Tolbutamide (HLS 831) Potassium Channel inhibiteur

Tolbutamide appartient à une classe de médicaments appelés sulfonylurées. Tolbutamide abaisse la glycémie en stimulant le pancréas à produire de l'insuline (une substance naturelle nécessaire pour décomposer le sucre dans le corps) et en aidant le corps à utiliser l'insuline efficacement. Ce médicament ne contribuera à abaisser la glycémie que chez les personnes dont le corps produit naturellement de l'insuline. Tolbutamide n'est pas utilisé pour traiter le diabète de type 1 (condition dans laquelle le corps ne produit pas d'insuline et, par conséquent, ne peut pas contrôler la quantité de sucre dans le sang) ou l'acidocétose diabétique (une condition grave qui peut survenir si une glycémie élevée n'est pas traitée). Tolbutamide inhibe à la fois les activités des protéines kinases basales et stimulées par l'AMP cyclique, et l'IC50 de Tolbutamide est de 4 mM. Des concentrations similaires de Tolbutamide sont nécessaires pour une inhibition demi-maximale de la lipolyse in vitro induite par les hormones (norépinéphrine et ACTH) ou par le dibutyryl AMP cyclique plus la théophylline. Tolbutamide inhibe également les protéines kinases solubles et liées à la membrane du cœur canin. L'inhibition par Tolbutamide de la protéine kinase dépendante de l'AMP cyclique du tissu adipeux est une explication possible des effets antilipolytiques de ce médicament. [1] Tolbutamide inhibe la prolifération des cellules de gliome C6 en augmentant Cx43, ce qui est corrélé à une réduction de la phosphorylation de pRb due à la régulation positive des inhibiteurs de Cdk p21 et p27. [2] Les nucléotides cytosoliques augmentent la sensibilité du canal K+ dépendant de l'ATP à Tolbutamide dans les cellules B pancréatiques de souris par leurs actions combinées sur les récepteurs inhibiteurs et stimulateurs. [3] Tolbutamide inhibe la phosphorylation induite par le glucagon de la protéine enzymatique bifonctionnelle de manière dose-dépendante. En ajoutant 2 mM de Tolbutamide, la réduction de l'activité de la 6PF-2-K et l'augmentation de l'activité de la Fru-2,6-P2ase en présence de 10(-9) M de glucagon sont partiellement restaurées. Les présents résultats suggèrent la possibilité que Tolbutamide module l'activité de la 6PF-2-K/Fru-2,6-P2ase hépatique en inhibant une phosphorylation de la protéine enzymatique. [4]

Test de la kinase AMPc

Des coussinets adipeux épididymaires découpés de rats Wistar nourris (175-225 g) sont obtenus après décapitation et incubés à 37 °C pendant deux heures dans un tampon de Krebs-bicarbonate contenant 1,27 mM de CaCl₂. Lorsqu'il est ajouté, Tolbutamide n'est présent que pendant l'incubation. Après incubation, les coussinets adipeux sont rincés et sonicés dans un tampon de Krebs-bicarbonate froid. Les surnageants aqueux de la centrifugation à 50 000 × g pendant 30 minutes à 4 °C contenaient 0,75 à 1,25 mg de protéines par mL et sont testés pour l'activité de la protéine kinase stimulée par l'AMP cyclique. Le test est effectué dans 0,2 mL avec ces ajouts : 10 µmoles de glycérophosphate de sodium pH 7,0, 2 µmoles de fluorure de sodium, 0,4 µmoles de théophylline, 0,1 µmoles d'éthylène glycol bis (β-aminoéthyl éther)-N,N'-tétraacétate, 3 µmoles de chlorure de magnésium, 0,3 mg d'histone mixte, 2 nmoles de (γ-³²P) ATP, 1 nmole d'AMP cyclique si indiqué, et 0,05 ml de surnageant.

450 mg de Tolbutamide/kg/jour administrés pendant 7 jours augmentent significativement la liaison de l'insuline aux adipocytes isolés. Les courbes de liaison reflètent une augmentation du nombre de sites récepteurs plutôt qu'une augmentation de l'affinité. L'effet est associé à une réponse accrue à l'insuline du tissu adipeux, car les cellules adipeuses obtenues d'animaux traités avec Tolbutamide convertissent significativement plus de glucose en lipides en présence d'insuline que celles obtenues du groupe témoin. Cependant, l'augmentation des sites de liaison de l'insuline n'est observée qu'à une forte dose de tolbutamide, ce qui réduit la teneur en insuline pancréatique, la réponse sécrétoire du pancréas isolé et les niveaux d'insuline sérique. Des doses plus faibles, suffisantes pour produire des effets métaboliques via une stimulation de la sécrétion d'insuline, ne fournissent pas de sites de liaison d'insuline supplémentaires. [5]