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Opaganib (ABC294640) Inhibiteur de la SphK2

Réf. Catalogue: S7174

Opaganib (ABC294640) est un inhibiteur oralement biodisponible et sélectif de la sphingosine kinase-2 (SphK2) avec une IC50 d'environ 60 μM. Phase 1/2.
Opaganib (ABC294640) SPHK Inhibiteur Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 380.91

Aller à

Contrôle Qualité (Quality Control)

Lot : Pureté : 99.73%
99.73

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Lignées cellulaires Type d'essai Concentration Temps d'incubation Formulation Description de l'activité PMID
Sf9 Function assay Inhibition of human recombinant SphK2 expressed in Sf9 cells assessed as radiolabeled products using 10 uM sphingosine and 10 uM gamma[32P]ATP by liquid scintillation counting, Ki=9.8μM 25643074
Sf9 Function assay 2 hrs Inhibition of recombinant human full-length N-terminal His-tagged SK2 expressed in baculovirus infected Sf9 insect cells using NBD-Sph as substrate measured after 2 hrs by fluorescence based HPLC analysis, Ki=9.8μM 30889352
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Informations chimiques, stockage et stabilité (Chemical Information, Storage & Stability)

Poids moléculaire 380.91 Formule

C23H25ClN2O

 Stockage (À compter de la date de réception)
N° CAS 915385-81-8 Télécharger le SDF Stockage des solutions mères

Synonymes N/A Smiles C1C2CC3(CC1CC(C2)(C3)C(=O)NCC4=CC=NC=C4)C5=CC=C(C=C5)Cl

Solubilité (Solubility)

In vitro
Lot:

DMSO : 76 mg/mL (199.52 mM)
(Le DMSO contaminé par l'humidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 28 mg/mL

Water : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant l'expérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter d'abord s'il n'y a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter d'abord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant d'ajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous d'ajouter le(s) solvant(s) dans l'ordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de l'ajout précédent, est une solution claire avant de procéder à l'ajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme d'action (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
SphK2
(Cell-free assay)
60 μM
In vitro
Opaganib (ABC294640) markedly alters the ratio of ceramide/S1P consistent with inhibition of SK activity in MDA-MB-231 cells. It inhibits tumor cell proliferation with IC50 values ranging from approximately 6 to 48 μM, and impairs tumor cell migration concomitant with loss of microfilaments. This compound induces nonapoptotic cell death, morphological changes in lysosomes, formation of autophagosomes, and increases in acidic vesicles in A-498, PC-3, and MDA-MB-231 cells. In both MCF-7 and ER-transfected HEK293 cells, it decreases E2-stimulated ERE-luciferase activity.
Essai kinase
Essais de la sphingosine kinase
Les valeurs d'IC50 pour Opaganib (ABC294640) et DMS sont déterminées par un nouveau test d'activité SK basé sur la HPLC. En bref, les composés testés sont incubés avec la SK1 ou SK2 recombinante et NBD-Sph dans les tampons d'essai sélectifs aux isozymes détaillés ci-dessous, avec 1 mg/ml d'albumine sérique bovine sans acide gras, 100 μM d'ATP et 400 μM de MgCl2. Le produit, c'est-à-dire le NBD-S1P, est séparé du NBD-Sph par HPLC comme suit : système HPLC Waters 2795 avec un détecteur de fluorescence Waters 2495, colonne C8 Chromolith RP-8e (100 × 4,6 mm), phase mobile de 1 ml/min (acétonitrile/tampon phosphate de sodium 20 mM, pH 2,5, à 45:55). La fluorescence est surveillée avec une excitation à 465 nm et une émission à 531 nm. Le rapport NBD-S1P/(NBD-Sph + NBD-S1P) est utilisé comme mesure de l'activité SK. Les tampons d'essai sélectifs aux isozymes SK contenaient chacun 20 mM Tris, pH 7,4, 5 mM EDTA, 5 mM EGTA, 3 mM β-mercaptoéthanol, 5 % de glycérol, 1× inhibiteurs de protéase et 1× inhibiteurs de phosphatase. Pour le tampon d'essai SK1, 0,25 % (final) de Triton X-100 est ajouté ; et pour le tampon SK2, 1 M (final) de KCl est ajouté. Les essais sont réalisés pendant 2 h à température ambiante, puis un volume de méthanol de 1,5 est ajouté pour arrêter la réaction de la kinase. Après 10 min, les échantillons sont centrifugés à 20 000 g pour culoter la protéine précipitée, et les surnageants sont analysés par HPLC. Dans les expériences visant à déterminer le Ki pour l'inhibition de la SK2 par ce composé, le système de dosage ADP Quest est utilisé pour mesurer l'activité de la kinase en présence de concentrations variables de sphingosine et de celui-ci. Pour déterminer les effets d'Opaganib sur l'activité cellulaire de la SK, des cellules MDA-MB-231 quasi-confluentes sont privées de sérum pendant une nuit, puis traitées avec des concentrations variables de celui-ci. Les cellules sont ensuite incubées avec de la [3H]sphingosine à une concentration finale de 1 μM. Les cellules absorbent la sphingosine exogène, qui est convertie en S1P via l'activité de la SK, et la [3H]S1P est séparée de la [3H]sphingosine par extraction et quantifiée par comptage par scintillation.
In vivo
Opaganib (ABC294640) significantly reduces tumor growth in mice bearing mammary adenocarcinoma xenografts, associated with depletion of S1P levels. In severe combined immunodeficient mice bearing A-498 xenografts, it delays tumor growth and elevates autophagy markers. This compound also protects against liver transplantation-induced inflammation and cross-talk between innate and adaptive immunities, major events precipitating and exacerbating graft injury, and improves liver function and survival.
Références
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22848628/

Applications (Applications)

Méthodes Biomarqueurs Images PMID
Western blot c-Myc pRb / Rb H3K9ac / p21 p-STAT3 / STAT3
S7174-WB1
27517489
Growth inhibition assay Cell proliferation
S7174-viability1
25122609

Informations sur l'essai clinique (Clinical Trial Information)

(données du https://clinicaltrials.gov, mis à jour le 2025-04-27)

Numéro NCT Recrutement Conditions Promoteur/Collaborateurs Date de début Phases
NCT02939807 WITHDRAWN
Carcinoma, Hepatocellular
Medical University of South Carolina
 2019-09-30 PHASE2
NCT04207255 COMPLETED
Prostate Cancer
Medical University of South Carolina
 2020-03-27 PHASE2
NCT03377179 COMPLETED
Cholangiocarcinoma; Cholangiocarcinoma Non-resectable; Cholangiocarcinoma, Perihilar; Cholangiocarcinoma, Extrahepatic; Cholangiocarcinoma, Intrahepatic
RedHill Biopharma Limited
 2018-03-07 PHASE2
NCT04467840 COMPLETED
COVID-19; Lung Infection
RedHill Biopharma Limited
 2020-08-21 PHASE2; PHASE3
NCT04502069 WITHDRAWN
COVID-19; Lung Infection
RedHill Biopharma Limited
 2020-08 PHASE1; PHASE2
NCT04414618 COMPLETED
Coronavirus Infections
RedHill Biopharma Limited
 2020-07-02 PHASE2