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AG-14361 PARP Inhibiteur

Réf. Catalogue: S2178

AG14361 est un puissant inhibiteur de PARP1 avec un Ki de <5 nM dans un essai sans cellules. Il est au moins 1000 fois plus puissant que les benzamides.
AG-14361 PARP Inhibiteur Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 320.39

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Contrôle Qualité (Quality Control)

Lot : Pureté : 99.89%
99.89

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Lignées cellulaires Type d'essai Concentration Temps d'incubation Formulation Description de l'activité PMID
LoVo cells Function assay Concentration that gives 50% growth inhibition in LoVo cells, activity expressed as GI50, GI50=11.2 μM
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Informations chimiques, stockage et stabilité (Chemical Information, Storage & Stability)

Poids moléculaire 320.39 Formule

C19H20N4O

 Stockage (À compter de la date de réception)
N° CAS 328543-09-5 Télécharger le SDF Stockage des solutions mères

Synonymes N/A Smiles CN(C)CC1=CC=C(C=C1)C2=NC3=CC=CC4=C3N2CCNC4=O

Solubilité (Solubility)

In vitro
Lot:

DMSO : 51 mg/mL (159.18 mM)
(Le DMSO contaminé par l'humidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 21 mg/mL

Water : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant l'expérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter d'abord s'il n'y a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter d'abord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant d'ajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous d'ajouter le(s) solvant(s) dans l'ordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de l'ajout précédent, est une solution claire avant de procéder à l'ajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme d'action (Mechanism of Action)

Caractéristiques
The 1st high-potency PARP-1 inhibitor with the specificity & in vivo activity to enhance chemotherapy and radiation therapy of human cancers.
Targets/IC50/Ki
PARP1
(Cell-free assay)
<5 nM(Ki)
In vitro

AG14361 is at least 1000-fold more potent than the benzamides. The IC50 for AG14361 is 29 nM in permeabilized SW620 cells and 14 nM in intact SW620 cells. Crystallographic analysis of AG14361 bound to the catalytic domain of chicken PARP-1 shows that the tricyclic ring system of AG14361 is located in a pocket composed of amino acid residues Trp861, His862, Gly863, Tyr896, Phe897, Ala898, Lys903, Ser904, Tyr907, and Glu988. AG14361 forms important hydrogen bonds with Ser904 and Gly863 and a water-mediated hydrogen bond with Glu988. AG14361-induced growth inhibition is not attributed to PARP-1-related effects because maximal PARP-1 inhibition is observed at much lower concentrations (≤1 μM) than the GI50. AG14361 at 0.4 μM does not affect cancer cell gene expression or growth, but it increases the antiproliferative activity, and inhibits recovery from potentially lethal γ-radiation damage in LoVo cells by 73%. In addition, 0.4 μM AG14361 does not substantially alter gene expression as shown by microarray analysis. A 17-hour exposure of A549 cells to 0.4 μM AG14361 does not change the expression of the 6800 genes. Thus, although 0.4 μM AG14361 inhibits cellular PARP-1 activity by more than 85%, it essentially does not change gene expression and cell proliferation, indicating that the cellular effects of this low concentration of AG14361 are specific for PARP-1 inhibition. Higher, growth-inhibitory concentrations of AG14361 affects gene expression, but these effects are not likely to be related to PARP-1 inhibition because cell proliferation is affected equally in PARP-/- and PARP-1+/+ cells. AG14361 is rapidly absorbed into the bloodstream and distributed to the tumor and liver with lower concentrations detected in the brain. Tissue-to-plasma concentration ratio indicates that AG14361 is retained in tumor tissue over time in both xenograft models, with tumor concentrations (≥15 μM for 2 hours) in excess of that required to inhibit PARP-1 activity in vitro. AG14361 enhances activity in all MMR-proficient cells (1.5–3.3-fold) but is more effective in MMR-deficient cells (3.7–5.2-fold potentiation), overcoming resistance. In contrast, benzylguanine only increases the efficacy in MMR-proficient cells but is ineffective in MMR-deficient cells. AG14361 enhances the growth-inhibitory and cytotoxic effects of topoisomerase I poisons. AG14361 increases the persistence of camptothecin-induced DNA single-strand breaks.

Essai kinase
Tests d'activité PARP-1
L'activité de la PARP-1 humaine recombinante pleine longueur est mesurée dans un mélange réactionnel contenant 20 nM PARP-1, 500 μM NAD+ plus [32P]NAD+ (0,1–0,3 μCi par mélange réactionnel) et de l'ADN de thymus de veau activé (10 μg/mL) à 25oC; la réaction est arrêtée après 4 minutes par l'ajout de 10% (p/v) d'acide trichloroacétique glacé. Le produit de réaction [32P]ADP-ribose incorporé dans le matériel insoluble dans l'acide est déposé sur des filtres en fibre de verre Whatman GF/C à l'aide d'un appareil de microfiltration Bio-Dot et quantifié avec un PhosphorImager. L'inhibition de l'activité de PARP-1 par AG14361 à 0–600 nM est mesurée, et le Ki pour AG14361 est calculé par analyse de régression non linéaire.
In vivo

AG14361 treatment before irradiation statistically significantly increases the sensitivity to radiation therapy of mice bearing LoVo xenografts. AG14361 statistically significantly increases blood flow in xenografts and thus potentially increases drug delivery to tumor xenografts. In vivo, nontoxic doses of AG14361 increases the delay of LoVo xenograft growth induced by x-irradiation by 2- to 3-fold. Coadministration of AG14361 statistically significantly increases activity against LoVo xenografts, with the tumor growth delay being increased from 3 days to 9 days by AG14361 at 5 mg/kg and to 10 days by AG14361 at 15 mg/kg. The combination of AG14361 causes complete regression of SW620 xenograft tumors. PARP-1 activity, detected by pharmacodynamic assay, in SW620 xenografts is inhibited by more than 75% for at least 4 hours after intraperitoneal administration of AG14361 (10 mg/kg), consistent with the concentration of AG14361 persisting in the tumor.

Références