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JNK-IN-8 JNK Inhibiteur

Réf. Catalogue: S4901

JNK-IN-8 (JNK Inhibitor XVI) est le premier inhibiteur irréversible de JNK pour JNK1, JNK2 et JNK3 avec une IC50 de 4,7 nM, 18,7 nM et 1 nM, une sélectivité >10 fois supérieure contre MNK2, Fms et aucune inhibition de c-Kit, Met, PDGFRβ dans la lignée cellulaire A375.
JNK-IN-8 JNK Inhibiteur Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 507.59

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Contrôle Qualité (Quality Control)

Lot : Pureté : 99.16%
99.16

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Lignées cellulaires Type d'essai Concentration Temps d'incubation Formulation Description de l'activité PMID
human HeLa cells Function assay 1 h Inhibition of JNK3-mediated c-jun phosphorylation in human HeLa cells after 1 hr incubation, IC50=0.486 μM 25415535
human A375 cells Function assay 1 h Inhibition of JNK3-mediated c-jun phosphorylation in human A375 cells after 1 hr incubation, IC50=0.338 μM 25415535
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Informations chimiques, stockage et stabilité (Chemical Information, Storage & Stability)

Poids moléculaire 507.59 Formule

C29H29N7O2

 Stockage (À compter de la date de réception)
N° CAS 1410880-22-6 Télécharger le SDF Stockage des solutions mères

Synonymes JNK Inhibitor XVI Smiles CC1=C(C=CC(=C1)NC(=O)C2=CC(=CC=C2)NC(=O)C=CCN(C)C)NC3=NC=CC(=N3)C4=CN=CC=C4

Solubilité (Solubility)

In vitro
Lot:

DMSO : 100 mg/mL (197.0 mM)
(Le DMSO contaminé par l'humidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant l'expérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter d'abord s'il n'y a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter d'abord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant d'ajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous d'ajouter le(s) solvant(s) dans l'ordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de l'ajout précédent, est une solution claire avant de procéder à l'ajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme d'action (Mechanism of Action)

Caractéristiques
JNK-IN-8 and JNK-IN-7 are structurally very similar, but whereas the former is a specific covalent inhibitor of JNKs.
Targets/IC50/Ki
JNK3
(A375 cells)
1 nM
JNK1
(A375 cells)
4.7 nM
JNK2
(A375 cells)
18.7 nM
Kit (V559D,T670I)
(A375 cells)
56 nM
Kit (V559D)
(A375 cells)
92 nM
In vitro

JNK-IN-8 inhibits c-Jun phosphorylation in HeLa and A375 cells with EC50 of 486 nM and 338 nM, respectively. This compound shows a dramatic improvement in selectivity and eliminated binding to IRAK1, PIK3C3, PIP4K2C, and PIP5K3. It requires Cys116 for JNK2 inhibition.

This chemical (10 mM) suppresses the IL-1β-stimulated phosphorylation of c-Jun in IL-1R cells, an established substrate of the JNKs. It covalently attaches to the JNK isoforms caused a small retardation in the electrophoretic mobility of the JNK isoforms.

It is discovered to inhibit JNK kinase by broad-based kinase selectivity profiling of a library of acrylamide kinase inhibitors based on the structure of using the KinomeScan approach. This compound possesses distinct regiochemistry of the 1,4-dianiline and 1,3-aminobenzoic acid substructures. It adopts an L-shaped type I binding conformation to access Cys 154 located toward the lip of the ATP-binding site.

Essai kinase
Test de cinétique de liaison
Test de cinétique de liaison Les cellules A375 sont prétraitées avec 1 μM de JNK-IN-8 pendant les durées indiquées. Retirer le milieu et laver trois fois avec du PBS. Resuspendre le culot cellulaire avec 1 mL de tampon de lyse (1% NP-40, 1% CHAPS, 25 mM Tris, 150 mM NaCl, cocktail d'inhibiteurs de phosphatase et cocktail d'inhibiteurs de protéase). Faire tourner de bout en bout pendant 30 min à 4℃. Les lysats sont clarifiés par centrifugation à 1,4×104 tr/min pendant 15 min dans un Eppendorf. Les lysats clarifiés sont filtrés sur gel dans du tampon de kinase (0,1% NP-40, 20 mM HEPES, 150 mM NaCl, cocktail d'inhibiteurs de phosphatase, cocktail d'inhibiteurs de protéase) à l'aide de colonnes 10DG. La concentration totale en protéines du lysat filtré sur gel doit être d'environ 5 à 15 mg/ml. Le lysat cellulaire est marqué avec la sonde d'ActivX à 5 μM pendant 1 heure. Les échantillons sont réduits avec du DTT, et les cystéines sont bloquées avec de l'iodoacétamide et filtrées sur gel pour éliminer l'excès de réactifs et échanger le tampon. Ajouter 1 volume de 2× tampon de liaison (2% Triton-100, 1% NP-40, 2 mM EDTA, 2× PBS) et 50 μL de suspension de billes de streptavidine, et faire tourner de bout en bout pendant 2 heures, centrifuger à 7 000 tr/min pendant 2 min. Laver trois fois avec 1× tampon de liaison et trois fois avec du PBS. Ajouter 30 μL de 1× tampon d'échantillon aux billes; chauffer les échantillons à 95℃ pendant 10 min. Charger les échantillons sur un gel SDS-PAGE à 110V. Après transfert, la membrane est immunobuvardée avec l'anticorps JNK.
In vivo

JNK-IN-8 is a potent JNK inhibitor that specially targets JNK activation. It has anti-fungal activity.
Références
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/28112734/

Applications (Applications)

Méthodes Biomarqueurs Images PMID
Western blot c-Jun / p-c-Jun / ATF2 / p-ATF2 / Elk-1 / pElk-1 Notch1 / c-Myc / Cyclin D1 / p21
S4901-WB1
27941886
Growth inhibition assay Cell viability
S4901-viability1
25847947