Name: PF-5274857
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S2777
Rating: 5 (3 reviews)

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Contrôle Qualité

Lot : Pureté : 99.86%

99.86

Cibles apparentées	JAK TGF-beta/Smad Wnt/beta-catenin ERK GSK-3 ROCK PKA Secretase STAT Casein Kinase
Autre Hedgehog/Smoothened Inhibiteurs	SAG (Smoothened Agonist) Hydrochloride Purmorphamine Cyclopamine (11-Deoxojervine) GANT61 SAG (Smoothened Agonist) SANT-1 HPI-4 (Ciliobrevin A) BMS-833923 Taladegib (LY2940680) Ciliobrevin D

Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire	436.96	Formule	C₂₀H₂₅ClN₄O₃S	Stockage (À compter de la date de réception)	3 ans-20°Cpoudre
N° CAS	1373615-35-0	Télécharger le SDF		Stockage des solutions mères	1 an-80°Cen solvant 1 mois-20°Cen solvant
Synonymes	N/A			Smiles	CC1=CC(=C(N=C1)C2=CC(=NC=C2Cl)N3CCN(CC3)C(=O)CCS(=O)(=O)C)C

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 93 mg/mL (212.83 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Water : 93 mg/mL

Ethanol : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse	Concentration	Volume	Poids moléculaire
=	×	×

Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo Lot:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	Saline Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.	30.000mg/ml (68.66mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 30 mg of this product to 1 ml of physiological saline (0.9% NaCL solution), mix evenly to make it clear, The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

Dosage : mg/kg Poids moyen des animaux : g Volume de dosage par animal :μL Nombre danimaux :

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH₂O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de lajout précédent, est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

Targets/IC₅₀/Ki	Smoothened 4.6 nM(Ki) Smoothened 5.8 nM
In vitro	PF-5274857 inhibe complètement l'activité de la voie Hh induite par Shh avec un IC50 de 2,7 nM mesuré par l'activité transcriptionnelle du gène en aval de Smo, Gli1, dans les cellules MEF. Le récepteur μ-opioïde est faiblement inhibé par ce composé avec une constante de dissociation de 36 μM déterminée ultérieurement dans un essai fonctionnel.
Essai kinase	Essais biochimiques
Essai kinase	Les cellules HEK293 surexprimant la Smo humaine (acides aminés 181-787) sont cultivées dans du milieu d'Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) supplémenté avec 10% de FBS, Pen-Strep et 0,1 mg/mL d'hygromycine jusqu'à 90% de confluence. Après lavage avec du PBS de Dulbecco froid, le culot cellulaire est resuspendu dans un tampon de préparation membranaire (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 250 mM saccharose avec le cocktail de protéase complet de Roche) et homogénéisé. L'homogénat est centrifugé et le culot cellulaire est resuspendu dans un tampon d'essai (50 mM Tris-HCl, pH 7,5, 100 mM NaCl, 25 mM MgCl₂, 1 mM EDTA et 0,1 % d'albumine sérique bovine sans protéase) et homogénéisé dans un broyeur de tissus en verre. La protéine totale dans la préparation membranaire contenant Smo est déterminée à l'aide de l'essai protéique Pierce BCA. Pour l'essai de liaison compétitive, 100 μL de tampon d'essai sont ajoutés à une plaque filtrante GF/B à 96 puits pendant 10 minutes pour pré-humidifier le filtre, puis retirés. Les réactifs suivants sont ensuite ajoutés : 20 μL de tampon d'essai, 10 μL de dilutions en série de ce composé, 20 μL d'antagoniste ³H-Smo (concentration finale de 3 nM) et 50 μL de préparation membranaire (40 μg de protéines totales). Les plaques sont incubées à température ambiante pendant 2 heures, puis lavées et séchées sous vide. Les plaques sont ensuite séchées pendant 1 heure dans une étuve à 60°C avant l'ajout de 45 μL de Microscint 20 et incubées à température ambiante pendant 30 minutes à 1 heure, puis comptées dans un compteur à scintillation TopCount. Les données sont analysées à l'aide du logiciel GraphPad Prism.
In vivo	PF-5274857 montre une inhibition significative de la croissance tumorale (TGI) dépendante de la dose et induit une régression tumorale à fortes doses (>10 mg/kg). Ce composé régule à la baisse les niveaux d'expression des gènes Gli1, Gli2, Ptch1 et Ptch2 à des degrés divers, les effets maximaux étant atteints entre 6 et 12 heures après l'administration (Gli1 étant le gène le plus sensible), tandis qu'il a peu d'effet sur les niveaux de Smo. Dans le tissu cutané, une régulation à la baisse de Gli1 et Gli2 est également observée avec une cinétique similaire par ce produit chimique. La concentration médicamenteuse dérivée du modèle pour l'inhibition semi-maximale du taux de production d'ARNm de Gli1 tumoral (IC50) par ce composé est déterminée à 8,9 nM chez les souris allogreffées de médulloblastome Ptch^+/−p53^+/−, ce qui correspond mathématiquement à une régression tumorale de 119 % TGI après 6 jours d'exposition plasmatique à cette concentration. Chez les souris allogreffées de médulloblastome Ptch^+/−p53^−/−, la valeur de l'IC50 est estimée à 3,5 nM, ce qui est cohérent avec les résultats Ptch^+/−p53^+/−. Il est également capable de traverser la barrière hémato-encéphalique chez les rats dans les 4 heures suivant l'administration.
Références	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22084163/

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si vous avez dautres questions, veuillez laisser un message.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

PF-5274857 Hedgehog/Smoothened antagoniste

Structure chimique

Poids moléculaire: 436.96