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D-Luciferin Dyes inhibiteur

Réf. CatalogueS7763

D-Luciferin est un substrat bioluminescent populaire de la luciférase en présence d'ATP, utilisé dans les applications d'imagerie bioluminescente à base de luciférase et de criblage à haut débit basé sur les cellules. Dans un modèle murin immunocompétent de cancer de l'ovaire, l'utilisation de ce composé et de la luciférase de luciole préserve les interactions immunitaires hôte-tumeur, car l'imagerie bioluminescente est une indication plus sensible de la croissance tumorale que la prise de poids.
D-Luciferin Dyes inhibiteur Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 280.32

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Contrôle Qualité

Lot : Pureté : 99.48%
99.48

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail

Lignées cellulaires Type dessai Concentration Temps dincubation Formulation Description de lactivité PMID
CHO cells Function assay Displacement of [3H]PSB-13253 from human recombinant GPR35 exprssed in CHO cells by liquid scintillation counting analysis, Ki=9.86 μM 23888932
HT29 cells  Function assay Agonist activity at human GPR35 expressed in human HT29 cells by DMR assay, EC50=12.9 μM 23888932
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Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire 280.32 Formule

C11H8N2O3S2

Stockage (À compter de la date de réception) 3 years -20°C(in the dark) powder
N° CAS 2591-17-5 Télécharger le SDF Stockage des solutions mères

Synonymes Firefly luciferin, Beetle Luciferin Smiles C1C(N=C(S1)C2=NC3=C(S2)C=C(C=C3)O)C(=O)O

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 26 mg/mL (92.75 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de lajout précédent, est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

In vitro

1.Protocole exemple pour les essais d'imagerie bioluminescente in vitro
a) Préparer une solution mère de Luciferin à 100 mM (100-200X) dans de l'eau stérile. Bien mélanger. Utiliser immédiatement, ou faire des aliquots à usage unique, et conserver à -20℃, éviter les cycles de congélation-décongélation, éviter l'exposition à la lumière.
b) Préparer une solution de travail de D-Luciferin à 0,5-1 mM dans un milieu de culture tissulaire préchauffé.
c) Aspirer le milieu des cellules cultivées.
d) Ajouter cette solution de travail composée aux cellules et incuber les cellules pendant 5-10 minutes à 37℃ juste avant l'imagerie.
2.Protocole exemple pour les essais d'imagerie bioluminescente in vivo
a) Préparer une solution mère de Luciferin à 15 mg/mL dans du DPBS, sans Mg2+ et Ca2+. Bien mélanger.
b) Stériliser la solution par filtration à travers un filtre de 0,2 µm. Utiliser immédiatement, ou faire des aliquots à usage unique, et conserver à -20℃, éviter les cycles de congélation-décongélation, éviter l'exposition à la lumière.
c) Injecter la luciférine par voie intra-péritonéale (i.p.) 10-15 minutes avant l'imagerie à raison de 150 mg/kg (ou 10 µL/g de cette solution mère chimique) du poids corporel de l'animal.
Remarque: Une étude cinétique de la luciférine doit être réalisée pour chaque modèle animal afin de déterminer le temps de signal maximal.
3.Protocole exemple pour les essais de rapporteur de luciférine
a) Préparer une solution mère de Luciferin à 100 mM dans de l'eau stérile. Utiliser immédiatement, ou faire des aliquots à usage unique, et conserver à -20℃, éviter les cycles de congélation-décongélation, éviter l'exposition à la lumière.
b) Préparer une solution de travail de ce composé à 1 mM avec 3 mM d'ATP, 1 mM de DTT et 15 mM de MgSO4 dans un tampon tricine 25 mM pH 7,8.
c) Pipeter 5-10 µL de lysat cellulaire dans une microplaque. Utiliser un réactif de lyse ou un tampon sans lysat comme blanc.
d) Amorcer le luminomètre avec cette solution de travail chimique.
e) Injecter 200 µL de cette solution de travail composée sans délai et avec un temps d'intégration de 10 secondes.

In vivo

Dans un modèle murin immunocompétent de cancer de l'ovaire, l'utilisation du substrat D-Luciferin et de la luciférase de luciole préserve les interactions immunitaires hôte-tumeur, car l'imagerie bioluminescente est une indication plus sensible de la croissance tumorale que la prise de poids.

Références

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

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