Y-27632 Dihydrochloride

Y-27632 2HCl inhibe ROCK-II tout en présentant une faible activité contre la PKC, la protéine kinase dépendante de l'AMPc et la kinase des chaînes légères de myosine (MLCK) avec des K_i de 26 μM, 25 μM et > 250 μM, respectivement, ainsi que la PKA activée par un autre membre de la famille des GTPases Rho, Cdc42. Ce composé inhibe la contraction des muscles lisses induite par divers agonistes, y compris la phényléphrine, l'histamine, l'acétylcholine, la sérotonine, l'endothéline et le thromboxane avec une IC50 de 0,3-1 μM, en inhibant sélectivement la sensibilisation au Ca²⁺. Il supprime la formation de fibres de stress médiée par Rho et p160ROCK dans les cellules cultivées. [1]

Ce traitement chimique bloque à la fois l'activation de l'actomyosine médiée par Rho et l'activité invasive stimulée par le LPA des cellules MM1 d'une manière dépendante de la concentration. [2]

Ce traitement par le composé est non seulement suffisant pour initier la formation de processus axonaux exubérants, mais facilite également la maturation axonale pendant les tout premiers stades de l'axonogenèse, tout en épargnant largement l'élongation axonale. [3]

Dans les cellules souches embryonnaires humaines (hES), ce traitement chimique à 10 μM diminue notablement l'apoptose induite par la dissociation, même en culture en suspension sans sérum (SFEB), augmente l'efficacité du clonage (de ~1% à ~27%), facilite le sous-clonage après transfert de gènes, et permet aux cellules hES cultivées en SFEB de survivre et de se différencier en progéniteurs corticaux et basaux du télencéphale Bf1⁺. [4]

L'administration orale de Y-27632 2HCl à 30 mg/kg diminue significativement la pression artérielle de manière dose-dépendante chez les rats spontanément hypertendus, les rats hypertendus rénaux, ainsi que les rats hypertendus à l'acétate de désoxycorticostérone (DOCA)-sel. [1]

Lorsque ce composé est administré en continu à une vitesse de 0,55 μL par heure par des pompes implantées pendant 11 jours, l'invasion des cellules tumorales (cellules MM1 exprimant Val14-RhoA chez les rats) est significativement retardée. [2]

En inhibant ROCK, ce traitement chimique atténue l'angiogenèse induite par l'hypoxie et le remodelage vasculaire dans la circulation pulmonaire. [5] Le prétraitement avec ce composé a un effet protecteur contre la formation de tumeurs chez les souris albinos atteintes de carcinome ascitique d'Ehrlich. [7]

• Réactions de phosphorylation

  La p160ROCK est exprimée dans les cellules COS sous forme de protéines pleine longueur étiquetées, et immunoprécipitée à l'aide d'anticorps anti-étiquette. La p160ROCK (30 ng) est incubée avec 40 μM de [γ-³²P]ATP (3,3 Ci/mmol) et avec 3 μg d'histone (HF2A), de caséine déphosphorylée ou de MBP en présence de diverses concentrations de ce composé à 30 °C dans un volume total de 31 μL. Un aliquot de 7 μL est prélevé à 0, 5, 10 et 20 minutes, mélangé avec un volume égal de tampon d'échantillon 2 × Laemmli, et appliqué sur SDS-PAGE. Le gel est coloré au bleu de Coomassie, séché et soumis à une analyse par un analyseur d'images biologiques BAS2000. La concentration de ce produit chimique requise pour inhiber l'activité de la p160ROCK de 50 % (valeur IC50) est obtenue. La valeur K_i est calculée selon l'équation, K_i = IC50/(1 + S/K_m), où S et K_m représentent les concentrations de et la valeur K_m pour l'ATP.

• Lignées cellulaires

  hES Cells

• Concentrations

  10 uM

• Temps dincubation

  1 h

• Méthode

  Y-27632 2HCl was added to culture medium at 10 uM 1 h before detaching the cells from the feeder layer and also upon seeding the cells onto a new MEF layer.

• Modèles animaux

  Male Wistar rats with spontaneous or induced hypertension; Swiss albino mice with Ehrlich ascites carcinoma

• Posologies

  30 mg/kg/day (Rat); 0-10 mg/kg (mice)

• Administration

  Orally (Rat); i.p. (Mice)