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CHIR-98014 inhibitor de GSK-3

Réf. Catalogue: S2745

CHIR-98014 (CT98014) is a potent GSK-3α/β inhibitor with IC50 of 0.65 nM/0.58 nM in cell-free assays, with the ability to distinguish GSK-3 from its closest homologs Cdc2 and ERK2.
CHIR-98014 GSK-3 inhibitor Chemical Structure

Structure chimique

Poids moléculaire: 486.31

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Contrôle Qualité (Quality Control)

Lot : Pureté : 99.27%
99.27

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Lignées cellulaires Type d'essai Concentration Temps d'incubation Formulation Description de l'activité PMID
BGC-823 Proliferation assay 50 nM 48 h abrogated rLMO3 protein-induced proliferation 29436606
HGC-27 Proliferation assay 50 nM 48 h abrogated rLMO3 protein-induced proliferation 29436606
DAOY qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for DAOY cells 29435139
SJ-GBM2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SJ-GBM2 cells 29435139
A673 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for A673 cells 29435139
SK-N-MC qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for SK-N-MC cells 29435139
NB-EBc1 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB-EBc1 cells 29435139
Saos-2 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Saos-2 cells 29435139
NB1643 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for NB1643 cells 29435139
LAN-5 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for LAN-5 cells 29435139
BT-12 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for BT-12 cells 29435139
Rh18 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for Rh18 cells 29435139
OHS-50 qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for OHS-50 cells 29435139
RD qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for RD cells 29435139
MG 63 (6-TG R) qHTS assay qHTS of pediatric cancer cell lines to identify multiple opportunities for drug repurposing: Primary screen for MG 63 (6-TG R) cells 29435139
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Informations chimiques, stockage et stabilité (Chemical Information, Storage & Stability)

Poids moléculaire 486.31 Formule

C20H17Cl2N9O2

 Stockage (À compter de la date de réception)
N° CAS 252935-94-7 Télécharger le SDF Stockage des solutions mères

Synonymes CT98014 Smiles C1=CC(=C(C=C1Cl)Cl)C2=NC(=NC=C2N3C=CN=C3)NCCNC4=NC(=C(C=C4)[N+](=O)[O-])N

Solubilité (Solubility)

In vitro
Lot:

DMSO : 10 mg/mL (20.56 mM)
(Le DMSO contaminé par l'humidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Calculateur de molarité

Masse Concentration Volume Poids moléculaire
Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo
Lot:

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant l'expérience)

mg/kg g μL

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter d'abord s'il n'y a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter d'abord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH2O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant d'ajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous d'ajouter le(s) solvant(s) dans l'ordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de l'ajout précédent, est une solution claire avant de procéder à l'ajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme d'action (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
GSK-3β
(Cell-free assay)
0.58 nM
GSK-3α
(Cell-free assay)
0.65 nM
In vitro
CHIR-98014 inhibe la GSK-3β humaine avec un Ki de 0,87 nM. Ce composé est très efficace pour prévenir la GSK-3 murine et de rat. Bien qu'il agisse comme un simple inhibiteur compétitif de la liaison à l'ATP, il présente une sélectivité de 500 à >1000 fois pour GSK-3 par rapport à 20 autres protéines kinases, y compris Cdc2, ERK2, Tie-2 et KDR. Cet inhibiteur prévient Cdc2 avec une IC50 de 3,7 μM. Cependant, il révèle une puissance similaire contre les isoformes ɑ et β très homologues de GSK-3, il est à noter qu'il discrimine fortement entre GSK-3 et ses homologues les plus proches CDC2 et ERK2. L'exposition de cellules CHO-IR exprimant le récepteur de l'insuline ou d'hépatocytes primaires de rat à des concentrations croissantes de ce produit chimique entraîne une stimulation deux à trois fois supérieure du rapport d'activité GS par rapport au niveau basal. Les concentrations entraînant une stimulation semi-maximale de la GS (EC50) sont de 106 nM et 107 nM pour les cellules CHO-IR et les hépatocytes de rat, respectivement.
Essai kinase
Essais de kinases
Les plaques de 96 puits en polypropylène sont remplies de 300 μL/puits de tampon (50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 1 mM dithiothréitol, 25 mM β-glycérophosphate, 1 mM NaF, 0,01% BSA, pH 7,5) contenant la kinase, le substrat peptidique et tout activateur. CHIR-98014 ou les contrôles sont ajoutés dans 3,5 μL de DMSO, suivi de 50 μL de stock d'ATP pour obtenir une concentration finale de 1 μM d'ATP dans tous les essais sans cellules. Après incubation, des aliquotes de 100 μL en triple sont transférées dans des plaques Combiplate huit contenant 100 μL/puits de 50 μM d'ATP et 20 mM d'EDTA. Après 1 heure, les puits sont rincés cinq fois avec du PBS, remplis de 200 μL de liquide de scintillation, scellés, laissés 30 min et comptés dans un compteur à scintillation. Toutes les étapes sont effectuées à température ambiante.
In vivo
L'inhibiteur de GSK-3 CHIR-98014 active le rapport d'activité GS dans les muscles squelettiques de type I isolés de rats Zucker minces sensibles à l'insuline et de rats ZDF résistants à l'insuline. Le muscle soléaire isolé de rats ZDF montre une résistance significative à l'insuline pour l'activation de la GS mais a répondu à 500 nM de ce composé dans la même mesure (augmentation de 40%) que le muscle de rats Zucker minces. Notamment, l'activation de la GS par l'insuline plus ce produit chimique est additive dans le muscle de rats Zucker minces et supérieure à additive dans le muscle des rats ZDF. L'activité GS totale n'est altérée ni par cet inhibiteur ni par l'insuline dans ces cellules et muscles. Parallèlement, ce composé n'influence pas la réponse dose-dépendante de l'insuline dans le muscle d'animaux minces. La réduction de l'hyperglycémie et l'amélioration de l'élimination du glucose ne sont pas limitées aux souris db/db et aux rats ZDF, car des résultats similaires sont observés avec des souris ob/ob, des souris C57BL/6 diabétiques induites par le régime alimentaire et des rats SHHF intolérants au glucose traités avec ce produit chimique. De plus, ce composé diminue la phosphorylation (Ser396) de la protéine tau dans le cortex et l'hippocampe de rats postnatals.
Références

Applications (Applications)

Méthodes Biomarqueurs Images PMID
Western blot p-AKT / AKT / p-GSK3β / GSK3β / β-catenin
S2745-WB1
28415692
Growth inhibition assay Cell viability
S2745-viability1
24779365