Name: GSK-J4 Hydrochloride
Brand: Selleck Chemicals
SKU: S7070
Rating: 5 (64 reviews)

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Contrôle Qualité

Lot : Pureté : 99.48%

99.48

Cibles apparentées	HDAC JAK BET Histone Methyltransferase PKC PARP HIF PRMT EZH2 AMPK
Autre Histone Demethylase Inhibiteurs	SP2509 GSK-LSD1 2HCl Ladademstat (ORY-1001) Dihydrochloride JIB-04 CPI-455 HCl OG-L002 IOX1 GSK J1 ML324 CPI-455

Culture cellulaire, traitement et concentration de travail

Lignées cellulaires	Type dessai	Concentration	Temps dincubation	Formulation	Description de lactivité	PMID
CUTLL1	Growth inhibitory assay	2 μM		DMSO	affects cell growth	25132549
CUTLL1	Apoptosis assay	2 μM		DMSO	induces apoptosis	25132549
CUTLL1	Function assay	2 μM		DMSO	induces cell cycle arrest	25132549
CUTLL1	Kinase assay	6 μM		DMSO	leads to increased H3K27me3	25132549
SF7761	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K27 methylation	25401693
SF8628	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K28 methylation	25401693
H3.3	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K29 methylation	25401693
SF9012	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K30 methylation	25401693
SF9402	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K31 methylation	25401693
SF9427	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K32 methylation	25401693
human astrocytes	Kinase assay	6 μM		DMSO	increases K33 methylation	25401693
SF7761	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K27M glioma cell growth	25401693
SF8628	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K28M glioma cell growth	25401693
H3.3	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K29M glioma cell growth	25401693
SF9012	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K30M glioma cell growth	25401693
SF9402	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K31M glioma cell growth	25401693
SF9427	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K32M glioma cell growth	25401693
human astrocytes	Growth inhibitory assay	6 μM		DMSO	inhibits K33M glioma cell growth	25401693
TG neurons	Function assay	50 μM		DMSO	inhibits HSV-1 reactivation from sensory neurons	25552720
Th17	Function assay	80 nM		DMSO	inhibits cell differentiation	25840993
β-cells	Function assay	20 μM		DMSO	blunts IFNγ, Il-1β, and TNFα-induced chemokine gene expression	26505193
β-cells	Function assay	20 μM		DMSO	induces β-cell dysfunction	26505193
ESCs	Function assay	1.8 µM		DMSO	induces DNA damage along with activation of the DNA damage response	26759175
Raw 264.7	Function assay	0.8192 µM		DMSO	inhibits TNF-α production	26776360
MCF7	Function assay	1 to 10 uM	30 hrs		Inhibition of KDM5A in human MCF7 cells assessed as effect on H3K4me3 methylation levels at 1 to 10 uM after 30 hrs by Western blot analysis	30392349
MCF7	Function assay	1 to 10 uM	30 hrs		Inhibition of KDM5A in human MCF7 cells assessed as effect on H3K27me3 methylation levels at 1 to 10 uM after 30 hrs by Western blot analysis	30392349
RAW264.7		0.82 uM	24 hrs		Inhibition of LPS-induced TNFalpha production in mouse RAW264.7 cells 0.82 uM after 24 hrs by ELISA	26776360
RAW264.7			24 hrs		Inhibition of LPS-induced TNFalpha production in mouse RAW264.7 cells after 24 hrs by ELISA	26776360
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Informations chimiques, stockage et stabilité

Poids moléculaire	453.96	Formule	C₂₄H₂₇N₅O₂.HCl	Stockage (À compter de la date de réception)	3 ans-20°Cpoudre
N° CAS	1797983-09-5	Télécharger le SDF		Stockage des solutions mères	1 an-80°Cen solvant 1 mois-20°Cen solvant

Solubilité

In vitro
Lot:

DMSO : 91 mg/mL (200.45 mM)
(Le DMSO contaminé par lhumidité peut réduire la solubilité. Utiliser du DMSO frais et anhydre.)

