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H2DCFDA (DCFH-DA) ROS chimique

Réf. CatalogueS9687

H2DCFDA (DCFH-DA) est une sonde perméable aux cellules utilisée pour détecter la production intracellulaire d'espèces réactives de l'oxygène (ROS). Elle est dé-estérifiée intracellulairement et se transforme en 2′,7′-dichlorofluorescéine hautement fluorescente après oxydation. Ce composé est utilisé pour la quantification sensible et rapide des espèces réactives à l'oxygène en réponse au métabolisme oxydatif ; un essai sur microplaques pour détecter les produits oxydatifs dans les cellules phagocytaires, et un essai quantitatif de différenciation myéloïde en plusieurs puits (Ex/Em=488/525 nm).
H2DCFDA (DCFH-DA) ROS chimique Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 487.29

Aller à

Contrôle Qualité

Lot : Pureté : 99.93%
99.93

Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire 487.29 Formule

C24H16Cl2O7

Stockage (À compter de la date de réception) 3 years -20°C(in the dark) powder
N° CAS 4091-99-0 -- Stockage des solutions mères

Synonymes 2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate Smiles CC(=O)OC1=CC2=C(C=C1Cl)C(C3=C(O2)C=C(OC(C)=O)C(=C3)Cl)C4=C(C=CC=C4)C(O)=O

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 97 mg/mL (199.06 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 7 mg/mL

Water : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de lajout précédent, est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

Targets/IC50/Ki
ROS
In vitro

1. H2DCFDA (DCFH-DA) est dissous dans du DMSO pour obtenir des solutions mères à 10 mM et dilué davantage avant utilisation.
2. Les cellules sont incubées avec 5 μM de ce composé dans du PBS dans l'obscurité pendant 30 min à 37°C, puis récoltées avec une solution de trypsine-EDTA à 0,05%, suspendues dans un nouveau milieu et immédiatement analysées par cytométrie de flux.
3. Parallèlement, si indiqué, utiliser une modification de la fluorescéine DCFDA insensible aux ROS comme contrôle positif. La procédure de coloration est la même que pour le H2DCFDA.
Émission (Em)=517 Excitation (Ex)=492 517

Références

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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