using Image-Based High Content Drug Screening [ Cancers (Basel), 2022, 14(6)1575]	PubMed: 35326726
Expression of HYOU1 via Reciprocal Crosstalk between NSCLC Cells and HUVECs Control Cancer Progression and Chemoresistance in Tumor Spheroids [ Mol Cells, 2021, 44(1):50-62]	PubMed: 33455947
An evolutionarily young defense metabolite influences the root growth of plants via the ancient TOR signaling pathway [ Elife, 2017, 6e29353]	PubMed: 29231169
mTOR inhibitors activate PERK signaling and favor viability of gastrointestinal neuroendocrine cell lines [ Oncotarget, 2017, 8(13):20974-20987]	PubMed: 28423496
Rapalogs can promote cancer cell stemness in vitro in a Galectin-1 and H-ras-dependent manner [ Oncotarget, 2017, 8(27):44550-44566]	PubMed: 28562352
Adaptation to mTOR kinase inhibitors by amplification of eIF4E to maintain cap-dependent translation. [Cope CL, et al. J Cell Sci, 2014, 127(Pt 4):788-800]	PubMed: 24363449
Deciphering Combinations of PI3K/AKT/mTOR Pathway Drugs Augmenting Anti-Angiogenic Efficacy In Vivo [Sasore T, et al PLoS One, 2014, 9(8):e105280]	PubMed: 25144531
Murine dendritic cell rapamycin-resistant and rictor-independent mTOR controls IL-10, B7-H1, and regulatory T-cell induction. [ Blood, 2013, 121(18):3619-30]	PubMed: 23444404

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