Ethanol : 91 mg/mL

Water : 10 mg/mL

Calculateur de molarité

Masse	Concentration	Volume	Poids moléculaire
=	×	×

Calculateur de dilution Calculateur de poids moléculaire

In vivo Lot:
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 40%PEG300 2 5%Tween80 3 50%ddH2O Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.	5.000mg/ml (11.01mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL of 100 mg/ml clarified DMSO stock solution to 400 μL of PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL of Tween80 to the above system, mix evenly to clarify; then continue to add 500 μL of ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Homogeneous suspension	CMC-NA	≥5mg/ml	Taking the 1 mL working solution as an example, add 5 mg of this product to 1 ml of CMC-Na solution, mix evenly to obtain a homogeneous suspension with a final concentration of 5 mg/ml.
Clear solution	5%DMSO 1 20%PEG300 2 5%Tween80 3 70%ddH2O Validé par les laboratoires Selleck. Si vous avez besoin dajustements à cette formulation, contactez notre équipe commerciale pour des tests personnalisés.	1.000mg/ml (2.20mM)	Taking the 1 mL working solution as an example, add 50 μL 20 mg/ml clarified DMSO stock solution to 200 μL PEG300, mix evenly to clarify it; add 50 μL Tween80 to the above system, mix evenly to clarify it; then continue to add 700 μL ddH2O to adjust the volume to 1 mL. The mixed solution should be used immediately for optimal results.

Calculateur de formulation in vivo (Solution claire)

Étape 1 : Saisir les informations ci-dessous (Recommandé : Un animal supplémentaire pour tenir compte des pertes pendant lexpérience)

Dosage : mg/kg Poids moyen des animaux : g Volume de dosage par animal :μL Nombre danimaux :

Étape 2 : Saisir la formulation in vivo (Ceci est seulement le calculateur, pas la formulation. Veuillez nous contacter dabord sil ny a pas de formulation in vivo dans la section Solubilité.)

% DMSO + % + % Tween 80 + % ddH₂O

%DMSO+ %

Résultats du calcul :

Concentration de travail : mg/ml;

Méthode de préparation du liquide maître DMSO : mg médicament prédissous dans μL DMSO ( Concentration du liquide maître mg/mL, Veuillez nous contacter dabord si la concentration dépasse la solubilité du DMSO du lot de médicament. )

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouterμL PEG300, mélanger et clarifier, puis ajouterμL Tween 80, mélanger et clarifier, puis ajouter μL ddH₂O, mélanger et clarifier.

Méthode de préparation de la formulation in vivo : Prendre μL DMSO liquide maître, puis ajouter μL Huile de maïs, mélanger et clarifier.

Note : 1. Veuillez vous assurer que le liquide est clair avant dajouter le solvant suivant.
2. Assurez-vous dajouter le(s) solvant(s) dans lordre. Vous devez vous assurer que la solution obtenue, lors de lajout précédent, est une solution claire avant de procéder à lajout du solvant suivant. Des méthodes physiques telles que le vortex, les ultrasons ou le bain-marie chaud peuvent être utilisées pour faciliter la dissolution.

Mécanisme daction

Targets/IC₅₀/Ki	JMJD3 (Cell-free assay) 60 nM
In vitro	Le GSK J4 HCl est un dérivé éthylique de l'inhibiteur sélectif de l'histone déméthylase JMJD3, le GSK-J1, avec une valeur IC50 supérieure à 50 μM in vitro. Ce composé est utilisé pour sonder les conséquences de la déméthylation de H3K27me3. Dans les macrophages primaires humains, ce produit chimique inhibe la production de cytokines induite par le lipopolysaccharide, y compris le facteur de nécrose tumorale (TNF) pro-inflammatoire. De plus, il prévient la perte de H3K27me3 induite par le lipopolysaccharide associée aux sites de début de transcription du TNF et bloque le recrutement de l'ARN polymérase II.
Essai kinase	AlphaScreen de la Histone Demethylase
Essai kinase	L'inhibition des histone déméthylases est évaluée à l'aide de l'essai AlphaScreen d'histone déméthylase (Amplified Luminescence Proximity Homogenous Assay). Cet essai utilise un substrat peptidique biotinylé et repose sur la détection du marqueur méthyle du produit à l'aide d'un anticorps spécifique couplé à des billes accepteuses de protéine A et d'une bille donneuse de Streptavidine pour capturer le peptide. En bref, des enzymes déméthylases recombinantes sont incubées en présence de Fe2+ sous forme de sulfate ferreux d'ammonium (FAS), d'alpha-cétoglutarate (KG) et d'un substrat peptidique biotinylé. L'acide L-ascorbique est inclus pour fournir un environnement réducteur et prévenir l'oxydation du Fe2+. Après incubation avec le substrat peptidique, la présence du produit est détectée à l'aide de la technologie AlphaScreen. Les essais AlphaScreen de déméthylase sont réalisés dans des plaques de 384 puits en format proxiplates blanches. Toutes les étapes sont effectuées dans un tampon d'essai (50 mM HEPES pH 7,5, 0,1 % (p/v) BSA et 0,01 % (v/v) Tween-20). Le FAS est dissous frais chaque jour dans 20 mM HCl à une concentration de 400 mM et dilué à 1,0 mM dans de l'eau déionisée. Tous les autres composants sont dissous frais chaque jour dans de l'eau déionisée. Pour les déterminations d'IC50, 5 μL de tampon d'essai contenant l'enzyme déméthylase sont transférés dans les puits d'une proxiplate à 384 puits. Des titrations de ce composé (0,1 μL) sont transférées dans chaque puits et les enzymes sont laissées à pré-incuber pendant 15 minutes avec ce produit chimique (la concentration finale de DMSO est de 1 %). La réaction enzymatique est initiée par l'addition de 5 μL d'un mélange de substrats composé d'alpha-KG, de FAS, d'acide L-ascorbique et du substrat peptidique biotinylé, et la réaction est incubée pendant le temps indiqué à température ambiante. La réaction enzymatique est arrêtée après le temps indiqué par l'ajout de 5 μL d'EDTA (concentration finale de 7,5 mM dans le tampon d'essai). Des billes donneuses de Streptavidine (0,08 mg/ml) et des billes accepteuses conjuguées à la protéine A (0,08 mg/ml) sont pré-incubées pendant 1 heure avec un anticorps dirigé contre le marqueur méthyle du produit et la présence de biotine-H3-produit est détectée par l'ajout de 5 μL des billes AlphaScreen pré-incubées (concentrations finales de 0,02 mg/ml pour les billes accepteuses et donneuses). La détection est laissée à se dérouler pendant 1 heure à température ambiante et les plaques d'essai sont lues dans un lecteur de plaques BMG Labtech Pherastar FS. Les données sont normalisées par rapport au contrôle sans enzyme et l'IC50 est déterminée à partir de l'ajustement de la courbe de régression non linéaire à l'aide de GraphPad Prism 5.
In vivo	Le GSK-J4 hydrochloride est un puissant inhibiteur double des H3K27me3/me2-déméthylases JMJD3/KDM6B et UTX/KDM6A. Il inhibe la production de TNF-α induite par le LPS dans les macrophages primaires humains. Ce composé est une prodrogue perméable aux cellules du GSK-J1.
Références	[1] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22842901/ [2] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/29227285/

Support technique

Instructions de manipulation

Tel: +1-832-582-8158 Ext:3

Si vous avez dautres questions, veuillez laisser un message.

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

GSK-J4 Hydrochloride Inhibiteur de la H3K27 Histone Demethylase

Structure chimique

Poids moléculaire: 453.96